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分子生物学试题1.doc

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资源描述

1、 分子生物学试题(一)第 1 页 共 13 页分子生物学试题(一)一.填空题(,每题 1分,共 20分)一.填空题(每题选一个最佳答案,每题 1分,共 20分)1. DNA的物理图谱是 DNA分子的( )片段的排列顺序。2. 核酶按底物可划分为( ) 、 ( )两种类型。3原核生物中有三种起始因子分别是( ) 、 ( )和( ) 。4蛋白质的跨膜需要( )的引导,蛋白伴侣的作用是( ) 。5真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:( )和( ) 。6分子生物学的研究内容主要包含( ) 、 ( ) 、 ( )三部分。7证明 DNA是遗传物质的两个关键性实验是( ) 、 ( ) 。8hnRNA 与

2、 mRNA之间的差别主要有两点:( ) 、 ( ) 。9蛋白质多亚基形式的优点是( ) 、 ( ) 、 ( ) 。二.名词解释(共 8题,每题 4分,共 32分)1.质粒 2.启动子 3.信号肽 4. 核受体 5. hnRNA 6.分子杂交 7.基因组文库 8. 密码的简并性 三.简答题(每题 12分,共 52分)1.简述乳糖操纵子的正负调控机制2.简述转录的基本过程。3.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异.4.试比较原核和真核细胞的 mRNA的异同.分子生物学试题(一)参考答案一.填空题(每题选一个最佳答案,每题 1分,共 20分)1. DNA的物理图谱是 DNA分子的(限制性内切酶

3、酶解 )片段的排列顺序。2. 核酶按底物可划分为(自体催化) 、 (异体催化 )两种类型。3原核生物中有三种起始因子分别是(IF-1) 、 ( IF-2 )和(IF-3 ) 。4蛋白质的跨膜需要( 信号肽 )的引导,蛋白伴侣的作用是(辅助肽链折叠成天然构象的蛋白质) 。5真核生物启动子中的元件通常可以分为两种:(核心启动子元件 )和(上游启动子元件 ) 。6分子生物学的研究内容主要包含(结构分子生物学 ) 、 (基因表达与调控 ) 、 ( DNA重组技术 )三部分。7证明 DNA是遗传物质的两个关键性实验是(肺炎球菌感染小鼠 ) 、 ( T2噬菌体感染大肠杆菌 )这两个实验中主要的论点证据是:

4、(生物体吸收的外源 DNA改变了其遗传潜能 ) 。8hnRNA 与 mRNA之间的差别主要有两点:( hnRNA 在转变为 mRNA的过程中经过剪接, ) 、( mRNA 的 5末端被加上一个 m7pGppp帽子,在 mRNA3末端多了一个多聚腺苷酸(polyA)尾巴) 。9蛋白质多亚基形式的优点是(亚基对 DNA的利用来说是一种经济的方法 ) 、 (可以减少蛋白质合成过程中随机的错误对蛋白质活性的影响) 、 (活性能够非常有效和迅速地被打开和被关闭 ) 。二.名词解释(共 8题,每题 4分,共 32分)1.质粒质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以

5、外的脱氧核糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的 DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。2.启动子是 DNA分子可以与 RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始过程。3. 信号肽:在蛋白质合成过程中 N端有 1536个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。4. 核受体细胞内受体分布于胞浆或核内,本质上都是配体调控的转录因子,均在核内启动信号转导并影响基因转录,统称核受体。5.hnRNA核不均一 RNA,即 mRNA的前体,经过 5加帽和 3酶切加

6、多聚 A,再经过 RNA的剪接,将外显子连接成开放阅读框,通过核孔进入细胞质就可以作为蛋白质合成的模板了。 6.分子杂交互补的核苷酸序列通过 Walson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链分子 DNA分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。7.基因组文库将某种生物的基因组 DNA切割成一定大小的片段,并与合适的载体重组后导入宿主细胞,进行克隆。这些存在于所有重组体内的基因组 DNA片段的集合,即基因组文库,它包含了该生物的所有基因。8. 密码的简并性由一种以上密码子编码同一个氨基酸的现象称为密码的简并性三.简答题(每题 12分,共 5

7、2分)1.简述乳糖操纵子的正负调控机制答案要点:包括正负调控两种()阻遏蛋白的负调控当细胞内有诱导物时,诱导物结合阻遏蛋白,此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。当无诱导物时,阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录。 (=)CAP 正调控当细胞内缺少葡萄糖时 ATPCAMP 结合,CRP 生成 CAP与 CAP位点结合,增前 RNA聚合酶转录活性。当有葡萄糖存在时 CAMP分解多合成少,CAP 不与启动子上的 CAP位点结合 RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。2.简述转录的基本过程?答案要点: 转录的基本过程包括:模板的识别;转录起始;通过启

8、动子;转录的延伸和终止。要求叙述各过程设计到的因子。3.简述原核和真核细胞在蛋白质翻译过程中的差异.答案要点:1、起始因子不同;2、翻译过程(肽链延伸)因子不同;3、终止因子不同。要求详述其差异。4.试比较原核和真核细胞的 mRNA的异同.答案要点:真核生物 5端有帽子结构大部分成熟没 mRNA 还同时具有 3多聚 A尾巴,原核一般没有;原核的没 mRNA 可以编码几个多肽真核只能编码一个。原核生物以 AUG作为起始密码有时以GUG,UUG 作为起始密码,真核几乎永远以 AUG作为起始密码。原核生物 mRNA半衰期短,真核长。原核生物以多顺反子的形式存在,真核以单顺反子形式存在。本科生分子生物

9、学试卷(二)一、选择题,选择一个最佳答案(每小题 1.5分,共 30分)1.DNA 双螺旋结构模型的描述中哪一条不正确:A.腺嘌呤的克分子数等于胸腺嘧啶的克分子数B.同种生物体不同组织中的 DNA碱基组成极为相似C.DNA 双螺旋中碱基对位于外侧D.二股多核苷酸链通过 A-T,C-T之间的氢键连接E.维持双螺旋稳定的主要因素是氢键和碱基堆集力。2.有关 DNA的变性哪条正确:A.变性是分子中磷酸二酯键的断裂B.变性后紫外吸收增加C.变性后粘度增加D.热变性 DNA速冷后可复性E.DNA 分子开始变性的温度叫 Tm3.DNA 聚合酶 III的描述中哪条不对:A.需要四种三磷酸脱氧核苷酸作底物B.

10、具有 53外切酶活性C.具有 35外切酶活性D.具有 53聚合活性E.聚合反应需要引物4.有关反转录的正确叙述:A.反转录反应不需要引物B.反转录后的产物是 cDNAC.反转录的板可以是 RNA,也可以是 DNAD.合成链的方向是 35E.反转录反应的底物是 4种 NTP。5.有关蛋白质合成,下列哪条是错误的:A.基本原料是 20种氨基酸B.直接模板是 mRNAC.合成的方向是从羧基端到氨基础D.是一个多因子参加的耗能过程E.是多聚核蛋白体循环6.在乳糖操纵子中,阻遏蛋白结合的是:A.操纵基因 B.调节基因C.启动基因 D.结构基因E.终止基因7.氨基酸活化酶:A.能识别一组同功 tRNAB.

11、催化磷酸二酯键的形成C.催化氨基酸结合到 tRNAD.催化氨基酸的氨基与 tRNA结合E.催化氨基酸的羧基与 GTP反应8.稀有核苷酸含量最高的核酸是:A.tRNA B.mRNA C.rRNA D.DNA E.hnRNA9.真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是:A.翻译与转录偶联进行B.模板都是多顺反子C.转录后的产物都需要进行加工修饰D.甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸E.都需要 GTP10.与 pCAGCT互补的 DNA序列是:A.pAGCTG B.pGTCGA C.pGUCGAD.pAGCUG E.pTCGAC11.色氨酸操纵子的调控需要:A.增强子 B.转录子 C.衰减子D.顺反子 E.调节子1

12、2.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码:A.甲硫氨酸 B.S-腺苷蛋氨酸 C.苯丙氨酸D.丙氨酸 E.以上都不是,而是 TAG13.真核细胞中 mRNA的加工修饰不包括:A.在 mRNA3末端另 polyA尾B.mRNA 的前体是核内 hnRNAC.在 mRNA5端形成 7甲基尿苷酸帽子结构D.除去非结构信息部分E.不同 RNA片断之间的拼接14.真核生物基因组中没有:A.内含子 B.外显子 C.转录因子D.插入序列 E.高度重复序列15.DNA 的半保留复制需要A.核心酶和单链 DNA结合蛋白 B.模板 DNA和四种 NTPC.引物和 RNA聚合酶 D.DNA 引物和连接酶E.冈崎片段和终

13、止因子16.PCR 实验的特异性主要取决于A.DNA 聚合酶的种类 B.反应体系中模板 DNA的量C.引物序列的结构和长度 D.四种 dNTP的浓度E.循环周期的次数17.RNA 电泳转移后与探针杂交叫作:A.Southernblot B.NorthernblotC.Westernblot D.斑点杂交E.原位杂交18.对限制性核酸内切酶的作用,下列哪个不正确:A.识别序列长度一般为 4-6bpB.识别序列具有回文结构C.切割原核生物 D分子D.只能识别和切割双链 DNA分子E.只能识别和切割原核生物 DNA分子19.在基因工程实验中,DNA 重组体是指:A.不同来源的的两段 DNA单链的复性

14、B.目的基因与载体的连接物C.不同来原的 DNA分子的连接物D.原核 DNA与真核 DNA的连接物E.两个不同的结构基因形成的连接物20.对基因工程载体的描述,下列哪个不正确:A.都可以转入宿主细胞B.都有限制性核酸内切酶的识别位点C.都可以连接进目的基因D.都是环状双链 DNA分子E.都有筛选标志二、简答题(每题 5分,共 40分)1.衰减子 2.DNA 拓扑异构酶 3.基因表达 4.前导肽 5.启动子 6. DNA 分子克隆技术7.G 蛋白 8.受体型酪氨酸激酶 三、论述题(每题 10分,共 30分)1.操纵子中的诱导剂和辅阻遏对基因表达的调控有何不同? 2.细胞内第二信使包括哪些物质?它

15、们是怎样产生的,有何作用? 3.PCR 和细胞内 DNA复制两者有哪些主要的相同点和不同点?本科生分子生物学试卷(二)参考答案一、选择题,选择一个最佳答案(每小题 1.5分,共 30分)1.D;2.B;3.A;4.A;5.A;6.C;7.C ;8.C ;9.B; 10.E 二、填空题(每题 1分)1质粒 DNA具有三种不同的构型分别是:( SC构型 ) 、 ( oc构型 ) 、 ( L构型 ) 。在电泳中最前面的是( SC 构型 ) 。2.哺乳类 RNA聚合酶启动子中常见的元件 TATA、GC、CAAT 所对应的反式作用蛋白因子分别是( TFIID ) 、 ( SP-1 )和( CTF/NF1

16、 ) 。3. 与 DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,转录因子与 DNA结合的功能域常见有以下几种( 螺旋-转角-螺旋 ) 、 ( 锌指模体 ) 、 (碱性-亮氨酸拉链模体 ) 。4. 转基因动物常用的方法有:(逆转录病毒感染法) 、 (DNA 显微注射法) 、 (胚胎干细胞法 ) 。5. RNA聚合酶的基本转录因子有、TF-A、TF-B、TFII-D、TF-E 他们的结合顺序是: ( D、A、B、E ) 。其中 TFII-D的功能是(与 TATA盒结合 ) 。三、简答题(每题 5分,共 40分)1.衰减子答案要点:在色氨酸操纵子中,当 mRNA合成起始以后,除非培养基中完全没有色氨酸

17、,否则,转录总是在长 162bp的前导区终止,产生一个仅有 140个核苷酸的 RNA分子,终止 trp基因转录,因为转录终止发生在这一区域,并且这种终止是被调节的,这个区域被称为衰减子。2.DNA拓扑异构酶答案要点:DNA 在细胞内往往以超螺旋状态存在,DNA 拓扑酶催化同一 DNA分子不同超螺旋状态之间的转变。DNA 拓扑异构酶有两类,大肠杆菌的 蛋白(MW-110000)就是一种典型的拓扑异构酶.它的作用是暂时切断一条 DNA链,形成酶-DNA 共价中间物而使超螺旋 DNA松弛化,然后再将切断的单链 DNA连接起来,而不需要任何辅助因子。而大肠杆菌中的 DNA旋转酶(DNAgyrase)则

18、的典型的拓扑异构酶,能将负超螺旋引入 DNA分子,该酶能暂时性地切断和重新连接双链 DNA,同时需要 ATP水解为 ADP以供能。 3.基因表达答案要点:遗传信息从 DNA到 RNA再到蛋白质的过程。4.前导肽答案要点:分析色氨酸操纵子前导肽的序列发现,它包括起始密码子 AUG和终止密码子 UGA;如果翻译起始于 AUG,应该产生一个 14个氨基酸的多肽,这个假设的多肽被称为前导肽(实际上还没有观察到) 。5.启动子 答案要点:启动子是 DNA分子可以与 RNA聚合酶特异结合的部位,也就是使转录开始的部位。在基因表达的调控中,转录的起始是个关键。常常某个基因是否应当表达决定于在特定的启动子起始

19、过程。6. DNA分子克隆技术答案要点:(也称基因克隆技术) 在体外将 DNA分子片段与载体 DNA片段连接,转入细胞获得大量拷贝的过程中 DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括:制备目的基因将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成 DNA重组导入宿主细胞筛选、鉴定扩增和表达。载体(vecors)在细胞内自我复制,并带动重组的分子片段共同增殖,从而产生大量的 DNA分子片段。主要目的是获得某一基因或 NDA片段的大量拷贝,有了这些与亲本分子完全相同的分子克隆,就可以深入分析基因的结构与功能,随着引入的 DNA片段不同,有两种 DNA库,一种是基因组文库(genomic librar

20、y),另一种是 cDNA文库。7.G蛋白 答案要点:受体与配体结合后即与膜上的偶联蛋白结合,使其释放活性因子,再与效应器发生反应。位于受体与效应器之间的则是偶联蛋白。目前所知的偶联蛋白种类较多,都属于结构和功能极为类似的一个家族,由于它们都能结合并水解 GTP,所以通常称 G蛋白,即鸟苷酸调节蛋白(guanine nucleotide regulatory protein) 。8.受体型酪氨酸激酶答案要点:蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)是一组催化酪氨酸残基磷酸化的酶,他们通过从三磷酸腺苷上转移一个磷原子到酪氨酸残基上,而使底物蛋白活化. 目前,已发现

21、PTK有 100多个家族成员,他们通过活化底物蛋白,参与细胞的信号转导,最终,这些信号转导入细胞核内,引起某些基因表达水平的改变,使诸如细胞生长之类的复杂的细胞功能得以调节. 因此在调节细胞的分化、生长和激活中起到重要作用.根据 PTK的结构,可分为受体型和非受体型 PTK两大类,前者又称跨膜 PTK,后者又称细胞内 PTK. 生长因子受体 PTK(受体型酪氨酸激酶或 RTK): 这一类蛋白酪氨酸激酶为跨膜蛋白,其胞外部分为配体结合区,中间有跨膜区,胞内部分含有蛋白酪氨酸激酶的催化结构域. 根据他们的结构不同可分为,表皮生长因子受体(EGFR)家族、胰岛素受体家族、血小板衍生生长因子(PDGF

22、)受体家族和成纤维细胞生长因子受体(FGFR)家族.四、论述题(每题 10分,共 30分)1. DNA与蛋白质相互作用研究方法及其原理? 答案要点:1、凝胶阻滞实验;2、DNaseI 足迹实验。原理参见朱玉贤高教(二)版现代分子生物学教材 166170页。2.试述真核生物基因表达调控的一般规律? 答案要点:分为两大类:(一)瞬时调控或称可逆调控,它相当于原核细胞对环境条件作出的反应,包括某种底物或激素水平升降时,或细胞不同阶段中酶活性的调节;(二)发育调控或称不可逆调控,是真核基因调控的精髓部分,它决定了真核细胞生长、分化、发育的全部进程。根据基因调控在同一事件中发生的先后次序,又可将其分为转

23、录水平、转录后水平调控。后者又进一步分为 RNA加工成熟过程调控、翻译水平调控和蛋白质加工水平的调控。3.细胞内第二信使包括哪些物质?有何作用? 答案要点:生物细胞的信号分子从溶解性来看又可分为脂溶性和水溶性两类。脂溶性信号分子,如甾类激素和甲状腺素,可直接穿膜进入靶细胞,与胞内受体结合形成激素-受体复合物,调节基因表达。水溶性信号分子,如神经递质、细胞因子和水溶性激素,不能穿过靶细胞膜,只能与膜受体结合,经信号转换机制,通过胞内信使(如 cAMP)或激活膜受体的激酶活性(如受体酪氨酸激酶) ,引起细胞的应答反应。所以这类信号分子又称为第一信使(primary messenger) ,而 cA

24、MP这样的胞内信号分子被称为第二信使(secondary messenger) 。目前公认的第二信使有 cAMP、cGMP、三磷酸肌醇(IP3)和二酰基甘油(DG) ,Ca2+被称为第三信使是因为其释放有赖于第二信使。第二信使的作用是对胞外信号起转换和放大的作用。本科生分子生物学试卷(三).选择题(每题只选一个答案,每题 1.5分)1.有关 DNA链的描述哪条不对A.DNA是由很多脱氧单核苷酸形成的多核苷酸B.DNA5端是-OH 基,3端是磷酸C.DNA一级结构的书写为 P:pACTGACD.单核苷酸之间通过磷酸二酯键相连E.DNA的一级结构是指 dAMP,dGMP,dCMP,dTMP的排列2

25、.有关 DNA变性的描述哪条对?A.DNA 变性时粘度增加 B.变性时磷酸二酯键断裂C.DNA 变性温度的中点叫 TmD.DNA变性时紫外吸收增加E.DNA 变性时 280nm波长吸收增加3.DNA聚合酶催化的反应A.催化四种单核苷酸的聚合B.需要 DNA做引物C.DNA 聚合酶有种属特异性D.产物 DNA的性质取决于模板,与 DNA聚合酶来源无关E.沿着 3-5方向合成4.自然界中以 DNA为遗传物质的大多数生物 DNA的复制方式:A.环式 B.D-环式 C.半保留D.全保留 E.散布式5.真核细胞 mRNA的加互修饰不包括:A.除去非结构信息部分 B.在 mRNA的 3末端加 polyA尾

26、巴C.经过较多的甲基化过程 D.在 mRNA的 5末端形成帽子结构E.mRNA 由核内不均一 RNA转变而来6.下列哪种氨基酸的密码子可作为起始密码子?A.苯丙氨酸; B.酪氨酸; C.甲硫氨酸;D.S-腺苷蛋氨酸 E.以上均不是,而是 TAG7.翻译的起始不需要:A.Met-tRNA B.mRNA 模板 C.核蛋白体D.起始因子 E.dGTP8.下面哪些因素可防止 DNA上的一个点突变表现在蛋白质的一级结构?A.DNA 的修复作用 B.密码的简并性C.校正 tRNA的作用 D.核糖体对 mRNA的校正E.以上都正确9.关于氨基酰 tRNA合成酶,哪项不正确?A.有 20种,对应于 20种氨基

27、酸 B.可使酶识别 tRNA和氨基酸C.有 及/或 亚基 D.疏基酶E.借次级键与相应的氨基酸结合10.真核基因调控中最重要的环节是:A.基因重排; B.基因转录; C.DNA 的甲基化与去甲基化;D.mRNA 的半衰期; E.翻译速度;二、名词解释(每题 3分)1cDNA 与 cccDNA2CAP 3回文序列:4micRNA: 5核酶: 6信号肽:7弱化子: 8上游启动子元件:9DNA 探针: 10SD 序列:11单克隆抗体: 12顺式作用元件:13Klenow 酶: 三.问答题1. 激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?(12 分) 2. 典型的 DNA重组实验通常包括哪些步骤?(12 分

28、)3. 分别说出 5种以上 RNA的功能? (11 分) 4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面? (11 分)本科生分子生物学试卷(三)、单选题(每题只选一个答案,每题 1.5分)1.E 2. B 3. D.4. C 5. A 6. C 7. C 8. E 9. A 10. B二、名词解释(每题 3分)1cDNA 与 cccDNA:cDNA 是由 mRNA通过反转录酶合成的双链 DNA;cccDNA 是游离于染色体之外的质粒双链闭合环形 DNA。2CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白 CRP(cAMP receptor protein ) ,cAMP 与 CRP结合后所形成的复合物称激

29、活蛋白 CAP(cAMP activated protein )3回文序列:DNA 片段上的一段所具有的反向互补序列,常是限制性酶切位点。4micRNA:互补干扰 RNA或称反义 RNA,与 mRNA序列互补,可抑制 mRNA的翻译。5核酶:具有催化活性的 RNA,在 RNA的剪接加工过程中起到自我催化的作用。6信号肽:在蛋白质合成过程中 N端有 1536个氨基酸残基的肽段,引导蛋白质的跨膜。7弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。8上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的 DNA序列,-10 区的 TATA、-35 区的TGACA及增强子,弱化子等。9

30、DNA 探针:是带有标记的一段已知序列 DNA,用以检测未知序列、筛选目的基因等方面广泛应用。10SD 序列:是核糖体与 mRNA结合序列,对翻译起到调控作用。11单克隆抗体:只针对单一抗原决定簇起作用的抗体。12顺式作用元件:在 DNA中一段特殊的碱基序列,对基因的表达起到调控作用的基因元件。13Klenow 酶:DNA 聚合酶 I大片段,只是从 DNA聚合酶 I全酶中去除了 5 3外切酶活性三.问答题1. 激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用?(12 分) 答案要点:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白 CRP(cAMP receptor protein) ,cAMP 与 CRP结合后所形成的复合

31、物称激活蛋白 CAP(cAMPactivated protein ) 。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP 合成量增加,CAP 具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。一些依赖于 CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35 区序列特征(TTGACA) 。因此 RNA聚合酶难以与其结合。 CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面:CAP 通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10 区结合,起到取代-35区功能的作用。CAP 还能抑制 RNA聚合酶与 DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。2. 典型的 D

32、NA重组实验通常包括哪些步骤?(12 分)答案要点:a、提取供体生物的目的基因(或称外源基因) ,酶接连接到另一 DNA分子上(克隆载体) ,形成一个新的重组 DNA分子。 b、将这个重组 DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化。 c、对那些吸收了重组 DNA的受体细胞进行筛选和鉴定。 d、对含有重组 DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达。3. 分别说出 5种以上 RNA的功能? (11 分) 答案要点:转运 RNA tRNA 转运氨基酸 核蛋白体 RNA rRNA 核蛋白体组成成 信使 RNA mRNA 蛋白质合成模板 不均一核 RNA hnRNA 成熟 m

33、RNA的前体 小核 RNA snRNA 参与 hnRNA的剪接小胞浆 RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义 RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核 酶 Ribozyme RNA 有酶活性的 RNA4. 对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面? (11 分)答案要点:天然质粒往往存在着缺陷,因而不适合用作基因工程的载体,必须对之进行改造构建:a、加入合适的选择标记基因,如两个以上,易于用作选择,通常是抗生素基因。b、增加或减少合适的酶切位点,便于重组。 c、缩短长度,切去不必要的片段,提高导入效率,增加装载量。d、改变复制子,变严

34、紧为松弛,变少拷贝为多拷贝。本科分子生物学试卷(4)一、注名词解释(14)1. DNA的半不连续复制 2. 聚合酶链式反应 3. 核酸杂交 4. 增强子 5. 内含子 6. 锌指(zinc finger)7. 转座子 8. 摆动假说 9. 基因 10.基因家族二、填空题(20)1.酵母 DNA按摩尔计含有 32.8%的 T,则 A为_,G 为_和 C为_.2. 核酸变性后可发生_效应.3. 在真核生物中 DNA复制的主要酶是_5. 操纵子包括_,_和_.6. DNA合成仪合成 DNA片断时,用的原料是 、 、 、 、 。 7大肠杆菌 DNA依赖的 RNA聚合酶由 2 五个亚基组成, 亚基与转录

35、启动有关。8.在琼脂糖电泳中,DNA 会向 极移动。9.染色体包括 、 两大部分。三、判断题(10)1 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。2. 由于密码子存在摇摆性,使得一种 tRNA分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子 。3. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。4. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。5. 基因组 DNA复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA ()6. 蛋白质由二十种氨基酸组成,包括胱氨酸。 (-)7. 色氨酸操纵子(trpoperon)中含有衰减子序列()8. 对正调控和负

36、调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录()四、问答题(16)1.简述 tRNA的结构特征及其作用与作用机制。(8)2. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。 (8)3. 遗传密码的性质(6)4. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构(12)5. 比较原核生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的 RNA内含子剪接的主要方式(12) 。五、实验题1PCR 原理 2CTAB 法提取总 DNA原理本科分子生物学试卷(四)参考答案二、名词解释(10)1. RNA编辑( RNA editing) 是某些 RNA,特别是 mRMA的一种加工方式,它导致了 DNA 所编码的遗传信息的

37、改变,是因为经过编辑的 mRNA序列发生了不同于模板 DNA的变化。2. 反密码子tRNA 上能与密码子以碱基互补方式配对的对应碱基,一般具有“摆动性” 。3. 转座子 (transposon) 是存在于染色体 DNA上可自主复制和位移的基本单位。4. 基因(gene) 产生一条多肽链或功能 RNA所必须的全部核苷酸序列。5. 基因簇( gene cluster) 真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族,同一家族的成员有时紧密的排列在一起,成为基因簇。二、填空题(每空 1共 20)1. 增色效应 2. 不重复序列 、中度重复序列、高度重复序列 3. 调控基因、调控蛋白结合位点

38、和结构基因。4. 变性、退火、延伸 。5. 2,。6. 肺炎球菌感染小鼠 、T2 噬菌体感染大肠杆菌 。7. 螺旋-转角-螺旋 、锌指、碱性-亮氨酸拉链。三、判断题(每题 2,共 10)1. 由于密码子存在摇摆性,使得一种 tRNA 分子常常能够识别一种以上同一种氨基酸的密码子 。 ( )答:是由于反密码子具有摇摆性而不是密码子,是由于密码子具有简并性。2. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。 ( )答:半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板,复制出新链,后代与前代有相同的遗传信息。3.凝胶的分辨能力同凝胶的类型和浓度有关,浓度越低,分辨力越强 。( )答

39、:浓度越低,分辨力越弱。本科分子生物学试卷(五)一、名词解释(14)1. C-值 2. 内含子 3. 锌指(zinc finger) 4. 转座子 5. 基因家族二、填空题(20)1. 酵母 DNA按摩尔计含有 32.8%的 T,则 A为_,G 为_和 C为_。2. 操纵子包括_、_和_。3. DNA合成仪合成 DNA片段时,用的原料是 、 、 、 、 。 4. 在琼脂糖电泳中,DNA 会向 极移动。5. 染色体包括 、 两大部分。6. 环状 DNA双链的复制主要可分为 、 、 三种类型。7. 转录的基本过程包括 、 、 。三、判断题(10)(对在题后的括号里划“” ,错的划“”并说明理由)1

40、. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。 ( )2. 原核生物中封闭性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。 ( )3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。 ( )4. 基因组 DNA复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。( )8. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。 ( )四、问答题(46)1. 简述遗传密码的性质(6)2.简述 tRNA的结构特征及其作用与作用机制。(8)3. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。 (8)4. 图示大肠杆菌复制叉的结构并标明各组分结构(12)5. 比较原核

41、生物与真核生物基因组结构的不同,并指出真核生物细胞的 RNA内含子剪接的主要方式(12) 。五、实验题(10) (任选一题,全作该题不得分)1. 简述 PCR原理。3. 设计一个实验证明 DNA的复制是半保留复制。本科分子生物学(五)参考答案二、名词解释(每个 2,共 10)1. C-值(C-value):通常是指一种生物单倍体基因组 DNA的总量。2. 内含子(intron):指基因组中的非编码序列。3. 锌指(zinc finger) :属于反式作用因子,其特有的半胱氨酸和组氨酸之间氨基酸残基数基本恒定,有锌参与才具备转录调控活性。4. 转座子(transposon) :是存在于染色体 D

42、NA上可自主复制和位移的基本单位。5. 基因家族(gene family):真核生物中许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族。二、填空题(每空 1,共 20)1. A为 32.8%,G为 17.2%,C 为 17.2%。2. 调控基因、调控蛋白结合位点和结构基因。3. 模板 DNA,TAQ 酶,引物,缓冲液,dNTP。 4. 正。5. 蛋白质,染色体。6. 形,滚环形,D-环形。7. 转录的起始,延伸,终止。三、判断题(每题 2,共 10)(对在题后的括号里划“” ,错的划“”并说明理由)4. 增强子的作用具有细胞或组织的特异性。 ( )答:没有细胞或组织的特异性。5. 原核生物中封闭

43、性启动子复合物为二元复合物,开放性启动子复合物为三元复合物。 ( )3. 半保留复制是指有 50%的基因是新合成的,另 50%的基因是上一代的。 ( )答:半保留复制指的是复制时只能以一条链为模板,复制出新链,后代与前代有相同的遗传信息。4. 基因组 DNA复制时,先导链的引物是 DNA,后随链的引物是 RNA 。( )答:都是 RNA5. 对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录。 ( )四、问答题(24)1. 简述遗传密码的性质(6)答案要点:简并性;通用性;特殊性2.简述 tRNA的二级结构特征并指明作用与作用机制。(8)答案要点:其结构见朱玉贤教材 p109:1. tRNA

44、携带 AA,是一种酶促反应,也称 AA的活化 2、 氨基酰是 tRNA 是 AA参与蛋白合成的活化形式。 AA 的活化:氨基酸+ATP-E 氨基酸-AMP-E+PPi3、 每活化一分子 AA需消耗 ATP的 2个高能磷酸键。 AA 的转移:氨基酸+ AMP-E+ tRNA 氨基酸-tRNA+AMP+E 4、 氨基酰 tRNA合成酶是高度专一性,既能高度特异性识别 AA,又能高度特异性识别相应,这两点是保证翻译准确进行的基本条件之一。5.氨基酰 AMP-E复合体:作为中间产物,利于酶分别对 AA和 tRNA两种底物特异辨认,如有错配,合成酶有校正活性,水解磷酸酯键,与正确底物结合。2. 图示大肠

45、杆菌复制叉的结构并标明各组分名称(10)答案要点:有:DNA 解旋酶、DNA 旋转酶、DNA 单链结合蛋白、RNA 引物、DNA 连接酶、DNA 聚合酶、其它成分。图略。五 论述题(两题,共 26)1. 比较原核生物与真核生物基因组结构的异同,并指出真核生物细胞的 RNA内含子剪接的主要方式(12) 。答案要点:主要从重复序列情况,有无内含子外显子方面论述,剪接的主要方式指 GU-AG和 AU-AC类内含子的间接以及 I、II 类内含子的间接方式。2. 比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。 (14)答案要点:共同点是两者主要是在转录水平进行调控;不同点是原核生物转录与翻译偶联,以操纵子

46、调控的现象普遍;真核生物基因表达复杂,转录和翻译是分开的,转录后从细胞核进入细胞质,调控因此也比较复杂,在 DNA水平、转录水平和翻译水平均存在。六、实验题(10) (任选一题,全作该题不得分)1. 简述 PCR原理。答案要点:PCR 是在体外扩增 DNA序列的方法,原理并不复杂,首先将双链 DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链 DNA分子,DNA 聚合酶以单链 DNA 为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的 DNA互补链。包括:DNA 解链(变性) 、引物与模板 DNA结合(退火)DNA合成(延伸)三步,可以被不断重复。2. 设计一个实验证明 DNA的复制是半保留复

47、制。答案要点:先将大肠杆菌放在 15NH4C1培养基中生长多代,使几乎所有的 DNA都被 15N标记后,再将细菌移到只含有 14NH4C1的培养基中培养。随后,在不同的时间取出样品,用十二烷硫酸钠(SDS)裂解细胞后,将裂解液放在 CsC1溶液中进行密度梯度离心(140000g,20 小时)。离心结束后,从管底到管口,溶液密度分布从高到低形成密度梯度。DNA 分子就停留在与其相当的 CsC1密度处,在紫外光下可以看到形成的区带。 14N - DNA分子密度较轻(1.7g / cm3),停留在离管口这较近的位置; 15N - DNA密度较大停留在较低的位置上。当含有 15N-DNA的细胞在 14NH4C1培养液中培养一代后,只有一条区带介于 14N - DNA与 15N - DNA之间,这时在 15N-DNA区已没有吸收带,说明这时的 DNA一条链来自 15N - DNA,另一条链为新合成的含有 14N的新链。培养两代后则在 14N - DNA区又

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