1、398 主堡区堡瘸堂盘查2Q!Q生查旦笠!璺鲞璺塑蝤丛魁B丝Q!,gn垫!Q,Y烈:!生理Q:鱼抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体在类风湿关节炎中的诊断价值赵华明 茹晋丽 李小峰 罗静张改连 吕志勤 李园【摘要】目的通过与类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的比较探讨抗突变型瓜氨酸波形蛋一(MCV)抗体对类风湿关节炎(RA)的诊断价值,方法采用酶联免疫吸附试验(El。ISA)定量检测177例RA患者、46例其他风湿性疾病患者及48名健康对照者血清中抗MCV水平,并同时测定血清中抗CCP抗体、RF水平。采用t检验和,检验。结果抗MCV抗体在RA组、疾病对照组及健康对照组的抗体平均滴度依次为(5
2、23376)、(9655)、(3418)Ulml;此外,通过ROC曲线计算曲线下面积来确定最佳阳性阈值(分别以20、40、60、80、100、120、140 Um1),结果为0521、0706、0769、0791、0816、0826、0822。其中以抗MCV抗体120 Uml为阳性阈值临床诊断效能最大。所以本研究以抗MCV抗体120Uml为阳性阈值对RA诊断的敏感性为780,特异性为872,阳性预测值及阴性预测值分别为92O和678;抗MCV抗体对RA诊断的特异性与抗CCP抗体相当,但敏感性高于抗CCP抗体;与RF相比较,抗MCV抗体的敏感性和特异性均高于前者。抗MCV抗体联合抗CCP抗体或R
3、F或三者联合检测对诊断RA的特异性提高到957;此外,67例抗CCP抗体阴性的RA患者中有32例抗MCV抗体阳性,占552,59例RF阴性的RA患者中有31例抗MCV抗体阳性,占525。结论抗MCV抗体呵以作为RA的临床诊断血清学指标之一,与抗CCP抗体、RF联合榆测町提高对RA诊断的特异性。【关键词】关节炎,类风湿;自身抗体;抗突变型瓜氨酸波形蛋白抗体;类风湿【j子Value of anti-mutated citrullinated vimentin antibodies in diagnosing rheumstoid arthritis zHAoHua-ming,RU j讽一hLI X
4、iao-reng,LUoring,zHA NG Gailian,Lb孤一q试,LI YuanDepartment ofRheumatology and Immunology,the Second Hospital ofShanxi Medwd University,Taiyuan 030001。ChinaCorresponding author:Rl五nli,Email:rujinli163com【Abstract】objective To assess the diagnostic value of antimutated eitrullinated vimentin antibodies(
5、antiMCV)for rheumatoid arthritis(RA)and compare,it with anticyclic citrullinated peptide antibodies(antiCCP)rheumatoid factors(RF)Methods Commercially available enzymelinked immunosorbontassay(ELISA)kit was used to detect antiMCV antibodies in a group of 177 RA patients46 patients withother rheumati
6、c diseasesand 48 healthy blood donomAt the勖tme timeantiCCP。RF were detectedT testand r test were selectedResults The average concentration of antiMCV was(523376)Uml in RA,(9655)Uml in patients with other rheumatic diseases(34l 8)Uml in healthy controlsDifie,rent thresholdlevels【20,40,6080,100。120,14
7、0 Um1)for positive results were cateulated bythe areas under the ROCcurve(the areas were 0521,0706,0769,079l,08160826,0822)。then the best diagnosis efficacyfor RA was determined as more than 120 Um1At this levelthe sensitivity and the specificity for antiMCVwere 801and 809for RA diagnosisThe positiv
8、e and negative predictive value were 92and 678Comparing with antiCCPantiMCV showed comparable specificity but higher sensitivityAnd il,s also betterthan RF apparentlyIf all 3 antibodies were detected at the same time,or antiMCV combine with one of themthe sensitivity would increase to 957In addition
9、AntiMCV showed positive in 32 of 67(552)patientswith RA whose antiCCP was negativemeanwhile 31 of 59(525)patients with RA whose RF was negativeConclusion RF and anti-CCP tirecomplementary in diagnosing RAThe combination detection of RF andantiCCP could significantly improve the specificity for the d
10、iagnosis of RA【Key words】Arthritis,rheumatoid;Autoantibody;Antimutated eitmllinated vimentin antibodies;Rheumatoid factorDOh 103760craajissn1007-7480201006Ol l基金项目:山西医科大学第二医院新技术新项目(20090505);IlJ西医科大学大学生刨新项目基金(2009)作者单位:030001太原,山西医科大学第二医院风湿免疫科通信作者:茹晋丽。Email:mjinli163tom万方数据拌凰遑痘学盘查20!Q堡鱼旦箍塑查箩鱼塑cb也墅?t
11、趔丛,j墼g三Q四d趟:!生奠垫鱼类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性致残性自身免疫病,早期诊断、早期规范治疗可以减少关节的破坏并改善预后。类风湿因子(RF)作为1987年美国风湿病学会(ACR)的RA分类标准中的唯一血清学指标,特异性差,敏感性低。特别是在早期RA诊断方面121。近年来。有多种针对RA的自身抗体用于临床I。目前,临床采用最多的是检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体ps一,在RA中敏感性41768O,特异性为82一96,有取代RF的趋势。在最近的研究I-ol中发现,抗CCP抗体阴性的RA患者血清中可检测出抗突变型瓜氨酸波形蛋白(MCV)抗体。MCV
12、来源于人类的天然蛋白。比CCP相对分子质量小,具有多个潜在的抗原决定簇,与抗CCP抗体相比较,抗MCV抗体具有较高的特异性和敏感性J。据文献10-15报道,抗MCV抗体诊断RA的阳性阈值并不相同。因此,本研究通过检测RA患者血清抗MCV抗体。确定抗MCV抗体诊断RA的最佳阳性阑值,并与抗CCP抗体、RF比较,评价抗MCV抗体在RA诊断中的价值。I对象与方法1I研究对象RA患者177例。来自2007年4月至2009年7月年我院门诊及住院患者,诊断均符合1987年美国风湿病学会(ACR)分类标准;其他风湿性疾病46例,来自同期我院门诊及住院患者,所有患者均符合相应的国际分类标准;健康对照48名,来
13、自我院工作人员及门诊体检的健康志愿者。12实验方法121抗MCV抗体检测:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。检测试剂盒购自德国Orgentee公司,按照说明书进行操作。Orgentec公司所推荐的20 Ulml为正常值界限,所能测定的浓度范围为O1000 Ulml本实验中抗MCV抗体浓度超过1000 Uml,均按1000 Uml计算。122抗CCP抗体检测:采用ELISA方法。检测试剂盒购自欧蒙(德困)医学实验诊断有限公司,按照说明书进行操作。结果判断:以欧蒙公司所推荐的5个相对标准单位为正常值界限。5 Uml为阳性。123 RF检测:采用乳胶凝集法,试剂购自上海捷门生物技术合作有限公司。
14、滴度20 Ulml为阳性。13统计学处理采用SPSS 115统计软件进行分析。计量资料采用;血表示,组间比较采用t检验。计数资料采用r检验。采用四格表计算敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV oPO05 o22 3组抗MCV抗体水平的比较:RA组、疾病对照组、健康对照组抗MCV抗体平均滴度分别为(523376)、(9655)、(3418)Ulml,最大值分别为1000、2222、8914 Uml,最小值分别为75、304、118 Uml。抗MCV抗体水平在3组间比较差异有统计学意义(卫2:12787,P20 Uml为阳性,则对RA诊断的敏感性为981特异性仅为64。若升高阳
15、性I嘲值,抗MCV抗体检测对RA诊断的敏感性和特异性均有所变化。分别以20、加、60、80、100、120、140 Uml为阳性阈值,分别做BOC曲线计算其ROC曲线下面积(AUC)、PPV、NPV及敏感性、特异性(见表I o经过比较,以抗MCV120 Uml判为阳性阈值,BOC曲线下面积最大(O826),其特异性明显升高,敏感性也较合理。所以以抗MCV120 Uml判为阳性标准更为合理。24抗MCV抗体、RF、抗CCP抗体对RA诊断价值的比较:以抗MCV抗体120 UmL为阳性阈值抗MCV抗体、RF、表l抗MCV抗体对RA诊断的阳性阈值万方数据史堡匾星瘟堂盘查垫!Q生鱼旦筮!生鲞筮鱼塑h也丛
16、H熊吐j女!垫!Q,Y丛:!垒,照Q:抗CCP抗体的ROC曲线下面积分别为0826、0685、0772。抗MCV抗体检测对RA诊断的敏感性为78O,特异性为872,其阳性预测值及阴性预测值分别为904和644。抗CCP抗体、RF对RA诊断的敏感性为667、672,特异性为723、872。抗MCV抗体联合抗CCP抗体或RF检测对诊断RA的特异性均为957,敏感性为605、554三者联合检测特异性提高为957,敏感性为554,结果见表2。25抗MCV抗体与RF、抗CCP抗体的关系:在177例RA患者中,58例抗CCP抗体阴性的RA患者中有32例抗MCV抗体阳性(552),59例RF阴性的RA患者中
17、有3l例抗MCV抗体阳性(525o其中17例RF、抗CCP抗体均为阴性的RA患者抗MCV抗体阳性。3讨 论在RA的诊断与预后评估上,瓜氨酸相关自身抗体(ACPA)为一类重要的血清学指标Ilq,抗MCV抗体为此类抗体中新的一员。MCV是波形蛋白经由肽酰精氨酸亚氨酶(PAD)的瓜氨酸化后蛋白结构发生变化,增加了潜在的抗原决定簇(瓜氨酸),波形蛋门在凋亡细胞内因得不到及时清除而持续存在,从而促进了抗MCV抗体的产生【-it。在我们的研究中发现,RA组中抗MCV抗体的滴度明显高于疾病对照组及健康对照组,平均滴度为(523376)Uml,与国内外报道的相似10141。在疾病对照组中也可出现抗MCV抗体阳
18、性,平均滴度为(9655)Uml,与RA组相比,滴度低。因此,存在高滴度抗MCV抗体阳性的患者,对RA的诊断意义较大;至于存在低滴度抗MCV抗体阳性的RA患者,则需要结合其临床特征及联合其他抗体进行诊断。此外,我们还发现疾病对照组抗MCV抗体滴度也高于健康对照组,可能与疾病对照组患者有滑膜炎,其滑膜组织也存在瓜氨酸化纤维蛋白,两者的关系需要此后进一步的研究得以证实。在对血清中抗MCV抗体的检测中,Orgentec公司ELISA试剂盒上提供了正常范围的参考值,该数值仅作为参考,目前国内外尚无统一的抗MCV抗体阳性阈值。在国外研究中抗MCV抗体有以20I瑚、25ll”、28 u,IIll【lq等作
19、为阳性标准,在国内研究中则有以20I埘、30a:1、60 Umll哗作为阳性标准的报道。本研究若以抗MCV抗体20 Ulml为阳性。则对RA诊断的敏感性为981特异性为64。因此,我们首先需要建立一个合理的抗MCV抗体阳性阈值。从统计学角度来说,ROC曲线下面积越大。其临床诊断效能越高,比较以不同阳性阈值计算ROC曲线下面积,以120 u,fnl为阳性阈值的ROC曲线下面积最大(AUC-O826)。最终我们得出以抗MCV抗体120 Uml为阳性阈值对RA诊断效能最佳,作为本次研究的阳性阈值。在之前困外的报道中。抗MCV抗体在RA患者的特异性为80O。97O,敏感性为484。850Jl,17-2
20、0I。在国内最近的研究中,抗MCV抗体在RA患者中也有较好的敏感性与特异性113I。而本项研究抗MCV抗体120 Um|判为阳性标准,抗MCV抗体诊断RA的敏感性为78O,特异性为872。通过ROC曲线分析,抗MCV抗体检测的曲线下面积为0826。与Sghiri等12ll研究相似。其临床诊断效能优于抗CCP抗体(AUC=0772)及RF(AUC-0685 o多指标联合检测是有助于提高疾病诊断效率的方法,本研究利用抗MCV抗体、抗CCP抗体及RF对RA进行联合诊断,发现三项指标中之一为阳性,敏感性最高(859);而三项指标均为阳性才视为阳性,虽然敏感性降低。但特异性可达957,可以把阳性患者的误
21、诊率降到最低。在Nicaise Roland等fIq的研究中发现有1 i8(976)的抗CCP抗体阴性RA患者中可检测到抗MCV抗体,且6例抗CCP抗体和RF均为阴性的RA患者抗MCV抗体呈阳性;同样,Song等It51检测58例RA患者,40O(25)的抗CCP抗体阴性RA患者抗MCV抗体阳性。在本研究中也发现分别有552(3258)抗CCP抗体阴性、525(3159)RF阴性RA患者中抗MCV抗体为阳性;且有17例RF、抗CCP抗体均为阴性的RA患者抗MCV抗体呈阳性。抗MCV抗体是唯一的血清学阳性标志物,这为临床诊断RA又提供了一项新的血清学依据。特别是在高度怀疑RA,RF或(和)抗CC
22、P抗体等自身抗体均阴性时,更能体现抗MCV抗体在RA中的诊断价值。表2抗MCV抗体与其他抗体的分别及联合诊断万方数据主坐坦星病堂盘查20JQ堡垒月筮!璺鲞笔妫Chi_nnj,Bheumat_ool,如盟垫!鱼!Ql!生盥Q:查综上所述,抗MCV抗体可以作为RA临床诊断血清学指标之一,与抗CCP抗体、RF联合检测可提高对RA诊断的特异性。以本实验抗MCV抗体120 Uml作为诊断RA的阳性阈值是否可以应用于临床,需要通过进一步大规模临床研究验证。参考文献【l】Amett FC,Edworthy SM,Bl o【!h DAet a1The American Rhe-umatism Associat
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