1、滤器和超滤管,赵慧彬 2015年6月3日,针头式过滤器采用透明级高分子材料丙烯腈丁二烯苯乙烯（ABS）或聚丙烯（PP）制成，与一次性注射器配套使用，为实验室常规使用的快速、方便、可靠的小体积样品的过滤处理装置，,主要应用： 样品的预滤， 实验室生物流体（血液、尿液等）、培养基和媒介添加剂的除菌过滤,2种直径规格可选：13和30cm 5种膜类型：MCE、NYLON 、PVDF、PES 、PTFE,混纤膜（MCE） 由硝酸纤维素和醋酸纤维素混合而成,亲水性, 化学兼容性强，蛋白吸附量高。用于颗粒分析，颗粒去处，生化分析，HPLC样品制备和溶剂过滤 尼龙膜（NYLON） 化学相容性好，能在PH值11
2、2的条件下使用，适用于生物制品、培养基、溶液的除菌过滤。 聚偏氟乙烯膜（PVDF） 亲水性PVDF膜结合的蛋白远远少于硝酸纤维素,尼龙和PTFE过滤膜，可与水溶液和多种有机溶剂兼容，适用性广泛，耐氧化性和耐热性好，极适用于HPLC、GC的制备。 聚醚砜膜（PES） 低蛋白吸附，高流速，PH值范围广，化学相容性好，适用于样品的制备 、水溶剂过滤 、微生物研究 、环境分析 、 生物分析 、HPLC 流动相过滤等。 聚四氟乙烯（PTFE） 化学稳定性和惰性，适用于化学腐蚀性较强的有机溶剂、水溶液和气体，对大多的酸性、碱性和溶液都有耐受性,黄色的是PVDF Durapore 膜的，是又一款hero产品
3、，其亲水型PVDF膜是所有膜中蛋白吸附最低的，如果是含有蛋白成分的样品，用黄色的Millex ，样品活性成分损失最小！,绿色的是PES膜的，Millipore Express PLUS商品名代表的是“最快流速”，这个得益于密理博对PES膜的特别工艺改造，漏斗形的膜孔结构带来业界标杆性的使用效果既快又好。200mL的样品轻松搞定！,蓝色的MCE、紫色的Nylon、白色的PTFE膜等在化学兼容性方面更为宽泛，适合含有特殊（有机）化学成分和酸碱性较强的样品。,白色的有PES膜，也有PTFE膜，具体规格根据客户需要。,处理量分别是15ml 、4ml，、2ml、 0.5ml,再生纤维素膜具有一系列截留分
4、子量，有3KD，10KD，30KD，50KD，100KD。,使用超滤管的优势,高回收率 90% 垂直结构的膜减少了浓差极化，加快离心速度，快达 5 分钟 热密封膜将下游溶出物污染可能性降到最低 100% 完整性检测确保性能可靠 透明外壳和体积刻度方便样品察看 直接吸取样品减少处理步骤 高浓缩倍数：80100 倍,应用, 生物样品浓缩：包括抗原、抗体、酶、核酸或微生物 组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组分的纯化 对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩 脱盐和缓冲液更换,换浓缩蛋白时超滤管的处理,超滤管可以重复使用，用0.1M的NaOH浸泡12h，用水清洗，再在离心机上用相关溶液（灭菌水或P
5、BS）清洗3次，即可用于浓缩新的蛋白；,长时间放置超滤管的处理,较长时间不使用的超滤管，在用0.1M的NaOH浸泡12h，用水清洗，用20的乙醇浸泡保存，务必保持滤膜润湿，不能长菌；,超滤管使用的离心转速,离心转速一般采用4000rpm（一般建议为3000g，最大不能超过4000g）离心58分钟，即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几十微升；速度过高，目的蛋白会离下，导致目的蛋白丢失；速度过低，耗时，工效低；,枪头伸入超滤管中时注意事项,加蛋白液或Buffer到超滤管时，可以用蓝枪头；但从超滤管底吸取浓缩好的目的蛋白时，必须用黄枪头；用枪头伸入超滤管中时，必须防止碰到滤膜，以免戳破滤膜；,减少超滤管对蛋白的吸附损失,超滤管的滤膜能吸附蛋白，会导致目的蛋白减少可达30左右；为减少蛋白损失，在吸尽目的蛋白液后，再用蛋白Buffer吹洗超滤管的管底，可以将滤膜吸附的蛋白洗下大部分而减少目的蛋白的损失；如纯化的蛋白较浓时，注意浓缩的体积不可过小；一般无论如何离心，底部会保留有200 l左右的蛋白液；,如何界定超滤管失效,在正常使用下，滤膜没有被戳破时，浓缩蛋白液中不含有蛋白或量很低（包括目的蛋白），而第一次的滤下液中含有目的蛋白，则说明滤膜失效，需要换新的超滤管。,谢谢各位！,
