1、实验二 种子生活力的测定,实验目的实验内容与原理 材料及器具方法与步骤作业,种子生活力、种子发芽力与种子活力的概念,种子生活力（seed viability)是指种子发芽的潜在能力和种胚所具有的生命力，通常是指一批种子中具有生命力（即活的）种子数占种子总数的百分率。种子发芽力(seed germinability)是指种子在适宜条件下（实验室可控制的条件下）发芽并长成正常植株的能力，通常用发芽势和发芽率表示。种子活力(seed vigour)通常指田间条件下的出苗能力及与此有关的生产性能和指标。,四唑测定法、溴麝香酚蓝法、甲烯蓝法、 中性红法、二硝基苯法,靛红染色法、红墨水染色法、软X射线造影
2、法,一、实验目的,通过本试验，学习和掌握四唑染色法和靛红染色法测定种子生活力的原理和方法，比较种子样品生活力的高低。,二、实验内容,（一）四唑染色法 （二）靛红染色法,（一）四唑染色法,1.原理有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都会发生氧化还原反应。四唑溶液作为一种无色的指示剂，被种子吸收后参与活细胞的还原反应，从脱氢酶接受氢离子，在活细胞里产生红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲替。无生活力种子则无此反应。根据种子四唑显色的部位，即可区分有生活力和无生活力的种子。,2.试剂与设备,材料: 玉米和小麦种子 设备：设备：烧杯（100ml、200ml）、滤纸、刀片、镊子、培养皿（直径9cm）,容量
3、瓶（100ml、1000 ml）、垫板、5-25倍放大镜，恒温培养箱、。 试剂：四唑粉剂（2，3，5 氯化三苯基四氮唑），磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,3.方法与步骤,数取试样 从净度分析后并经充分混合的玉米和小麦种子中，随机数取100粒种子，2次重复。 种子的预湿 将选取的玉米和小麦种子水浸预湿室温下浸泡24h,使其充分吸胀。 种子的处理 将吸胀后的玉米种子沿胚中线纵向切开，取半粒，小麦纵切胚和3/4胚乳，处理后的种子应保持湿润，直到每个重复都完成为止。,3.方法与步骤,四唑染色 将处理好的玉米种子和小麦种子放入培养皿中，加入0.2%的四唑溶液，将种子淹没，然后置于35恒温培养箱中避光染色1h。
4、观察鉴定 将染色后的玉米种子经清水冲洗后进行染色情况的观察鉴定，必要时可借助于放大镜。胚部全部显红色；胚根尖端或盾片上下任一端少部分不染色，其余部分全显色，为有生活力的种子（附录7）。,4.结果计算,统计计算各个重复中有生活力的种子数，重复间 最大差距不得超过规定(P169表35-1），平均百分率计算 至整数。有生活力种子(%)=(有生活力种子粒数测定种籽总粒数) 100,5.注意事项,a.四唑染色时，恒温箱内要求黑暗或弱光，因为光线可使四唑盐类还原； b.已用过的四唑溶液不能循环使用； c.染色温度过高或染色时间过长，也会引起种子组织的劣变，这可能掩盖由于遭受冻害、热伤和本身衰弱而呈现不同颜
5、色或异常的情况。,（二）靛红染色法,1.原理有生命力的细胞膜是一个半透性膜，因此对内渗透的物质有选择透性，而无生命力的细胞膜不是半透性膜，因此无选择透性。靛红能透过死细胞组织使其染上颜色。因此，染上颜色的种子是无生活力的。根据胚染色部位和比例大小来判断种子有无生活力。,2.试剂与设备,材料：玉米、大豆种子 设备：烧杯（100ml）、滤纸、刀片、镊子、培养皿（直径9cm）,容量瓶（100ml、1000ml）、垫板 试剂：靛红（靛蓝洋红）,3.方法与步骤,数取试样 从净度分析后的玉米和大豆种子中，随机数取100粒种子，2次重复。 种子预处理 将玉米种子在30水中浸种20h后，大豆种子在30水中浸种
6、3h后，剥去种皮，处理后的种子保持湿润，直到每个重复都完成为止。 靛红染色 将处理好的种子放入培养皿中，加入0.1%（大豆，0.2%）的靛红溶液，将种子淹没，室温下染色15min（大豆，60min)。,3.方法与步骤,观察鉴定 将染色后的种子经清水冲洗后立即进行染色情况的观察鉴定。凡胚部不染色或染成浅蓝色、胚根尖端或少部分子叶染色的，为有生活力的种子，凡胚部全部染成蓝色的，或胚根、胚轴、胚芽、子叶等大部分染成蓝色的，为无活力种子。 结果计算与处理结果计算及容许差距与四唑染色法相同。,4.注意事项,注意种子须在30水中浸种，玉米浸种时间为20h,大豆3h。 严格掌握种子的染色时间。,三、作业,1.按种子生活力测定记载表记载样品种子生活力，比较不同测定方法结果的差异，并分析其原因。2.种子生活力测定过程中需注意哪些事项。,
