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种子生活力快速测定.doc

上传人:精品资料 文档编号:10041404 上传时间:2019-10-01 格式:DOC 页数:2 大小:19KB
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1、种子生活力快速测定一、实验原理通过本实验,掌握种子生活力快速测定的原理和方法。二、实验原理(1)活细胞染色:脱氢辅酶(NADH 或 NAFPH)存在于活的细胞内,当 TTC 渗透进入细胞内作为受体被脱氢辅酶上的氢还原,便由无色的 TTC 变为红色的三苯基甲(TTE)。当细胞死亡后,NADH 会迅速被降解,不会发生相应的颜色反应,故 TTC 染色法可显示细胞是否存活。(2)死细胞染色:有生命力的细胞膜是一个半透性膜,因此对内渗透的物质有选择性;而无生命力的细胞,其细胞膜已经消失,因此有的有色物质(如品红)不能进入活的细胞内,但可以进入已经死亡的细胞,从而使细胞内出现该有色成分特有的颜色,故可以据

2、此鉴别细胞是否死亡。三、实验材料、药品和器具1、实验材料:花生、黄豆2、实验药品和器具:品红、TTC、培养皿、吸水纸、镊子、解剖针、刀片等四、试验方法1、分别取 10 颗红豆和黄豆的种子,沿种子的培从中切成两半,将带胚的部分放入培养皿中,加入 TTC 培养 1h 左右,观察胚染色的情况。胚被染色的为有活力种子,未被染色的为无活力的种子。2、别取 10 颗红豆和黄豆的种子,沿种子的培从中切成两半,将带胚的部分放入培养皿中,加入品红培养 10-20min,倒掉品红溶液,冲洗数次,观察胚染色的情况。胚被染色的为无活力种子,未被染色的为有活力的种子。五、实验结果品种 测定方法 测定种子总数 有生活力种

3、子粒数 无生活力种子粒数 种子生活率TTC 30 28 2 93%花生品红 30 28 2 93%TTC 30 30 0 100%黄豆品红 30 29 1 97%实验结果可以得出选用 TTC 染色和品红染色得出的结果存在差异,用 TTC 染色得出的结果高于品红染色法。结果分析:可能的原因是在清洗品红时没有清洗干净,品红粘在胚上,影响实验的观察,导致结果差异。六、注意事项1、选取种子的时候,要尽量选取未发芽的种子,避免影响测定。2、添加染色液时,要是然也尽量没过种胚,使种胚和染液充分接触。3、染色时间要尽量控制在规定时间内,染色过长过短都会影响结果测定。4、清洗品红染液时,要冲洗干净,冲洗数次,直至冲洗液无色为止,冲洗不干净直接影响实验结果的测定。

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