1、中国伤残医学2015年23卷第5期Chinese Journal of Trauma and Disability Medicine ,2015,Vol.23,No.5性的消毒剂，具有一定的消毒效果。人体的皮肤、呼吸道、神经系统以及消化系统都会受到这些消毒液的不良影响。（4）心理风险。除了可见风险因素之外，还有不可见的风险因素，这些风险都比较隐秘。呼吸内科的工作比较特殊，护理人员经常接触到的患者其病症类型不同，有些患者病重身亡以及在患病的过程中饱受折磨，给护理人员带来了悲观的情绪，容易引起不良负面情绪，护理人员的心理受到了极大的影响。护理人员心理受到损伤后，其生活自然也会发生变化，导致其生活不
2、顺畅，影响工作，进入恶性循环，因此心理风险性是需要注意规避的。2 呼吸内科护理工作的风险防范：（1）护理风险的正确认识。护理风险防范的首要工作就是对风险进行认识。护理工作人员需要具备较强的护理安全意识，医院对护理人员工作的潜在护理风险应对能力需要进行培养，提升护理风险意识和水平，提倡安全操作，养成良好的护理习惯，规范化的操作流程。呼吸内科的护理工作人员应该要客观的认识到护理风险的存在。护理工作存在一定的风险性，因为职业性质的关系需要有一定的客观性，但是也是能够积极避免的。呼吸内科的规章制度只要能够建立起来，对护理人员的技能和方式能力进行培养，贯彻安全条例，把握细节，将安全放在首要位置，就能够控
3、制好护理风险。（2）处理好细节。护理工作者和患者的接触比较多，在接触的过程中如果不细心就很容易发生风险。像是一些护理人员在进行护理的时候，没有根据规范要求佩戴口罩，导致了呼吸病菌有了传播的途径，护理人员在护理过程中被感染。细节直接影响了风险性，对细节的忽略本身就是给风险的发生提供了机会。降低护理工作的风险需要护理人员细心，对患者细心的护理，对自己信心的预防，在工作中保护好自己。（3）完善管理制度。团队的管理制度可以为呼吸内科带来更好的风险预防，呼吸内科中只有加强了规范制度的建设和管理，认真执行，才能够规避风险。护理活动执行者是护理人员，其护理效果也是内科护理水平的体现，为了能够保障患者的护理需
4、求和安全，用制度来约束护理人员的素质是非常重要的。（4）心理的调节。呼吸内科护理工作强度大，压力大，护理人员需要有进行压力释放的途径和方法。多学习一些心理知识，对自身的心理压力进行调节，积极主动的去缓解自身的压力，这是减少护理风险的有效方式。还有就是要能够注重自身技能水平的提升，积极的面对工作。（5）预防教育的实践。对国外的先进优秀管理方法以及风险预防方法进行引入，结合自身情况，对其进行改良，形成有效的风险预防教育体系。定期对护理人员进行组织，让他们参与到风险预防教育中来，能够积极的进行护理风险监控，对风险的产生以及规避进行学习，能够为工作中的风险提供预防和准备。还有就是对于一些可能出现的风险
5、，一定要将其扼杀在萌芽状态。让每一个护理人员的风险意识增强，学习应对方法，规避风险，避免出现风险。3 小结：管理人员根据护理人员的工作能力和应对能力来进行针对性的培养，填补他们的不足之处，强化心理训练，用制度来对护理质量进行约束，将其和奖惩进行联系，督促护理人员严格的执行。平时多开展一些应急急救模拟训练，操作流程考核，让护理人员的风险意识得到强化，能够在平时的工作中注意对风险进行预防，将一些未知风险进行预防，保障患者的安全，维护自身的安全，提升医院的形象。参考文献 1 姚景鹏.内科护理学M.北京大学出版社,2008,（8）. 2 张梅钦.浅谈内科疾病社区护理实践Z. Medical Journ
6、a,2002. 3 朱翠勤.临床护理风险相关因素及防范措施J.河北医学,2008，14（1）.荧光原位杂交(FISH)是原位杂交技术的一种，即不需要预先分离核酸，在杂交的过程中不改变核酸的位置，不仅可以检测靶序列存在与否，还可以显示其存在的位置。FISH技术是将组织或细胞标本固定于玻片上后，将荧光标记的探针与待测标本的核酸进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织标本进行检测和诊断。荧光原位杂交常用的荧光标记物有 AMCA(蓝色荧光)、FITC(绿色荧光)、罗丹明(红色荧光)、德州红(深红色荧光)、Cy3(不可见红外光)及Cy5(同前)，其中Cy3
7、和Cy5的荧光强度最高且稳定，适用于检测低丰度标本的检测。1 资料与方法：一般资料：选取2010年2013年收治的门诊及住院患者30例标本，其中男8例，女22例.年龄2868岁，平均上报48岁。染色体疾病10例，乳腺癌18例，膀胱癌2例。 方法：根据探针标记的方法不同，FISH可分为直接法和间接法。前者是将荧光染料直接结合到DNA或RNA上，在荧光显微镜下观察杂交信号；后者先用DNA标记物(如生物素、地高辛)标记探针，然后制备其荧光抗体，待探针与标本杂交后，再用抗体进行反应，根据荧光信号所在的部位以确定目的DNA的位置。荧光原位杂交的基本步骤为制备染色体、标记探针、将探针与实验材料的靶序列进行
8、杂交及杂交结果的检测。2 荧光原位杂交的临床应用：FISH技术将荧光信号的高灵敏度、安全性、直观性和原位杂交的高准确性、特异性结合起来，在临床诊断中得到了广泛的运用。2.1 临床细胞遗传学：传统技术只能使用处于中期的染色体，且由于染色、显微镜放大倍率上的限制，对一些染色体异常如复杂的转位、缺失、重复和染色体微小缺失等无法判断。而荧光原位杂交法可以不受细胞分裂周期的影响，可以对中期染色体、间期核及伸展染色质纤维进行快速、精确的检测。临床诊断常用的FISH探针包括重复序列探针、单一序列探针和全染色体涂抹探针3类，目前都有的商品化探针可供利用1。目前该技术已被广泛用于植入前遗传病诊断产前诊断、不孕原
9、因分析以及多种遗传病的分型及诊断。2.2 肿瘤的诊断：染色体重排与肿瘤疾病的诊断和预后判断有密切关系。目前已有一系列商品化的单一拷贝基因座特异性探针用于在单个细胞水平检测易位、倒位、缺失和癌基因扩增。目前FISH技术是决定乳腺癌的预后和治疗反应最准确的方法，也是儿童软组织肿瘤诊断的主要工具，另外对其他肿瘤的诊断也多有报道。如进展期神经母细胞瘤的细胞遗传学的3种亚型，其第2种亚型只有应用FISH技术才能发现其染色体的异常。该技术不仅能提高肿瘤的病理组织学分类的准确性，而且能发现微小转移和残留病灶，为恶性肿瘤的检测及了解其进展和预后提供可靠资料。2.3 病原体的检测：FISH用于病原体检测的探针为
10、各种病原体的rRNA探针，包括种、属、群特异性的探针。荧光原位杂交检测一般在革兰染色结果的基础上选择探针，如结果显荧光原位杂交技术临床应用与作用于德水（大庆市中医医院检验科 ，黑龙江 大庆 163311）中图分类号：R 446 文献标识码：A 文章编号：16736567（2015）05021302 DOI编码：10.13214/ki.cjotadm.2015.05.179 213中国伤残医学2015年23卷第5期Chinese Journal of Trauma and Disability Medicine ,2015,Vol.23,No.5示为成链或成对排列的革兰阳性球菌，则选择链球菌肠球
11、菌探针，若为成簇排列的革兰阳性球菌，则采用葡萄球菌等探针2。利用该法可对许多病原体如HPV、HBV、SARS等病毒、细菌、真菌、疟原虫等进行快速检测及分型，整个检测可在几小时内完成，其特异性和灵敏度都较高，有时可达100。3 临床应用评价:临床诊断方面发挥了重要的作用，其应用范围主要集中于2个方面：临床细胞遗传学及病原体的检测。3.1 在临床细胞遗传学中FISH技术主要用于鉴别染色体的数目和结构异常，是染色体高分辨显带技术的补充和发展。相较于传统的染色体检测，FISH具有如下优点：操作简单、杂交速度快(一般2天)、探针稳定(标记后可使用2年)、结果直观，且灵敏度较一般原位杂交高，可达到PCR的
12、水平；FISH不仅可用于中期分裂象染色体的检测，也可用于间期核的检测，大大拓展了染色体的检测项目；FISH技术的假阳性、假阴性比例极低。但目前FISH技术在这方面的应用还存在一些问题，主要包括：FISH检测染色体异常时，仍然只能针对特定的1条或几条染色体；探针制备较困难，探针的种类远远满足不了临床细胞遗传学中染色体无穷无尽变化的需要；FISH检测的费用相对比较昂贵，因此目前还难以普及到一般的临床实验室。3.2 感染性疾病的传统诊断方法为病原微生物的分离培养、生化或血清学方法。这些方法灵敏度和特异性较差，实验耗时长。对于潜伏期较长的病毒，抗体出现较晚，很难用血清学或生化方法进行早期诊断。FISH
13、用于临床标本中病原菌检测的优点为快速、特异、灵敏：标本无需分离可直接进行检测，因此受抗生素的影响较培养法小，因而灵敏度更高；杂交时间短，多可在2小时内完成，较其他方法更为快速，尤适宜急重症患者标本的快速检测鉴定；核酸杂交要求的碱基严格互补配对，因而其特异性较高。FISH快速准确的检测结果结合细菌检验的分级报告可及时的为临床提供合理用药的依据，降低患者的住院时间，减少不必要的抗生素使用及侵入性操作。但FISH技术用于病原体的检测目前还存在一些影响结果判断的因素：由于有些病原体如铜绿假单胞菌、军团菌等、血细胞、培养基及试剂都有自身荧光，使检测的信噪比降低，影响检测的特异性和灵敏度；对于革兰阳性菌来
14、说，由于细菌壁厚，因此易出现探针的渗透不够而导致假阴性的结果；对于检测低rRNA丰度的生长率慢的细菌，以及细菌量少的标本也易出现假阴性结果；由于探针的设计不同，可能会导致特异性不高的问题，有时可采用2种靶定不同16SrRNA序列部位的特异探针进行检测，2种杂交信号均为阳性时确认为待检菌，但这种方法被待检菌的特异靶定片段的可能性所限制3。FISH的灵敏度和特异性还有待进一步提高，所以本法并不能取代传统的培养鉴定法，只能作为一种辅助诊断的工具。4 发展趋势:由于荧光标记探针不对环境构成污染，灵敏度和特异性较高，因而FISH在临床诊断中发挥着重要的作用，为了使该技术能够得到更广泛的应用，其发展的方向
15、主要为规模化和自动化。自动化的发展与一般的原位杂交一样，FISH的操作步骤多，影响因素多，结果的判断具有相当的主观性，需要专业的操作人员，这也是制约其普及应用的重要因素，因而FISH的自动化能够大大促进该技术的广泛应用4。目前已有市售的荧光原位杂交仪，这类仪器使FISH杂交过程、图像采集及结果分析全自动化，如果进一步配合样本预处理系统的使用，可使得整个FISH过程全部为仪器操作，从而大大简化了繁琐的人工处理过程，同时结果由荧光原位杂交图像分析软件进行判断和分析，可最大限度地降低操作者和检测者的主观因素，确保结果的准确性。目前已开发出多种方法提高FISH技术的检测通量，最常用为多色荧光原位杂交。
16、该法采用不同荧光颜色标记的探针，在一次杂交中使每一条染色体都涂上不同的颜色，可将多次繁琐的FISH实验和多种不同基因的定位在一次FISH实验中完成5。在MFISH的基础上发展出多种检测技术，如染色体描绘，就是在利用全染色体或区域特异性探针，通过多彩色FISH使中期细胞特异染色体和间期核呈现不同荧光颜色的条带，可同时观察全部染色体。参考文献 1 曾瑄,赵大春,周炜洵,武莎斐,梁智勇,刘彤华.荧光原位杂交检测乳腺癌HER2基因状态J.中华病理学杂志,2005,701705. 2 宋兰林,全松,等.用荧光原位杂交技术检测流产绒毛染色体非整倍体畸变J.中国优生与遗传杂志,2002,3637. 3 杜梅
17、君，郑梅玲，王晓维.应用荧光原位杂交技术对染色体病进行诊断J.中国优生与遗传杂志,2002,4041. 4 马莉贞.荧光原位杂交技术及期应用J.青海大学学报,2001,19（1）：1821. 5 佴文惠，刘瑞清，陈玉泽,等.应用荧光原位杂交（FISH）技术研究黑叶猴染色体易位J.遗传,1999,21（1）：13.的研究J.医学研究生学报,2010,(07). 12 俞国桥.浅刺法治疗中风偏瘫 42 例J.中医杂志,2007,48(8):719720 13 粱云武,王志兴,廖曼娜.巨刺法结合常规针刺法治疗中风偏瘫40例J.世界针灸杂志(英文版),2007,17(2):5657 14 臬忠岚.浅谈
18、脑卒中患者的康复护理.家庭护士,2006,4（12B）:48. 15 陈泽琴,刘朝根.健康教育对提高脑卒中偏瘫患者早期康复的作用J.中国临床康复,2003,7(3):408409 16 梁海石,石永华,郭金凤,等.脑卒中偏瘫病人的院外康复护理及健康教育J.护理研究,2004,18(7B):1 2561 257 17 杨平梅,刘俊明,邸文录,等.家庭康复指导对脑卒中偏瘫患者运动功能恢复的影响J.中国康复医学杂志,2004,19(7):533534 18 胡永善,吴毅,朱玉莲,等.规范三级康复治疗促进脑卒中偏瘫患者综合功能恢复的临床研究J.中国康复学杂志,2004,19(6):418421 19
19、莫海花,钟美容,胡艳宁,等.急性脑卒中偏瘫患者早期康复的循证护理J.中国实用护理杂志,2006,22（11）:910. 20 Xu BH,Yu RQ,Yu W, etal. Effects of early rehabilitation on activit-ies of daily living ang complication in acute Stroke patients.BeijingDa Xue Xue Bao,2004,36(1):7578.作者简介：吴志勤,主管护师，脑病科护士长，从事临床护理管理工作上接204页 214荧光原位杂交技术临床应用与作用作者： 于德水作者单位： 大庆市中医医院检验科,黑龙江 大庆,163311刊名： 中国伤残医学英文刊名： Chinese Journal of Trauma and Disability Medicine年，卷(期)： 2015(5)引用本文格式：于德水 荧光原位杂交技术临床应用与作用期刊论文-中国伤残医学 2015(5)
