高速逆流色谱法原理与应用

1、相作相向运动。
Chromatography将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。
色谱分析是一种分离、分析法。
,6,2、色谱法分离原理,当流动相中所携带的混合物流过固定相时，就会和固定相发生作用(力的作用)。
由于混合物中各组分在性质和结构上有差异，与固定相发生作用的大小也有差异。
因此在同一推动力作用下，不同组分在固定相中的滞留时间有长有短，从而按先后不同的次序从固定相中流出。
,7,3、色谱法的分类,按流动相状态的不同，可分为,气相色谱法 (GC) 液相色谱法 (LC) 超临界流体色谱 (SFC),8,什么是气相色谱法？,以气体为流动相的色谱法 Gas Chromatogaphy，简称GC 适合分离分析易汽化（在- 190-500范围内有0.2-10mmHg的蒸气压的）稳定、不易分解、不易反应的样品，特别适合用于同系物、同分异构体的分离。
,9,应用举例（GC）,10,什么是液相色谱法？,以液体为流动相的色谱法 Liquid Chromatogaphy，简称LC 适合分离分析高沸点、热不稳定、离子型的样品。
,11,按固定相使用的形式可液相色谱法又可分为：柱色谱（Column Chroma。

2、开始源于H.Small及其合作者的工作，他们于1975年发表了第一篇IC论文，采用第二根柱-抑制柱来提高分析的灵敏度，同年商品化仪器问世。
,离子色谱基本原理,分离模式 分离机理 分析对象或应用领域 离子交换HPIC 库仑力 无机和有机离子分析 离子排斥HPIEC Donnan平衡 有机酸、氨基酸、醇、醛 离子对MPIC 疏水、吸附作用 表面活性的阴、阳离子，离子性物质分析 离子抑制 疏水作用 有机弱酸弱碱分析 离子分配 疏水作用 生物大分子 金属配合物 疏水、螯合 金属离子,离子色谱的分离方式 （ 按分离机理）,不同分离模式所利用的溶质性质,分离模式 所利用的物质的性质差异 离子交换 电荷与离子体积 离子排斥 解离常数与疏水性 离子对 (RP) 与离子对试剂之间的亲和力，离子对化合物的疏水性 离子抑制(RP) 在一定pH值下的疏水性 反相分配(RP) 有机离子本身的疏水性,离子色谱法的优点, 无机阴、阳离子分析的绝对优势。
分析速度快。
通常几分钟至十几分钟。
检测灵。

3、个特征： a 有一个或多个缠绕有多层聚四氟乙烯管的线轴； b 没有旋转密封接头，有一个安装有两个旋转轴的齿轮传动装置，能产生一个可变的离心力场。
,通过公转、自转（同步行星式运动）产生的二维力场，保留两相中的其中一相作为固定相；离心力场的强度和方向都可以变化；倾析和混合交替出现，两相液体在螺旋管柱中总是处在接触状态，没有死体积存在；流体动力学CCC中压力小，固定相保留值大。
,高速逆流色谱正是利用了两相的这种单向性分布特征，在高的螺旋管转动速下，如果从尾端送入首端相，它将穿过尾端相而移向首端，同样，如果从首端相送入尾相，它将穿过首端相而移向螺旋管的尾端。
分离时，在螺旋管内首先注入其中的一相(固定相)，然后从合适的一端泵入移动相，让它载着样品在螺旋管中无限次的分配。
仪器转速越快，固定相保留越多，分离效果越好，且大大地提高了分离速度，故称高速逆流色谱。
,高速逆流色谱与高效液相色谱比较,HPLC和HSCCC的固定相体积不同 理论塔板数的工作范围不同； 到目前为止，逆流色谱的最高分离效率低于5000理论塔板数。
HSCCC中溶质可以进入并接触到液态固定相的整个体积；HPLC中，溶质不能进入到。