第九章 分光光度法-2

1、1,第九章 紫外-可见分光光度法,学习目的 知识要求 能力要求 进入章节学习请点这里第1节 第2节,2,学习目的,3,知识要求,4,能力要求,1.能够用朗伯-比尔定律解决定量计算问题 。 2.能够绘制吸收光谱曲线，找出被测物质的最 大吸收波长。 3.能够制备标准曲线，并能应用标准曲线对样品进行定量分析。 4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度。,5,第一节 光谱分析法概论,第一节 光谱分析法概论 一、电磁辐射与电磁波谱 电磁辐射：电磁辐射，也叫电磁波，具有波粒二象性。c Eh 电磁波谱：把电磁辐射按照波长大小顺序排列起来，就称为。

2、第八章 紫外-可见 分光光度法,第一节 光学分析概论,一、电磁辐射和电磁波谱 二、光学分析法及其分类 三、光谱法仪器分光光度计,一、电磁辐射和电磁波谱,1电磁辐射（电磁波，光） ：以巨大速度通过空间、不需要任何物质作为传播媒介的一种能量,2电磁辐射的性质：具有波、粒二向性波动性：粒子性：,续前,3电磁波谱：电磁辐射按波长顺序排列，称。,射线 X 射线紫外光可见光红外光微波无线电波,二、光学分析法及其分类,（一）光学分析法 依据物质发射的电磁辐射或物质与电磁辐射相互作用而建立起来的各种分析法的统称。,（二）分类：1光谱法：。

3、第九章 分光光度法简述,主讲：陈友,琼州学院生物科学与技术学院,2009/11/02,第一节 基础知识,一、光的性质光是一种电磁波。根据波长不同，光学光谱可分为：紫光（10nm-400nm）、可见光区（400nm-760nm）、红外区（760nm-300m）。白光为复合光，可分为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫七种颜色的光。若两种适当颜色的单色光按一定强度比例混合后成为一种白光，则这两种单色光称为互补色光。,二、溶液对光的选择性吸收及溶液的呈色,当一束白光通过某溶液时，由于溶液选择性地吸收了可见光域中某波段的光，而使溶液呈不同颜色，与吸收光颜色互补。。

4、第九章 分子荧光光谱法 Molecular fluorescence spectroscopy,光致发光和分子荧光光谱法9.1 荧光光谱法基本原理 9.2 荧光分析仪器和荧光法的应用,光致发光（Photoluminescence）: 荧光和磷光是分子吸光成为激发态分子，在返回基态时的发光现象，称为光致发光。 特点： 灵敏度高。检测限比吸收光谱法低13个数量级； 线性范围宽； 选择性比吸收光谱法好。因为能产生紫外可见吸收的分子不一定发射荧光或磷光； 应用范围不如吸收光谱法广，因为有的分子不发荧光。 基于化合物的荧光测量而建立起来的分析方法称为分子荧光光谱法。,9.1 荧光光谱。

5、第三节 基本原理,一、Lamber-Beer定律 二、吸光系数和吸收光谱 三、偏离Beer定律的因素 四、透光率的测量误差,一、Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律,描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系,假设一束平行单色光通过一个吸光物体,续前,取物体中一极薄层,续前,讨论：,1Lamber-Beer定律的适用条件（前提）入射光为单色光溶液是稀溶液 2该定律适用于固体、液体和气体样品 3在同一波长下，各组分吸光度具有加和性应用：多组分测定,二、吸光系数和吸收光谱,1吸光系数的物理意义：单位浓度、单位厚度的吸光度,讨论：1）E=f（。