临床微生物标本采集与运送.doc

1、临 床 微 生 物 标 本 采 集 与 运 送一 、 血 培 养 标 本 采 集 、 运 送 与 报 告 标 准 操 作 规 程一 、 血 培 养 指 征患 者 出 现 寒 战 ， 体 温 超 过 38 或 低 体 温 ， 怀 疑 血 流 感 染 时 ， 尤 其 存 在 以 下 情 况 时 ，应 抽 血 做 细 菌 和 真 菌 培 养 ： 医 院 内 肺 炎 ； 留 置 中 心 静 脉 导 管 超 过 72 h； 感 染 性 心 内膜 炎 ； 骨 髓 炎 ； 有 严 重 基 础 疾 病 、 免 疫 缺 陷 伴 全 身 感 染 症 状 ； 临 床 医 生 怀 疑 有 血 流 感 染可 能 的 其

2、 他 情 况 。二 、 采 血 时 机一 旦 怀 疑 有 血 流 感 染 可 能 ， 应 立 即 采 血 做 血 培 养 ， 最 好 在 抗 菌 治 疗 前 或 停 用 抗 菌药 物 24 h 后 ， 以 寒 战 、 发 热 时 采 集 为 宜 。三 、 采 血 流 程(一 )消 毒1 培 养 瓶 消 毒 程 序 ： 用 消 毒 液 消 毒 培 养 瓶 橡 皮 塞 ， 待 干 燥 后 使 用 。2 皮 肤 消 毒 程 序 ： 用 消 毒 液 从 穿 刺 点 向 外 画 圈 消 毒 ， 至 消 毒 区 域 直 径 达 5 cm以 上 ， 待 消 毒 液 挥 发 干 燥 后 (常 需 30 s 以

3、 上 )穿 刺 采 血 。(二 )静 脉 穿 刺 和 培 养 瓶 接 种成 人 用 注 射 器 无 菌 穿 刺 取 血 后 ， 排 尽 针 头 内 空 气 ， 直 接 注 入 血 培 养 瓶 ， 勿 换 针 头(如 果 行 第 二 次 穿 刺 或 用 头 皮 针 取 血 时 ， 应 换 针 头 )， 先 注 于 厌 氧 培 养 瓶 ， 避 免 注 入 空气 ， 然 后 注 入 需 氧 培 养 瓶 ， 轻 轻 混 匀 以 防 血 液 凝 固 。 近 年 来 ， 临 床 普 遍 采 用 负 压 血 培 养瓶 ， 将 血 从 患 者 静 脉 直 接 吸 入 血 培 养 瓶 ， 减 少 污 染 环 节

4、 。(三 )注 意 事 项1 检 验 单 需 注 明 抗 菌 药 物 使 用 情 况 、 血 液 采 集 时 间 和 部 位 、 临 床 诊 断 等 患 者 信 息 。2 采 血 部 位 通 常 为 肘 静 脉 ， 疑 为 细 菌 性 心 内 膜 炎 时 以 肘 动 脉 或 股 动 脉 采 血 为 宜 ，切 忌 在 静 滴 抗 菌 药 物 的 静 脉 处 采 血 。 除 非 怀 疑 有 导 管 相 关 的 血 流 感 染 ， 否 则 不 应 从 留 置静 脉 或 动 脉 导 管 取 血 ， 因 为 导 管 易 被 皮 肤 正 常 菌 群 污 染 。3 采 血 次 数 ： 对 于 成 年 患 者

5、 ， 应 该 同 时 分 别 在 两 个 部 位 采 集 血 标 本 ， 在 两 个 不 同部 位 分 离 到 同 样 菌 种 才 能 确 定 是 病 原 菌 。4 细 菌 性 心 内 膜 炎 ： 在 24 h 内 取 血 3 次 ， 每 次 间 隔 不 少 于 30 min； 必 要 时 次日 再 做 血 培 养 2 次 。5 采 血 量 ： 以 培 养 基 与 血 液 之 比 10： 1 为 宜 ， 以 稀 释 血 液 中 的 抗 菌 药 物 、 抗 体等 杀 菌 物 质 。 采 血 量 过 少 会 明 显 降 低 阳 性 率 。 成 人 每 次 每 培 养 瓶 采 血 8 10 ml，

6、婴幼 儿 每 次 每 培 养 瓶 采 血 2 ml。四 、 运 送 要 求1 所 有 标 本 采 集 后 都 应 立 即 送 往 实 验 室 ， 最 好 在 2 h 内 。 如 果 不 能 及 时 送 检 ，宜 置 于 室 温 环 境 。 血 培 养 瓶 送 到 检 验 科 放 入 培 养 箱 前 ， 不 应 暂 存 于 冰 箱 内 。2 送 检 标 本 应 正 确 粘 贴 条 形 码 ， 注 明 采 样 时 间 和 送 检 时 间 。3 安 全 防 护 ： 放 标 本 的 容 器 必 须 防 漏 ， 禁 止 将 渗 漏 的 标 本 送 往 实 验 室 。五 、 报 告 要 求(一 )紧 急

7、口 头 (电 话 )报 告血 培 养 出 现 阳 性 报 警 时 ， 立 即 进 行 革 兰 氏 染 色 、 镜 检 ， 并 在 最 短 时 间 内 将 结 果 向临 床 主 管 医 生 进 行 紧 急 口 头 (电 话 )报 告 。 口 头 报 告 包 含 以 下 内 容 ， 并 记 录 在 案 。(1)报 告 者 全 名 (或 工 号 )；(2)报 告 的 时 间 ；(3)所 联 系 医 生 的 全 名 (或 工 号 )；(4)报 告 镜 检 结 果 并 强 调 其 紧 急 价 值 ；(5)确 认 临 床 医 生 收 到 报 告 并 复 述 结 果 。(二 )最 终 结 果 (书 面 )报

8、 告(1)无 菌 生 长 (培 养 5 天 无 需 氧 菌 和 厌 氧 菌 生 长 )；(2)阳 性 培 养 结 果 (最 终 鉴 定 结 果 、 最 终 药 敏 结 果 )。(三 )其 他 报 告 和 记 录1 标 本 被 拒 收 时 ， 需 即 刻 通 知 临 床 立 即 重 新 采 血 ， 并 记 录 在 案 。2 最 终 结 果 与 紧 急 口 头 报 告 结 果 不 符 ， 需 要 变 更 时 ， 需 立 即 通 知 临 床 ， 同 时 必 须在 书 面 报 告 上 提 供 正 确 的 结 果 ， 注 明 变 更 的 内 容 。3 其 他 需 临 床 注 意 的 事 项 的 记 录

9、， 如 ： 采 血 量 不 足 、 标 本 转 运 时 间 过 长 、 标 本 采集 份 数 不 够 等二 、 痰 标 本 采 集 与 运 送 标 准 操 作 规 程一 、 采 集 目 的一 般 可 用 于 普 通 细 菌 、 分 枝 杆 菌 、 真 菌 和 军 团 菌 的 涂 片 或 培 养 检 测 ， 经气 管 穿 刺 吸 引 物 可 用 于 厌 氧 菌 的 检 测 。二 、 一 般 原 则1 采 集 标 本 的 最 佳 时 机 应 在 使 用 抗 菌 药 物 之 前 。2 宜 采 集 清 晨 第 二 口 痰 液 。3 对 于 普 通 细 菌 性 肺 炎 ， 痰 标 本 送 检 每 天 1

10、 次 ， 连 续 2 3 天 。 不 建议 24 h 内 多 次 采 样 送 检 ， 除 非 痰 液 外 观 性 状 出 现 改 变 。4 怀 疑 分 枝 杆 菌 感 染 者 ， 应 连 续 收 集 3 天 清 晨 痰 液 送 检 。三 、 采 集 方 法(一 )自 然 咳 痰 法 与 雾 化 导 痰 法1 用 物 准 备 ： 无 菌 容 器 (盒 )、 生 理 盐 水 (250 ml 或 500 m1)、 化 验 单 。2 核 对 患 者 床 号 、 姓 名 等 。3 无 痰 或 痰 量 极 少 者 可 用 3 5 氯 化 钠 溶 液 5 ml 雾 化 吸 入 约 5 min 后 留 取 痰

11、 液 。4 如 有 可 能 ， 应 在 医 护 人 员 直 视 下 留 取 清 晨 第 二 口 痰 。 嘱 咐 患 者 留 取前 摘 去 牙 托 ， 清 洁 口 腔 ， 如 刷 牙 后 反 复 用 生 理 盐 水 漱 口 ； 深 吸 气 后 用 力 自 气管 深 部 咳 出 痰 液 ， 置 无 菌 容 器 内 。 应 尽 可 能 防 止 唾 液 及 鼻 咽 部 分 泌 物 混 入 样品 ， 不 应 用 纸 巾 包 裹 痰 液 。(二 )支 气 管 镜 法鼻 或 口 腔 插 人 支 气 管 镜 。 常 用 采 集 方 法 有 经 支 气 管 镜 吸 引 、 支 气 管 肺 泡灌 洗 、 防 污

12、染 毛 刷 采 样 或 防 污 染 支 气 管 肺 泡 灌 洗 等 。(三 )经 人 工 气 道 吸 引 法1 用 物 准 备 ： 负 压 吸 引 器 、 生 理 盐 水 、 一 次 性 吸 痰 管 、 无 菌 手 套 、 无 菌容 器 (试 管 )、 化 验 单 。2 核 对 患 者 床 号 、 姓 名 等 。3 将 患 者 头 部 转 向 操 作 者 一 侧 。4 进 行 手 卫 生 后 将 一 次 性 吸 痰 管 末 端 拆 开 ， 连 接 吸 引 器 ， 调 节 吸 引 器 至适 宜 负 压 (成 人 ： 40 0 53 3 kPa； 小 儿 ： 40 0 kPa)。5 将 一 次 性

13、 吸 痰 管 外 包 装 去 除 ， 戴 手 套 持 吸 痰 管 试 吸 生 理 盐 水 ， 检 查 管道 是 否 通 畅 。6 折 叠 一 次 性 吸 痰 管 末 端 ， 插 人 口 腔 或 鼻 腔 或 人 工 气 道 至 适 宜 深 度 ， 放开 吸 痰 管 末 端 ， 轻 柔 、 灵 活 、 迅 速 地 左 右 旋 转 上 提 吸 痰 管 吸 痰 。 见 吸 痰 管内 有 痰 液 吸 出 ， 即 折 叠 一 次 性 吸 痰 管 退 出 ， 将 一 次 性 吸 痰 管 与 吸 引 器 分 离(使 用 人 工 呼 吸 机 者 ， 一 次 吸 痰 时 间 不 超 过 15 s， 吸 痰 前 后

14、 需 吸 入 高 浓 度氧 气 1 2 min)。7 将 痰 液 注 入 无 菌 容 器 (试 管 )内 ， 如 痰 液 黏 稠 可 用 一 次 性 针 筒 向 吸 痰管 末 端 注 入 少 量 生 理 盐 水 ， 将 痰 液 冲 人 无 菌 容 器 (试 管 )内 。四 、 运 送 和 保 存应 在 2 h 之 内 送 至 实 验 室 ， 否 则 应 4 冷 藏 ， 但 放 置 时 间 不 可 超 过 24 h。 三 、 手 术 部 位 感 染 标 本 采 集 及 运 送 标 准 操 作 规 程一 、 一 般 原 则1 在 抗 菌 药 物 使 用 前 ， 且 仅 在 有 临 床 感 染 症

15、状 或 伤 口 恶 化 或 长 期 不 愈合 时 采 集 标 本 。2 皮 肤 或 黏 膜 表 面 的 清 洁 。(1)闭 合 伤 口 和 穿 刺 物 标 本 ： 消 毒 方 法 同 血 培 养 标 本 的 皮 肤 消 毒 (见 血 培 养 标 本 采 集 和 运 送 标 准 操 作 规 程 )。(2)开 放 伤 口 ： 无 菌 生 理 盐 水 充 分 冲 洗 伤 口 部 位 。 不 可 以 用 消 毒 剂 。3 采 集 新 鲜 的 感 染 组 织 ， 避 免 采 集 浅 表 的 组 织 碎 屑 。4 若 可 以 采 集 穿 刺 物 或 活 检 标 本 ， 应 避 免 拭 子 标 本 。二 、

16、 容 器1 较 大 的 标 本 ： 含 有 少 量 生 理 盐 水 的 带 螺 纹 口 的 无 菌 塑 料 容 器 。2 标 本 较 小 或 拭 子 标 本 ： MW&E TRANSWAB 运 输 培 养 基 ， 适 用 于 需 氧 和厌 氧 菌 。三 、 采 集 方 法(一 )封 闭 性 脓 肿1 注 射 器 穿 刺 抽 取 脓 液 。2 若 无 法 抽 到 脓 液 ， 应 先 皮 下 注 射 少 量 无 菌 生 理 盐 水 ， 再 次 穿 刺 抽 吸脓 液 ； 若 脓 液 过 多 ， 应 先 切 开 引 流 ， 在 基 底 部 或 脓 肿 壁 采 集 标 本 。 脓 液 的 量以 大 于

17、1 ml 为 宜 。3 排 除 注 射 器 内 部 及 针 头 的 气 体 ， 用 无 菌 橡 皮 塞 封 闭 针 头 送 检 ； 或 直接 打 人 血 培 养 瓶 中 。 疑 为 厌 氧 菌 ， 应 迅 速 将 脓 液 打 人 厌 氧 血 培 养 瓶 中 。(二 )组 织 和 活 检 标 本1 采 集 足 够 大 的 组 织 ， 体 积 以 1mm 为 宜 ， 避 免 在 坏 死 区 域 采 集 。2 将 小 块 的 组 织 放 在 运 输 培 养 基 内 ； 较 大 的 放 在 无 菌 容 器 中 ， 并 加 入少 量 无 菌 生 理 盐 水 。(三 )开 放 伤 口1 无 菌 生 理 盐

18、 水 彻 底 冲 洗 浅 表 部 位 ， 去 除 表 面 的 渗 出 物 和 碎 屑 。2 用 拭 子 深 入 伤 口 的 基 底 部 或 伤 口 一 正 常 组 织 边 缘 部 采 集 两 个 标 本 ，分 别 用 于 培 养 和 革 兰 氏 染 色 。四 、 标 本 的 标 识填 写 患 者 信 息 、 标 本 类 型 (深 部 组 织 、 表 浅 组 织 、 脓 肿 和 穿 刺 物 等 )、标 本 的 来 源 (腹 腔 、 腿 和 上 臂 等 )， 记 录 标 本 采 集 的 日 期 和 时 间 及 是 否 在 使 用抗 菌 药 物 前 采 集 ， 选 择 检 查 项 目 (需 氧 培

19、养 或 厌 氧 培 养 )。五 、 标 本 的 送 检为 了 更 好 地 分 离 病 原 菌 ， 标 本 应 在 采 集 后 的 30 min 内 送 到 实 验 室 。 送 检时 应 保 持标 本 的 湿 润 (尽 量 采 用 运 输 培 养 基 ， 组 织 可 以 放 在 生 理 盐 水 中 )。 在 送 检 前或 运 送 过 程中 ， 禁 止 将 标 本 放 于 冰 箱 。 若 不 能 及 时 送 检 ， 运 输 培 养 基 中 标 本 应 室 温 保 存 ，但 最 长 不 可 超 过 24 h。四 、 尿 液 标 本 采 集 和 运 送 标 准 操 作 规 程一 、 采 集 时 机宜

20、为 抗 菌 药 物 使 用 之 前 的 清 晨 第 一 次 尿 液 。二 、 采 集 方 法(一 )清 洁 中 段 尿1 女 性 ： 采 样 前 用 肥 皂 水 或 0 1 的 高 锰 酸 钾 溶 液 等 冲 洗 外 阴 ， 用 手指 分 开 阴 唇 ， 弃 其 前 段 尿 ， 不 终 止 排 尿 ， 留 取 中 段 尿 10 20ml 于 无 菌 容 器内 。2 男 性 ： 采 样 前 用 肥 皂 水 或 0 05 0 1 的 聚 维 酮 碘 (碘 伏 )溶 液等 消 毒 液 清 洗 尿 道 口 ， 擦 干 后 上 翻 包 皮 ， 弃 其 前 段 尿 ， 不 终 止 排 尿 ， 留 取 中段

21、 尿 10 20 ml 于 无 菌 容 器(二 )耻 骨 上 膀 胱 穿 刺主 要 用 于 厌 氧 菌 培 养 或 留 取 标 本 困 难 的 婴 儿 、 脊 柱 损 伤 患 者 的 尿 液 采 集 。先 用0 25 的 聚 维 酮 碘 溶 液 等 消 毒 液 消 毒 穿 刺 部 位 皮 肤 ， 然 后 使 用 无 菌 注 射器 直 接 从 耻 骨 联 合 与 脐 连 线 上 高 于 耻 骨 联 合 2cm 处 刺 人 膀 胱 吸 取 尿 液10 20 ml 于 无 菌 容 器 内 。(三 )导 尿 管 尿1 直 接 导 尿 法 ： 使 用 0 05 0 1 的 聚 维 酮 碘 溶 液 等 消

22、 毒 剂 消 毒会 阴 局 部 ， 用 导 尿 管 直 接 经 尿 道 插 入 膀 胱 ， 先 弃 其 前 段 尿 液 约 15 ml， 再留 取 中 段 尿 液 10 20 ml 于 无 菌 容 器 内 。2 留 置 导 尿 管 法 ： 医 院 内 尿 路 感 染 中 ， 临 床 最 常 用 此 法 。 采 集 前 先 夹住 导 尿 管 ， 采 集 时 则 松 管 弃 其 前 段 尿 液 ， 使 用 o 25 0 5 的 聚 维 酮碘 溶 液 等 消 毒 剂 消 毒 导 尿 管 的 采 样 部 位 ， 使 用 无 菌 注 射 器 斜 刺 人 导 尿 管(从 采 样 口 或 靠 近 尿 道 的

23、 导 尿 管 管 壁 )抽 取 10 20 ml 尿 液 于 无 菌 容 器 内 。3 回 肠 造 口 导 尿 管 法 ： 摘 除 导 管 ， 弃 去 里 面 的 尿 液 ， 先 用0 05 0 1 的 聚 维 酮 碘 溶 液 等 消 毒 剂 消 毒 吻 合 口 ， 再 将 导 尿 管 插 入 到清 洁 的 吻 合 口 ， 直 至 筋 膜 的 深 部 采 集 10 20 ml 尿 液 于 无 菌 容 器 内 。(四 )小 儿 收 集 包对 于 无 自 控 能 力 的 小 儿 可 应 用 收 集 包 采 集 尿 液 ， 这 种 装 置 由 于 很 难 避 免会 阴 部 菌 群 污 染 产 生 假

24、 阳 性 ， 所 以 只 有 在 检 验 结 果 为 阴 性 时 才 有 意 义 。 如 果检 验 结 果 为 阳 性 ， 应 结 合 临 床 进 行 分 析 ， 必 要 时 可 使 用 耻 骨 上 膀 胱 穿 刺 或 导尿 法 留 取 尿 液 进 行 复 检 。三 、 标 本 运 送标 本 采 集 后 应 及 时 送 检 并 接 种 ， 室 温 下 保 存 时 间 不 应 超 过 2 h(夏 季 保存 时 间 应 适 当 缩 短 或 冷 藏 保 存 )。 如 果 不 能 及 时 运 送 或 接 种 ， 应 4 冷 藏 ，但 保 存 时 间 也 不 应 超 过 8 h。四 、 注 意 事 项1 不 应 从 集 尿 袋 中 采 集 尿 液 。2 尿 液 中 不 应 加 防 腐 剂 或 消 毒 剂 。3 若 尿 液 培 养 前 患 者 曾 使 用 抗 菌 药 物 ， 应 反 复 多 次 送 检 。4 多 次 采 集 或 24 h 尿 不 应 用 于 尿 液 培 养 。5 除 非 进 行 流 行 病 学 调 查 ， 不 应 对 长 期 留 置 导 尿 管 患 者 常 规 进 行 尿 液 培养 。6 培 养 结 果 应 结 合 临 床 表 现 、 菌 落 计 数 以 及 微 生 物 种 类 等 ， 进 行 综 合 判断 。