1、实验二十六 微量元素测定,微量元素是指占人体总重量1/10000以下，每人每日需要量在100mg以下的元素。 生理作用：1.作为结合酶的辅助因子 2.构成体内重要的载体和电子传递体 3.参与激素和维生素的合成,镁（Mg）,铁（Fe）,铜（Cu）,锌（Zn）,甲基麝香草酚蓝比色法测定血清镁,一、临床意义减低：1.消化道丢失，如吸收不良、慢性腹泻2.尿路丢失，如慢性肾炎多尿期3.内分泌疾病，如甲亢、糖尿病酸中毒增高：1.服用治疗剂（硫酸镁）过量2.尿毒症、急慢性肾衰3.内分泌疾病：甲减4.多发性骨髓瘤、SLE,二、实验原理：甲基麝香草酚蓝（MTB）是一种金属络合剂，在碱性条件下，样品中的镁离子与二
2、甲苯胺蓝生成有色化合物。在540nm波长下测量其吸光度值。通过计算求出Mg的含量,三、操作步骤 空白 标准 测定 蒸馏水 20l 标准液 20l 血清 20l 工作液 2ml 2ml 2ml在室温放置5分钟，540nm用空白管调零722 分光光度计测定。镁浓度=A样品/A标准C标准【参考值】0.8-1.0mmol/L,亚铁嗪比色法测定血清铁,一、临床意义 1.降低: （1）体内总铁不足：如营养不良、缺铁性贫血 （2）铁丢失增加：慢性长期失血 （3）铁的需要量增加：妊娠及婴幼儿生长期 2.增高：含铁血黄素沉着症、溶血性贫血、再障、铁粒幼红细胞性贫血。,二、实验原理,存在于血清中的铁均已三价铁的形
3、式与转铁蛋白结合，它在酸性介质中能从转铁蛋白复合物中解离出来，被还原成二价铁，再与亚铁嗪直接作用生成紫红色复合物。在540nm处有吸收峰，与同样处理的铁标准液相比较，即可求出血清铁含量。,三、实验操作： 空白 标准 测定 蒸馏水 0.5ml 标准液 0.5ml 血清 0.5ml 试剂 1.5ml 1.5ml 1.5ml 混匀水浴10分钟。540nm用水调零测定A1空白、A1标准、A1测定。然后分别加入R3显色剂20l ，测定A2空白、A2标准、A2测定。,四、结果计算,A空白=A2空白-A1空白 A标准=A2标准-A1标准 A测定=A2测定-A1测定铁浓度=【参考值】男：14.3-26.9l
4、mol/L女：10.7-25.1l mol/L,A测定-A空白,A标准-A空白,C标准,血清铜的测定,一、临床意义 1.降低:可见于某些缺铁性贫血、烧伤病人以及各种原因引起的低蛋白血症。 2.增高：见于甲亢、结核、风湿、巨幼红细胞性贫血、结缔组织病、再障等。,二、实验原理,血清铜在醋酸醋酸钠缓冲液中从复合物中解离出来，并与显色剂发生反应生成紫红色化合物。在560nm的波长下，测量其吸光度值，然后通过计算求出血清铜的浓度。,三、实验操作： 空白 标准 测定 蒸馏水 0.3ml 标准液 0.3ml 血清 0.3ml 工作液 2ml 2ml 2ml 显色剂 0.5ml 0.5ml 0.5ml 混匀3
5、7，水浴5min、560nm处用722测量各管的吸光度值铜浓度=A样品/A标准C标准【参考值】 12-24 mol/L,血清锌的测定,一、临床意义 1.降低:常见于酒精中毒性肝硬化、原发性肝癌、慢性活动型肝炎、胃肠吸收障碍、营养不良以及其他慢性消耗性疾病。儿童缺锌可出现厌食、嗜睡、生长缓慢等现象 2.增高：主要见于工业污染引起的急性锌中毒等,二、实验原理,样品中的锌离子与锌试剂反应，形成蓝色化合物，显色剂本身呈红色，在低含量水平范围呈紫色，样品中的Fe3、Cu2+通过除干扰剂隐蔽起来，这样在620或630nm波长测定吸光度值，然后计算锌的含量。,三、实验操作,空白 标准 测定标准液 0.2ml血清 0.2ml工作液 1.7ml 1.5ml 1.5ml显色剂 0.1ml 0.1ml 0.1ml混匀37，水浴5min、620nm处用722测量各管的吸光度值。计算：锌浓度=A样品/A标准C标准【参考值】10-22 mol/L,注意事项：,1、测定器具必须用蒸馏水清洗，严防污染试剂。2、测定血清必须是新鲜血清，无乳糜和溶血。,
