1、农业生物技术,农业生物技术是指运用基因工程、发酵工程、细胞工程、酶工程以及分子育种等生物技术,改良动植物及微生物品种生产性状、培育动植物及微生物新品种、生产生物农药、兽药与疫苗的新技术。,第一节 细胞和组织培养在植物 育种中的应用,广义的植物组织细胞培养(plant tissue or cell culture)是指将植物体的各种结构(如细胞、原生质体、组织、器官以及幼小植株)放在离体的、无菌的人工环境中让其生长发育的方法。因此组织培养也叫离体培养(culture in vitro)。,一、离体培养技术的应用,1花粉、花药、胚珠和子房培养 花粉、花药胚珠和子房在离体条件下无菌培养,让其进一步发
2、育以至形成幼苗的过程。,根据胚珠和子房受精与否分为两类:1、 受精子房和胚珠的培养主要是打破种子的休眠和挽救胚的发育,如核果类的桃杏育种中通过胚抢救进行早熟品种的选育;2、 未受精子房、胚珠及花粉、花药的培养主要为了获得单倍体。,2离体受精,离体受精(in vitro fertilization),也称为植物体外受精,是在人工条件下使卵细胞受精形成合子,再将形成的合子离体培养使之发育成植株的过程。离体受精主要解决远缘杂交不亲和、不孕和不结实。,这项技术分为:(1)花粉和子房(或胚珠)的收集子房的收集,通常是把开花前一天的花蕾取下,经表面消毒,剥去花被和雄蕊,保留子房及花萼,花萼的存在有助于提高
3、种子的结实率。也可以剥出胚珠培养。,(2)离体授粉和受精 有两种方法用于花粉与卵细胞的体外受精。A、共培养法,先将花粉撒于一个适宜于花粉萌发的培养基上,再将胚珠置于撒播的花粉中间。B、二是人工受精法,将花粉撒在离体的子房或胚珠上,让其受精。受精后的子房或胚珠继续培养可发育成成熟的种子。,3、离体胚的培养,植物的胚培养主要有两种培养方式: 一种是以幼胚为外植体诱导愈伤组织細胞,通过器官发生或胚胎发生产生再生植株;另一种是使发育完全的胚直接萌发,获得完整的植株。离体胚培养在植物育种中的应用主要包括以下三个方面:,(1)克服远缘杂交不育 (2)促进核果类植物胚的形成核果类早熟品种与晚熟品种的区别是胚
4、发育不健全、生活力不强,而以早熟品种为母本与晚熟品种杂交,很难得到杂交后代。如果用幼胚离体培养就能得到杂交后代。,(3)打破种子的休眠期许多植物的种子存在明显的休眠期,有些植物的休眠期很长。由于种子结构而存在的休眠可以用常规方法消除,而由于胚乳抑制物质所引起的休眠只能通过胚的离体培养才能获得理想的效果。,4、组织和器官培养,(1)外植体:根尖、茎尖、叶原基、花原基、微管形成层、储藏薄壁组织、胚乳等。 (2)意义: 1)优良单系的快速繁殖。 2)自交不亲和系、雄性不育系的无性繁殖。 3)无性繁殖园艺植物的脱毒与快繁。 4)突变体的诱导与分离。,(3)组织和器官培养的生物学基础 细胞的全能性和植物的再生能力。 (4)组织和器官培养的基本过程 外植体-脱分化-再分化。,二、培养条件,(一)培养基成分 1、无机成分 (1)大量元素:N、P、K、C、H、O、Ca、S、Mg。 (2)微量元素:Cu、B、Mn、Zn、Mo、Fe。,2、有机成分: (1)糖类:蔗糖、葡萄糖。 (2)维生素:VB1、VB6、肌醇。 (3)氨基酸 (4)碱基 (5)生长调节剂 (6)植物提取物 (7)琼脂,(二)环境条件 1、光 (1)光强:1000-10000Lx (2)光照时数:9-16小时。 (3)光质:日光灯。 2、温度:一般25C,Think you !,