1、实验一 染料吸光度浓度标准工作曲线的绘制（选做） 一、实验目的 掌握分光光度计的使用方法，学会染料吸收光谱曲线的测定和未知染液浓度 的测定，加深对染色泽和吸收光谱关系的认识。 二、实验原理 测定染料在溶液中或 纤维上的含量的方法有多种，本实验介绍用分光光度 计法测定染料在溶液中的浓度。 采用分光光度法测定染料浓度的基本理论是基于朗 白 -比耳定理。该定 理指出，有色溶液对一束平行单色光的吸光度与溶液的浓度和液层厚 度之积成 正比。其数学表达式为： A KbC 其中： K吸光系数或消光系数，表示纯物质浓度为 g/l 液层厚度为 cm时 的吸 光度， K值 是 各 种染料在一定 波长下 的 特征常
2、 数 b有色溶液的液层厚度 C有色溶液的浓度 A吸光度 在一定 波长 和一定液层厚度 条件下 ，吸光度与 稀 溶 液的浓度成正比，吸光 度 也可 用光 密 度 D或消光 E表示。 根据 吸光度 A与浓度 C之 间 的 直 线关系， 将待 测溶液 的吸光度 A2与 已 知浓 度为 C R 该物质吸光度 A1比 较 ， 即可求 出 待 溶液的浓度 C2， 这就 是比色定量分 析 的理论基 础 C /A = C2/A2 或 C2 = C /A A2 三、主要实验材料、化学品和仪器 1、化 学 品 ： 活性红 X-3B 10g/l 、 Na2CO3、 Na2SO4 2、仪器 ： 722型 分光光度计
3、四、实验步骤 1、 吸收光谱曲线的测定 （ 用 活性红 X-3B） 1、 1标准 溶液的 配制 用 10ml 的 移 液 管移取 浓度为 1g/l 的染料溶液 10ml,置 于 100ml容 量 瓶 中 并稀释至刻 度。 将 上 述 染料溶液分 别按 1ml,3ml,5ml,10ml,15ml,转移到另外 1 # 5 # 25ml容 量 瓶 中 并稀释至刻 度， 摇匀 ， 待 测其吸光度。 1、 2吸收光谱曲线的测定 取 3 # 染液在 波长范围 为 380nm730nm内 测定吸光度 并从 光谱吸收曲线中 找 出 max。 2、混合 染料浓度的测定 2、 1绘制标准 曲线： 当 染料的 最大
4、 吸收 波长 max确 定 后 在 最大 吸收的 波长下 分 别 测定 # 5 # 的 已 知浓度染液的吸光度， 然后以 染液浓度为 横座标 ， 以 吸光度为 纵座标 ， 制作标准 曲线。 2、 2测定未知浓 渡 的染液： 在测定 同 一染料的未知浓度时 以 其 max处 测 得 的吸光度，在 标准 曲线上 查得 对 应 的染液浓度。 五、注意事项 1、 实验时使用 水作 溶 剂 ， 空 白溶液 也 用 自来水 2、 实验时一 律 使用 B=1CM的比色 皿 ， 此 时 A=KC 六、试验结果与讨论 根据 所做图 线分 析 染料浓度与吸光度之 间 呈什么 关系。 若 染料 相 对 应 浓度 发生变 化 ，是 否影响它们两者 之 间 的关系。
