1、中科院 2001 生化与分子一.是非题,每题 1 分,共 25 分。答“是”写“+” ,答案“非”写“一” 。1. 所有 氨基酸中的 碳原子都是一个不对称的碳原子( )2. 蛋白质的四级结构可以定义为一些特定的三级结构的肽链通过共价键形成的大分子体系的组合( )3. 根据凝胶过滤层析的原理,分子量愈小的物质,因为愈容易通过,所以最先被洗脱出来( )4. 两个或几个二级结构单元被连接多肽连接在一起,组成有特殊的几何排列的局部空间结构,这样的结构称为超二级结构,有称为模体(MOTIF)( )5. 抑制剂不与底物竞争酶结合部位,则不会表现为竞争性抑制( )6. 酶反应最适 PH 不仅取决于酶分子的解
2、离情况,同时也取决于底物分子的解离情况( )7. 寡聚酶一般是指由多个相同亚基组成的酶分子( )8. 糖异生途径是由相同的一批酶催化的糖酵解途径的逆转( )9. 线粒体内膜 ADP-ATP 载体蛋白在促进 ADP 由细胞质进入完整线粒体基质的同时 ATP由完整线粒体基质进入细胞质的过程是需要能量的( )10. 脂质体的直径可以小到 150nm( )11. 质膜上糖蛋白的糖基都位于膜的外侧( )12. 雄性激素在机体内可变为雌性激素( )13. CoA,NAD 和 FAD 等辅酶中都含有腺苷酸部分 ( )14. 黄嘌呤氧化酶的底物是黄嘌呤,也可以是次黄嘌呤( )15. RNA 连接酶和 DNA
3、连接酶的催化连接反应都需要模板( )16. DNA 聚合酶和 RNA 聚合酶的催化反应都需要引物 ( )17. 真核生物 mRNA 两端都含有 3-OH.( )18. 在细菌中 RNA 聚合酶和核糖体蛋白质的合成由共同的调节系统( )19. 所有氨酰-tRNA 合成酶的作用都是把氨基酸连接在 tRNA 末端核糖的 3-羟基上( )20. 核小体中的核心组蛋白在细胞活动过程中都不会被化学修饰( )二.选择题(20 题,每题 1 分,共 20 分)1. 绒毛膜促性激素是一种: A. 甾醇类激素 B. 脂肪酸衍生物激素 C. 含氮激素2,溴化氰(CNBr) 作用于: A. 甲硫氨酰-X B. 精氨酰
4、-X C. X-色氨酸 D. X-组氨酸3.肌球蛋白分子具有下述哪一种酶的活力: A. ATP 酶 B. 蛋白质激酶 C. 蛋白水解酶4.神经生长因子(NGF)的活性分子由下列肽链组成: A. B. C. 22 5.胰岛素原是由一条“连接肽“通过碱性氨基酸残基连接其他二条链的 C 端和 N 端,这条“连接肽“称为:A. A 链 B. B 链 C. C 肽6.米氏方程双到数作图的总轴截距所对应的动力学常数为:A. Km B. Vmax C. Km/Vmax D. Vmax/Km7.磷酸化酶激酶催化磷酸化酶的磷酸化,导致该酶:A. 由低活性形式变为高活性形式 B. 由高活性形式变为低活性形式 C.
5、 活性不受影响8.底物引进一个基团以后,引起酶与底物结合能增加,此时酶催化反应速度增大,是由于:A. 结合能增大 B. 增加的结合能被用来降低反应活化能C. 增加的结合能被用来降低 Km D. 增加的结合能被用来增大 Km9.TGF 受体具有下列哪一种酶的活性:A. 酪氨酸激酶 B. 酪氨酸磷酸酯酶 C. 丝氨酸/ 苏氨酸激酶 D. 腺苷酸环化酶10.2000 年诺贝尔生理学或医学奖予下列哪一个领域的重大贡献有关: A. 结构生理学 B. 发育生理学 C. 神经生物学 D. 免疫学11.苍术钳是一种抑制剂,它的作用位点在:A.钠钾 ATP 酶 B.线粒体 ADP-ATP 载体 C.蛋白激酶 C
6、 D.线粒体呼吸链还原辅酶 Q-细胞色素 c 氧化还原酶12.膜固有蛋白与膜脂的相互作用主要通过:A. 离子键 B. 疏水键 C. 氢键 D. Van der Waal 氏力13.生物膜的基本结构是:A. 磷脂双层两侧各附着不同蛋白质 B. 磷脂形成片层结构,蛋白质位于各个片层之间C. 蛋白质为骨架,二层林脂分别附着与蛋白质的两侧D. 磷脂双层为骨架,蛋白质附着与表面或插入磷脂双层中14.辅酶 Q 是: A. NADH 脱氢酶的辅基 B. 电子传递链的载体 C. 琥珀酸脱氢酶的辅基 D.脱羧酶的辅酶15.完整线粒体在状态 4 下的跨膜电位可达: A. 1mv B. 10mv C. 100mv
7、D. 200mv16.基因有两条链,与 mRNA 序列相同(T 代替 U)的链叫做: A. 有义链 B. 反义链 C. 重链 D. cDNA 链17.一段寡聚合糖核苷酸 TCGm1Acmm5CC,其中含有几个修饰碱基( 非修饰核苷):A. 3 个 B. 4 C. 5 D. 618.已知有的真核内含子能编码 RNA,这类 RNA 是:A. 核小分子 RNA(sn RNA) B. 核仁小分子 RNA(sno RNA) C. 核不均一 RNA(hnRNA)19.别嘌呤醇可用于治疗痛风症,因为它是:A. 鸟嘌呤脱氨酶的抑制剂,减少尿酸的生成 B. 黄嘌呤氧化酶的抑制剂,减少尿酸的生成C. 尿酸氧化酶的
8、激活剂,加速尿酸的降解20.-鹅膏覃碱能强烈抑制:A. 细菌 RNA 聚合酶 B. 真核 RNA 聚合酶 C. 细菌 DNA 聚合酶 D. 真核 DNA聚合酶21. 在核糖体上进行蛋白质合成,除了肽链形成本身以外的每一个步骤都与什么有关?A. ATP 的水解 B. GTP 的水解 C. Camp 的水解 D. 烟酰胺核苷酸参与22. 基因重组就是 DNA 分子之间的:A. 共价连接 B. 氢键连接 C. 离子键连接23. DNA 复制过程中双链的解开,主要靠什么作用:A. 引物合成酶 B. Dnase I C. 限制性内切酶 D. 拓扑异构酶24. 包括中国在内,有很多国家科学家参与的人类基因
9、组计划,到目前为止的进展情况如何?A. 仅完成 23 对染色体的遗传图谱和物理图谱 B. 仅测定了 7,10 合 22 号染色体的核苷酸序列C. 测定了人基因组 3X109 碱基的全序列,但只是一部“天书“, 无法知道它的全部意义D. 测定了人基因组全序列,分析了他们代表的遗传信息 ,已经了解大部分基因的功能25. 催化转氨作用的转氨酶所含的辅基是: A. 磷酸吡哆醛 B. 泛酸 C. 烟酰胺 D. 硫氨素三、填空题(每空一分)1. 胰岛素最初合成的单链多肽称为_然后是胰岛素的前体,称为_2. 原胶原蛋白分子的二级结构是一种三股螺旋,这是一种_结构,其中每一股又是一种特殊的_结构.3. 有一类
10、不可逆抑制剂具有被酶激活的性质,被称为_型不可逆抑制剂,又可被称作酶的_4. “蛋白质组“是指_5. 蛋白激酶 A 的专一活化因子是 Camp,蛋白激酶 C 的专一活化因子是_,此外还有某类型的蛋白激酶可以由_作为专一激活因子6. 已阐明原子分辨率三维结构的膜固有蛋白有_,_ 等( 仅写两个)7. 霍乱毒素的受体是一种_化合物8. 线粒体内膜催化氧化磷酸化合成 ATP 的 F1F0 酶的 F1 部分的亚基组成的结构是_9. 除了膜脂脂肪酰链的长度外,影响膜脂流动性的主要因素是_10. 左旋的 Z-DNA 与右旋的 B-DNA 相比,前者的每对核苷酸之间的轴向距离_于后者;前者的直径_于后者11
11、. 已知二类核糖体失活蛋白(RIP) 都是通过破坏核糖体大亚基 RNA 而使核糖体失活,这二类蛋白质分别具有_和_活性12. 5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)除了参与嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成外,还与_和_氨基酸代谢有关.13. 大肠杆菌的启动子序列包含有_,_及_等信息.14. 逆转录病毒含有单链 RNA,感染细胞后转变成双链 DNA,这种 DNA 必须_,才能发生病毒的复制.15. 真核 RNA 聚合酶 I 主要位于细胞_中,合成大分子核糖体 RNA 前体四.问答题(5X6)1. 蛋白质化学测序法的原则和程序可归纳为哪 5 个阶段?(仅需写出阶段名称)2. 在酶的醇化过程中必须考虑尽量减
12、少酶活性的损失,因此操作过程通常要求在低温下进行.如果醇化一个热稳定(耐温)的酶,是否不需要在低温条件下操作 ?请简述你的见解.3. 写出核酸降解的主要步骤(A 卷)4. 简述 RNA 剪接和蛋白质剪接5.真核细胞中有几种 RNA 聚合酶?它们的主要功能是什么?中科院 2001 年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题1、-2、-3 、-4 、+5 、-6、+7、-8、-9 、+10、-11、+12 、+13 、+14、+15 、-16 、-17、+18、+19、-20、-二、选择题1、C;2、A;3、A;4、B;5、C;6、B ;7、A ;8、B;9、C;10、C;11、B ;12、B;1
13、3、D;14、B;15、D;16、A ;17、A ;18、B ;19、B;20、B;21、B;22、A;23、D;24、C;25、A三、填空题1、前胰岛素原、胰岛素原;2、三条肽链组成的右手螺旋、左手螺旋;3、Kcat 、自杀性底物;4、生物体所拥有的全套蛋白质或基因组所编码的全部蛋白质;5、二酰基甘油、Ca2+;6、细菌视紫红质、孔蛋白; 7、糖脂类;8、3 3d;9、脂肪酰链的不饱和度;10、大、小;11、RIP、磷酸二酯酶、N- 糖苷酶;12、PRPP、组氨酸、色氨酸;13、操纵基因结合、RNA 聚合酶结合、转录起始;14、整合人宿主染色体;15、核仁四、问答题1、肽链的选择性断裂,用特
14、异性较强的蛋白酶或化学试剂对得到的肽链进行分离分别测定每个肽段的氨基酸序列用另一种方式断裂台联,并重复前三个步骤,测定另一组肽段的氨基酸序列利用两组肽段的序列,进行重叠从而得到肽链的全序列。2、在低温进行蛋白质(包括酶)的分离纯化,既可以防止蛋白质的变性而失活,又可以避免长菌而污染。但有些寡聚蛋白在低温时,反而会解聚而失活。特别是一些热稳定的酶的疏水作用可能起到相当重要的作用。因此在防止微生物污染的前提下,应该避免使用低温条件。3、核酸寡核苷酸核苷酸核苷碱基+戊糖-1-磷酸 催化的是核酸酶、核糖核酸酶、脱氧核糖核酸酶或磷酸二酯酶;催化同;催化的是核苷酸酶;催化的是核苷磷酸化酶。4、剪切是指删除
15、由基因中的内含子转录和翻译产生的非编码功能序列,是转录后加工和翻译后加工的非常重要而不可缺少的步骤。已知多数情况下在 RNA 水平上的删除叫 RNA 剪切,在蛋白质水平上的删除叫蛋白质剪切。蛋白质剪切是一种翻译后修饰事件,它将插入前体蛋白的中间的蛋白质肽段(Intein,internal protein fragment)剪切出来,并用正常肽键将两侧蛋白质多肽链(Extein,flanking protein fragments)连接起来。在此过程中不需要辅酶或辅助因子的作用,仅需四步分子内反应。Intein 及其侧翼序列可以通过突变产生高度特异性的自我切割用于蛋白质纯化、蛋白质连接和蛋白质环
16、化反应,在蛋白质工程方面有广泛的应用前景。5、真核生物的 RNA 聚合酶,按照对 -鹅膏蕈碱的敏感性不同进行分类: RNA 聚合酶基本不受 -鹅膏蕈碱的抑制,在大于 10-3M/L 时才有轻微的抑制。RNA 聚合酶对 -鹅膏蕈碱最为敏感,在 10-8M/L 一下就会被抑制。RNA 聚合酶对 - 鹅膏蕈碱的敏感性介于聚合酶和聚合酶之间,在 10-5M/L 到 10-4M/L 才会有抑制现象。RNA 聚合酶存在与核仁中,其功能是合成 5.8SrRNA、18SrRNA 和 28SrRNA。RNA 聚合酶存在于核质中,其功能是合成 mRNA、snRNA。RNA 聚合酶存在于核质中,其功能是合成 tRN
17、A 和 5SrRNA 及转录 Alu 序列。相关内容:原核生物的 DNA 聚合酶及功能,真核生物的 DNA 聚合酶及功能,转录调控,复制的调控。中科院 2003 生化与分子一.是非题(共 25 分)1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链()2.分子量相同的两种蛋白质,如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同, ,其摩尔消光系数可能不同()3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的 1/10 左右()4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸()5.丝-酪- 丝-甲硫-谷-组-苯丙- 赖-色- 甘十肽经胰蛋白酶部分水解后,溶液中将有两种肽段存在()6.核酸在 pH3.5 的缓冲液中电泳时,是从正极向负极运动的()7.核糖
18、体上蛋白质生物合成时,催化肽键合成的是核糖体 RNA()8.tRNA 转录后加工有剪接反应,它是有蛋白质催化的()9.核酸降解成单核苷酸时,紫外吸收值下降()10.RNA 连接酶的底物是 RNA,DNA 连接酶的底物是 DNA()11.DNA 的复制方法有多种,滚动式复制方式通常以双向方式进行()12.色氨酸操纵子(trpoperon)中含有衰减子序列()13.对正调控和负调控操纵子而言,诱导物都能促进基因的转录()14.RecA 蛋白只能与单链 DNA 结合,并发挥 NTP 酶活性()15.在克隆载体 pBSK 质粒中,利用完整的 lacZ 基因作为筛选标记,白色转化菌落表明重组质粒含有插入
19、片断()16 溶菌酶水解的底物是 N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物()17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域()18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下,酶催化反应为零级反应()19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团()20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关()21.心碱脂是一种在中性 pH 下带正电荷的磷脂()22.生物膜上有许多膜固有蛋白,他们的跨膜肽段大多呈 螺旋结构()23.生物膜以脂双层结构为骨架,虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成,但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的()24.NADH 氧化时的 P/O 比值时 3()25.生物膜
20、是离子与极性分子的通透屏障,但水分子是例外()二.选择题(共 20 分)1.胰岛素的功能单位是 A 单体; B 二体; C 四体; D 六体2.1mol/L 硫酸钠溶液的离子浓度为 A 2; B 3; C 6; D 83.某蛋白质的 pI 为 8,在 pH6 的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为A。像正极方向泳动;B 没有泳动;C 向负极方向泳动;D 向正负极扩散4.今有 A,B,C,D 四种蛋白质,其分子体积由大到小的顺序是 ABCD,在凝胶过滤柱层析过程中,最先洗脱出来的蛋白质一般应该是 A A; B B; C C; D D5.噬菌体展示可用来研究 A 蛋白质-蛋白质相互作用; B 蛋
21、白质-核酸相互作用; C 核酸-核酸相互作用; D 噬菌体外壳蛋白性质6.DNA 合成仪合成 DNA 片断时,用的原料是A 4 种 dNTP; B 4 种 NTP; C 4 种 dNDP; D4 种脱氧核苷的衍生物7.酒精沉淀核酸时,下列何种长度核苷酸不能被沉淀 A10; B20; C50; D1008.反密码子 IGC 可以识别的密码子是 A。GCG; B。GCA; C。ACG; D。ICG9.真核 RNA 聚合酶 2 最大亚基 C 末端重复序列的功能是A 磷酸化使 RNA 聚合酶 2 与其它转录因子解离,促进转录的起始与延伸;B 乙酰化使 RNA 聚合酶 2 与组蛋白竞争结合与 DNA 上
22、,促进转录的起始与延伸;C 甲基化使 RNA 聚合酶 2 活化,促进转录的起始与延伸;D 三者都有10.GAL4 因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录,它的 DNA 结合结构域属于 A 锌指结构; B 亮氨酸拉链结构; C 螺旋-环-螺旋结构; D 螺旋-转角-螺旋结构11.RNA 聚合酶 1 的功能是A 转录 tRNA 和 5sRNA 基因; B 转录蛋白质基因和部分 snRNA 基因;C 只转录 rRNA 基因; D 转录多种基因12.在真核细胞内,着丝粒是指A 两个构成染色体 DNA 分子的连接区域;B 一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区;C 染色体 DNA 上的一
23、段特殊序列,能够促进与纺锤体的相互作用;D 大约 430bp 长的一段序列,两端为两段高度保守的序列13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应 A 羧肽酶 Y; B 胃蛋白酶;C 木瓜蛋白酶;D 胰凝乳蛋白酶14.达到反应平衡时,决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是A 酶的比活力高低; B 酶的 Vmax 大小; C 酶的转化数; D 酶的 Km15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质,其中含量最高的是A 淀粉; B 木质素; C 纤维素; D 半纤维素16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是A 枯草杆菌蛋白酶; B 胃蛋白酶; C 嗜热菌蛋白酶; D 金黄色葡
24、萄糖球菌 v8 蛋白酶17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂A 氯霉素; B 抗酶素 A; C2,4-二硝基苯酚; D- 羟基丁酸18.蛋白激酶 A 催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化,它是A 酪氨酸残疾; B 组氨酸残基; C 丝氨酸残基; D 门冬氨酸残基19.钠钾 ATP 酶催化一分子 ATP 水解时,同时A 泵出 2Na+,泵入 2K+; B 泵出 3Na+,泵入 3K+; C 泵出 2Na+,泵入 3K+; D 泵出3Na+,泵入 2K+;20.动物细胞质中游离 Ca2+的浓度大约是细胞外的 A 1/1000; B 1/200; C 1/50; D 1/10三.填空(共 2
25、5 分)1.肌红蛋白分子中的辅基含有 离子(金属) ,在正常状态下,该离子的化合价为 。2.在朊病毒致病过程中,其分子中的 结构转变为 结构,从而使其分子产生 。3.Northern 杂交是用 鉴定 。4.真核生物主要有三类 DNA 聚合酶:DNA 聚合酶、DNA 聚合酶和 DNA 聚合酶 ;他们分别催化 rRNA,mRNA,和 的转录。5. 通过结合反式因子,改变染色质 DNA 的结构而促进转录。6. 噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过 重组而进入溶源状态。7.在同源重组过程中,常常形成 中间体。8.大肠杆菌 DNA 依赖的 RNA 聚合酶由 2 五个亚基组成, 亚基与转录启动有关。9.天然染色体
26、末端不能与其他染色体断裂片断发生连接,这是因为天然染色体的末端存在 结构。10.真核生物的基因组中有许多来源相同,结构相似,功能相关的基因,这样的一组基因称为 11.酶活性调节控制包括,酶的别构调节(或正负反馈调节) ,可逆的化学修饰,酶原活化,激活蛋白或抑制蛋白的调控。此外,还有 和 调控等。12.多酶复合体具有自身调节的机制,第一步反应一般是限速步骤,可被其他反应产物 。这种作用被称之为 ,催化这步反应的酶往往是 。13.紧密偶联的线粒体内膜在状态 4 时的跨膜电位为 伏特。14.磷酸酯酶 C 水解磷脂酰胆碱,生成 和 。15.蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是 。16.表皮生长因子受体
27、与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有 。四.问答题(108)1.某一单链蛋白质,经过实验测得,在 20 摄氏度时其解折叠反应(ND,其中 N 为该蛋白质的折叠态,D 为非折叠态)的平衡常数是 1.010-8,试求该种蛋白质在该条件下折 叠反应的自由能.(R=1.9872cal/(mol K)或 R=8.3144J/(molK)2.何谓蛋白质组,简述其研究特点。3.请你尽可能多地列举 RNA 生物功能的种类。4.说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义.。5.简述反转录(还原)病毒 HIV 的结构特征及其可能的致病机理。6.简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰
28、的种类及其生物学意义。7.如何用实验证明双功能酶所催化的 2 种化学反应是否发生在同一催化部位。8.为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的。9.试管内偶联线粒体加琥珀酸与 ADP 产生状态 3 呼吸耗氧时,在分光光度计下检测到线粒体内源 NAD+还原。这有那几种可能的机制?最后证明是何种机制。10.信号转导中第二信使指的是什么?试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。中国科学院 2003 年攻读硕士学位研究生入学试题答案一、是非题1、- 多肽链的共价主链形式上都是单键;2、+;3、- 胰岛素无活性;4、+ 人体必需氨基酸有 8 种:亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨
29、酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、组氨酸;5、+ 胰蛋白酶为蛋白水解酶,能选择的水解蛋白质中有赖氨酸或精氨酸的所及所构成的肽链;6、-;7、-;8、- ;9、- 当核酸变性降解时,其紫外吸收强度显著增加,称为增色效应;10、+;11、-;12、+ 色氨酸操纵子转录的衰减作用是通过衰减子( attenuator)调控原件使转录终止。色氨酸操纵子的衰减子位于 L 基因中,离 E 基因 5端约 30-60bp;13、-;14、-;15、+;16、+;17、- ;18、+;19 、- 蛋白质是两性电解质,分子中的可解离基团主要是侧链基团,也包括末端氨基和羧基;20、+;21、-;22、+;23、+ ;24、
30、+ NADH 经呼吸链完全氧化时 P/O 为 3,即 1 分子的 NADH 通过呼吸链将电子最终传递给 O2 可产生 3 个 ATP;25、- 离子和大的不带电荷的极性分子葡萄糖、蔗糖等不能通过生物膜,但是小的不带电荷的极性分子水、尿素、甘油等可以通过。二、选择题1、A;2、B;3、C;4、A;5、A;6、A ;7、A ;8、B 带有反密码子 IGC 的 tRNA Ala分子可以与特异编码 Ala 的三个密码(GCU ,GCC ,GCA)中的任一个结合;9、A;10、A;11、C;12、C ;13、C 木瓜蛋白酶是一种含巯基( -SH)肽链内切酶,具有蛋白酶酯酶的活性,有较广泛的特异性,对动植
31、物蛋白、多肽、酯酰胺等有较强的水解能力,同时还具有合成的功能;14、C;15、A;16、D 葡萄球菌蛋白酶和梭菌蛋白酶是高专一性肽链内切酶。葡萄球菌蛋白酶亦称 Glu(谷氨酸)蛋白酶,当在磷酸缓冲液(PH7.8)中进行裂解时,它能在 Glu 残基和 Asp(天冬氨酸)残基的羧基端断裂肽键。如果改用碳酸氢铵缓冲液(PH7.8)或醋酸铵缓冲液(PH4.0)时,则只能断裂谷氨酸残基端的肽键。梭菌蛋白酶或称 Arg 蛋白酶,此酶专门裂解 Arg 残基的羧基端肽键;17、C;18、C 蛋白激酶 A 催化亚基可使细胞内某些蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化;19、D;20、A三、填空题1、亚铁、二价;2、 螺
32、旋、 片层、构型变化;3、探针杂交、RNA;4、;5、顺式作用、元件;6、DNA;7、Holliday;8、s;9、端粒; 10、基因家族(gene family) ;11、别构调节、激素调节;12、抑制、反馈调节、别构酶;13、31054105 伏特;14、1,4,5-三磷酸肌醇(I3P )和二酰基甘油()DAG;15、SH2;16、酪氨酸激酶。四、问答题1、G=RTlnK=-2.3038.3144293lg10-8=103.35kJ2、蛋白质组(proteome)指由一个基因组( genome) ,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质(protein ) ,蛋白质组学(peoteomics)是
33、用二维电泳和质谱技术在蛋白质水平上定量、动态、整体性地研究生物体,是研究蛋白质组的技术。蛋白质组分析工作集中在两个方面:通过二维胶电泳等技术得到正常生理条件下的机体、组织或细胞的全部蛋白质的图谱,相关数据将作为待测机体、组织活细胞的二维参考图谱和数据库。比较分析在变化了生理条件下蛋白质组所发生的变化。蛋白质组学的研究内容包括:蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合 Western 等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。研究翻译后修饰:对阐明蛋白质的功能具有重要作用。mRNA 表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化、酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能
34、的重要方式。蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和翻译技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。促进分子医学的发展:如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质,而很多药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。3、核糖体 RNA(rRNA):核糖体组分。 信使 RNA(mRNA):蛋白质合成模板转运 RNA(tRNA):转运氨基酸。 不均一核 RNA(hnRNA):成熟 mRNA 的前体。小核 RNA(snRNA ):参与 hnRNA 的剪接、转运。 小胞浆 RNA(scRNA/7SL-RNA ):蛋白质内质网定位合成的
35、信号识别体的组成成分。microRNA:平均每个 microRNA 调解人类的 200 种不同的 mRNA,并且多个 microRNA 能够协调它们的活动以调节一些特殊的靶标基因。miRNA:主要功能是调节内源基因的表达,参与细胞周期的调控及个体发育过程。导引 RNA(gRNA):mRNA 编辑。RNA 聚合酶(RNA P ):tRNA 加工。核仁小分子 RNA(snoRNA ):参与 rRNA 成熟加工(切割和修饰) 。SRP-RNA:参与蛋白质的分泌。端粒 mRNA:参与 DNA 端粒合成并影响细胞的寿命。tmRNA:参与破损 mRNA 蛋白质合成的终止。4、基因芯片工作原理:应用已知核酸
36、序列作为靶基因与互补的探针核苷酸序列杂交,通过随后的信号检测进行定性与定量分析。具体讲是将许多特定的寡核苷酸片段或 cDNA 基因片段作为靶基因,有规律的排列固定于支持物上,样品 DNA/RNA 通过 PCR 扩增、体外转录等技术掺入荧光标记分子或反射性同位素作为探针然后按碱基配对原理将两者进行杂交,在通过荧光或同位素检测系统对芯片进行扫描,有计算机系统对每一探针上的信号作比较和检测,从而得出所需要的信息。Schematic illustrantion of an HIV-1 virion.The viral particle is covered by a lipid bilayer tha
37、t is derived from the host cell.基因芯片技术应用领域主要有基因表达谱分析、新基因发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和预测、药物筛选、基因测序等。另外基因芯片在农业、食品监督、环境保护、司法鉴定等方面都将作出重大贡献。随着研究的不断深入和技术的更加完善基因芯片一定会在生命科学院就领域发挥出其非凡的作用。5、HIV 结构gp120gp41核心:二两 RNA 链+ 逆转录酶+核心蛋白 p17。P24P24 capsid外壳:来自宿主细胞脂膜+病毒编码糖蛋白(外膜 gp120,跨膜 gp41) 。ReverseTranscriptaseRNAProte
38、aseIntegraseLipid bilayerHIV-1 基因组 9 个:gag、pol、env 编核心蛋白、逆转录酶、跨膜糖蛋白;Tat、rev、nef 调控病毒复制;vif、vpr、vpu 功能不清。无 nef 基因的 HIV 通过血液感染患者并为发展为AIDS,提示可将病毒调控蛋白(如 nef 编码蛋白)作为抗 AIDS 药物的靶点,或采用无关键调控蛋白的 HIV 突变体作为疫苗治疗 AIDS。HIV 致病机理HIV 感染 CD4+T 细胞:HIV-gp120+CD4+T 细胞膜上 CD4R+趋化因子受体CXCR4HIV-RNA 进入细胞内 反义 DNA双链 DNA与宿主基因整合潜伏
39、(前病毒)被 TNF、IL-6 激活复制入血CD4+T 细胞破坏。 HIV 感染组织中单核巨噬细胞、树突装细胞:10-50%被感染 HIV-gp120+MC-CD4R+共受体 CCR5HIV 进入细胞 HIV-Ab+(树突 +MC)-Fc 受体HIV 进入大量复制储存、释放。6、真核生物染色体上组蛋白的种类包括 H2A、H2B、H3、H4 四种。组蛋白修饰包括:乙酰化、磷酸化、甲基化、泛素化以及 ADP 核糖基化等。特定的组蛋白修饰与特定的基因激活化抑制状态相联系,组蛋白修饰在基因调控中发挥了重要作用。将有利于:更好的开发新药。深入探讨遗传调控和表观遗传调控相互作用的网络与不同生物学表型之间的
40、关系。在控制真核基因选择性表达的网络体系内进一步深入理解染色质结构、调控序列以及调控蛋白之间交互作用的内在机理。建立基因表达的调控网络数据库及其分析系统。7、双功能酶活性中心(或催化位点)的测定。双功能酶:在生物体内共价修饰后有不同于未共价修饰的不同时的酶活性的酶。活性中心(或催化位点)的测定,对共价修饰的不同的酶与未共价修饰的用同样的方法测定活性中心(或催化位点)的测定看是不是一样。比如定点突变等。8、主要从催化的酶、分子伴侣和其它分子的影响等几个方面组织答案。9、氧化磷酸化的偶联机制的相关内容:化学偶联假说:认为电子传递时 ATP 的合成是由化学能的直接转换,在电子传递时先生成不含磷酸的高
41、能中间物,再转移成含磷酸的高能中间物,最后生成 ATP构象偶联假说:认为由电子传递所产生的能量的储存是通过一种电子传递蛋白或是偶联因素分子的构象变化而实现的。这种高能构象状态的产生是维持蛋白质三维构象的一些弱键(如氢键、疏水基团)的位置和数目发生变化的结构,这些弱键的数目和位置的变化是由能量变化引起的,这种高能结构中的能量即提供给 ADP 和无机磷酸形成 ATP,同时能量携带蛋白又可逆的回到原来的低能状态化学渗透假说(chemiosmotic hypothesis):认为电子传递的结果将 H+从线粒体内膜上的内侧“泵”到内膜的外侧,于是在内膜内外两侧产生了 H+的浓度梯度。即内膜的外侧与内膜的
42、内侧之间含有一种势能,该势能是 H+返回内内膜内侧的一种动力。H+通过 F0F1-ATP 酶分子上的特殊通道又流回内膜的内侧。当 H+返回内膜内测时,释放出自由能的反应和 ATP 的合成反应相偶联。10、第二信使指能把激素或神经递质的信息传导细胞内,并引起相应生理效应的细胞内的某种化学物质至少有两个基本特性:是第一信使同其膜受体结合后最早在细胞膜内侧或胞浆中出现、仅在细胞内部起作用的信号分子能启动或调节细胞内稍晚内出现的反应信号应答。细胞内有五种最重要的第二信使:cAMP、cGMP、1,2- 二酰甘油(DAG ) 、1,4,5-三磷酸肌醇(IP3) 、 Ca2+等。环磷腺苷(cAMP):是 A
43、TP 经 AC 作用的产物。 受体、D1 受体、H2 受体等激动药通过 GS 作用使 AC 活化,ATP 水解而使细胞内cAMP 增加。 受体、D2 受体、MACH 受体、阿片受体等激动药通过 Gi 作用抑制 AC,细胞内 cAMP 减少。cAMP 受磷酸二酯酶(PDE)水解为 5AMP 后灭活。茶碱抑制 PDE而使胞内 cAMP 增多。cAMP 能激活蛋白酶 A(PKA )而是胞内许多蛋白酶磷酸化(ATP提供磷酸基)而活化环磷鸟苷(cGMP):是 GTP 经鸟苷酸环化酶(GC)作用的产物,也受 PDG 灭活。 cGMP 作用与 cAMP 相反,使心脏抑制、血管舒张、肠腺分泌等。 cGMP可以
44、独立作用而不受 cGMP 制约。cGMP 可激活蛋白酶 G 而引起各种效应钙离子:对细胞功能有着重要调节作用,如肌肉收缩、腺体分泌、白细胞及血小板活化等。中科院 2004 生化与分子一.是非题:每题 1.5 分,共 30 分,答“是”写“+”,答“非”写“-”。 1. 目前已知的 G 蛋白都是由 和 亚基组成的. 2. 作为膜脂的鞘糖脂的功能主要与能量代谢有关. 3. 生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响. 4. 磷脂的代谢转化主要是与三酯酰甘油的合成和利用有关. 5. 人是最高等生物,其基因组的碱基对数目(2.910 9)是动物界中最大的. 6. 有两个核酸制剂 A 和 B,A 的 A26
45、0/A280=2.0,B 的 A260/A280=1.5,因此可判定制剂 A的纯度比制剂 B 的要高. 7. 真核生物 mRNA 的两端都有 3-羟基. 8. DNA 半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是 53.而另一条链的合成方向为35. 9. 一个真核细胞内基因编码所用的密码子是通用的. 10. 人类基因组中有大量重复序列,如 SINE,ALu 等序列. 11. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的. 12. 在遗传作图中,1 厘摩(cM)相当于 1Mb 的碱基长度. 13. 一个酶催化正反应和逆反应的 Kcat 或 Km 值可以不同,但 Kcat/Km 比值通常是相同的. 14
46、. 信号肽的结构有一些特征,目前发现的信号肽序列都是位于多肽连的 N 端. 15. 构成淀粉,纤维素和半纤维素的基本单位都是葡萄糖. 16. ELISA 和 Western 印迹两种方法都是应用抗体检测抗原的实验手段. 17. 生物膜的基本结构是脂双层.其中的二个单层的脂质组成大体上是相同的. 18. Na+,K+-ATP 酶在水解 1 分子 ATP 时使 2 个 K+由细胞外进入细胞内,同时使 2 个 Na+由细胞内达到细胞外. 19. 脂质体不是一种细胞器. 20. 寡霉素是氧化磷酸化的抑制剂,既抑制呼吸也抑制磷酸化,但是它对呼吸的抑制可以被解偶联剂所解除. 二.选择题,每题 1.5 分,
47、共 45 分.答案一律写在答题纸上。 1. 类二十碳烷(eicosanoid)的主要前体是 A.前列腺素; B.亚油酸; C 花生四烯酸; D 棕榈酸. 2.环加氧酶(cyclooxygenase)参与下述何种分子的合成? A.白三烯; B.血栓烷; C.亚油酸; D,血小板活化因子. 3. 肌醇三磷酸(IP 3)作用与受体,从而调节 A.G 蛋白的活性; B.Ca 2+通道; C.PKG 的活性; D.腺苷酸环化酶的活性. 4. 磷脂酶 D 催化磷脂酰胆碱水解的产物是 A.二酯酰甘油; B.磷脂酸; C 磷酸胆碱; D.溶血磷脂酸. 5. 一氧化氮(NO)受体是 A.G 蛋白偶联受体; B.
48、鸟苷酸环化酶; C.腺苷酸环化酶; D 蛋白酪氨酸激酶. 6. 已知佛波醇酯(TPA)可以强烈地活化 A.蛋白酪氨酸激酶; B.G 蛋白; C.蛋白激酶 C; D.蛋白激酶 B. 7. 能与 DNA 结合使 DNA 失去模板功能,从而抑制复制和转录的是 A.5-氟尿嘧啶; B.放线菌素; C.利福霉素; D.-鹅膏蕈碱. 8. 氨基酸在叁入肽链前需要被 ATP 活化,氨基酸活化的场所是 A.内质网; B.线粒体; C.核糖体; D.细胞质. 9. 真核生物 mRNA 的帽子结构中,m7G 与多核苷酸链通过三个磷酸基联接的方式是 A.2-5; B.3-5; C.3-3; D.5-5. 10. 与 tRNA 中的反密码子为 GC