3药物的杂质检查.ppt

1、第3章 药物的杂质检查,第一节 药物的杂质及其来源,一、药物的纯度,指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。,杂质（forin、impurities）是指：1. 有毒副作用的物质。2. 本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质。3. 本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质（信号杂质）。,二、药物中杂质的来源,1. 生产过程中引入,（1）原料、反应中间体及副产物,（2）试剂、溶剂、催化剂类,（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质,2. 贮藏过程中产生,水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮

2、解和发霉等,易发生水解反应的结构：,酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等,易发生氧化反应的结构：,醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等,例1: 麻醉乙醚在日光、空气及湿气作用下, 易氧化分解为醛及有毒的过氧化物. CH3CH2OCH2CH3 CH3CHO + CH3CH(OH)-O-O-CH(OH)CH3（二羟乙基过氧化物） 药典规定:起封后24小时内使用,例2：四环素在酸性条件下可发生差向异构化反应，生成差向四环素(毒性高、活性低),96：131在药物生产过程中引入杂质的途径为A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C. 需加入的各种试剂产生吸附，共

3、沉淀生成混晶等造成D. 所用金属器皿及装置等引入杂质,三、杂质的分类,药物中的杂质按来源分为,1. 一般杂质：如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。,2. 特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质，如甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。,（二）药物中的杂质按结构分为：无机杂质：Cl-、S2-、CN-、As、重金属.有机杂质：中间体、副产物、分解物、异构体、残留溶剂.,（三）药物中的杂质按性质分为：,信号杂质指本身一般无害,但其含量多少可反映药物纯度水平,指示生

4、产工艺是否合理.如：氯化物、硫酸盐等. 有害杂质对人体有毒害的杂质.在质量标准中严加控制,以保证用药安全.如：重金属、砷盐、氰化物、氟化物等. 无效或低效杂质 a 具有立体异构体的药物,其生物活性有很大差异; 如：肾上腺素为左旋体,其升压作用是右旋体的12倍. b 异构体中,其顺式体与反式体的生物活性也不相同; 如：VA以全反式的生物活性为最高.,99x：85中国药典（2005年版）中规定的一般杂质检查中不包括的项目是A. 硫酸盐检查B. 氯化物检查 C. 溶出度检查D. 重金属检查E. 砷盐检查,四、药物纯度(药用规格）与化学试剂的纯度,药物的纯度考虑杂质的生理作用，药物必须进行临床试验。主

5、要从用药安全、有效和对药物稳定性等方面考虑.药品只有两个等级：合格或不合格。 化学试剂是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂的使用范围和使用目的加以规定。有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。,基准试剂:主要是指容量分析类中的容量分析工作基准含量范围为99.95%100.05%（重量滴定）。一般用于标定滴定液。必须由国家计量科学院检定，生产单位则利用第一基准作为工作基准产品的测定标准。,第二节 药物的杂质检查法,一、杂质限量,指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示,杂质量 杂质限量 杂质量,药品合格,药

6、品不合格,二、药物的杂质检查法,1. 对照法（限量检查法 Limit Test）,2. 灵敏度法,系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。特点：不需对照品,3.含量测定法(比较法）,测定杂质的绝对含量，如测定吸收度、pH值等。特点：准确测定杂质的量，不需对照品,三、 杂质限量的计算,97：71检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001，应取供试品的量为A. 0.20g B. 2.0g C0.020gD. 1.0g E. 0.10g,已知：c1 g/ml1106 g/ml V2ml L0.0001%,96：79检

7、查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml0.01mg的Pb）多少ml？ A. 0.2ml B. 0.4ml C2ml D. 1ml E. 20ml,第三节 一般杂质检查,一、一般杂质检查规则,药品检验操作标准规定：1. 遵循平行操作原则,（1）仪器的配对性 如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致 （2）对照品与供试品的同步操作,2. 正确的取样及供试品的称量范围 1g不超过2%，1g不超过1%,3. 正确的比色、比浊方法,4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份

8、,二、氯化物检查法,（一）原理 对照法,（二）检查方法 药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照浴液。,于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比较，即得,（三）测定条件,1. 标准NaCl溶液 10gCl/ml，5

9、0ml溶液中含5080g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液58ml。,2. 反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。,（1）加速AgCl浑浊的形成；,（2）产生较好的乳浊；,（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。,3. 试剂：硝酸银,5. 避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。,4. 供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,6. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。,7. 平行操作原则,（四）干扰及排除,1. 若供试品有色，需经处理后方可检查。,（1）内消色法：倍量法，为取供试品两等份，其

10、中一份经处理，消除其中待测离子后加入一定标准量的待测离子作为对照管，另一份作为供试品管，在相同条件下依法操作，检查待测离子是否超过限量 。如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。,（2）外消色法,外消色法为加入一定的有色物，如稀焦糖等，或经处理降低色度，不干扰测定，如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。 如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。,95：82. 药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（ ） A. 硫酸 B. 硝酸 C. 盐酸 D. 醋酸 E. 磷酸,例1. 中国药典 （2000年版） 规定

11、，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10gCl/ml）58ml的原因是（ ） A. 使检查反应完全 B. 药物中含氯化物的量均在此范围 C. 加速反应 D. 所产生的浊度梯度明显 E. 避免干扰,例2. 采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（ ） A加速生成氯化银浑浊反应 B消除某些弱酸盐的干扰 C消除碳酸盐干扰 D消除磷酸盐干扰 E避免氧化银沉淀生成,例3. 当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（ ） A内消色法 B外消色法 C比色法 D差示比浊法E差示可见分光法,例4. 若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是（ ）

12、 A. 加入一定量氯仿提取后测定 B. 氧瓶燃烧 C. 倍量法 D. 加入一定量乙醇 E. 以上都不对,例5. 下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（ ） A. 所用比色管需配套 B. 稀硝酸酸性下(10ml/50ml) C. 避光放置5分钟 D. 用硝酸银标准溶液做对照 E. 在白色背景下观察,三、硫酸盐检查法,（一）原理 对照法,（二）测定条件,1. 标准K2SO4溶液0.1mg/ml，50ml溶液中含0.10.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液15ml。,2. 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。,3. 试剂：氯化钡,5. 比浊方法：

13、同置于黑色背景上，自上向下观察。,4. 供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀,若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。,（三）干扰及排除,例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（ ） A. 标准氯化钡 B. 标准醋酸铅溶液 C. 标准硝酸银溶液 D. 标准硫酸钾溶液E. 以上都不对,四、铁盐检查法,1. 原理 对照法,（一）硫氰酸盐法 ChP（2000）、USP（24）,2. 检查方法 药典附录除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成,35m1后，加30%硫氰酸铵

14、溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液（取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，,加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀）比较，即得,3. 测定条件,（1）用FeNH4(SO4)212H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10g Fe3+/ml，50ml溶液中含1050g的Fe3+显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.05.0ml,（2）反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50m

15、l供试溶液中含稀盐酸4ml为宜。,（3）试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应向正反应方向进行,（4）检查Fe2+和Fe3+,（5）铁盐检查时，加氧化剂氧化Fe2+为Fe3+。加过硫酸铵可氧化Fe2+为Fe3+，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。加硝酸后加热也可氧化Fe2+为Fe3+,（6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下观察。,4. 干扰及排除,（1）为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比色。,（2）具环状结构的有机药物，需经700800炽灼破坏处理后再依法检查。,（3）干扰离子的影响,（二）巯基醋酸法 BP（1998）对照法,本法灵敏度较高，

16、但试剂较贵,例1. 中国药典（2000年版）规定铁盐的检查方法为（ ） A. 硫氰酸盐法 B. 巯基醋酸法 C. 普鲁士蓝法 D 邻二氮菲法 E. 水杨酸显色法,例2. 中国药典（2000年版）规定，硫氰酸铵法检查铁盐时，加入过硫酸按的目的是（ ）A. 使药物中铁盐都转变为Fe3+B. 防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色C. 使产生的红色产物颜色更深D防止干扰E便于观察、比较,例4. 中国药典收载的铁盐检查，主要是检查（ ） A. Fe B. Fe2+ C. Fe3+ D. Fe2+和Fe3+E. 以上都不对,五、重金属检查法 以铅为代表,中国药典（2000年版）共收载四法。1.重金属的概念 在

17、实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用呈色的金属. 如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、As、Ni、Co、Zn等. 重金属存在影响药物的稳定性及安全性.铅在生产中容易引入，易在体内积蓄中毒，以Pb为代表.,重 金 属 检 查 法,第一法:硫代乙酰胺法适用于溶于水、稀酸、乙醇的药物,最常用方法.,第二法:炽灼后检查法适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸及乙醇的有机药物.,第三法:硫化钠法适用于难溶于稀酸但能溶于碱性溶液药物,巴比妥类、磺胺类,第四法:微孔滤膜法.适用于重金属限量低(2-5g) 药物.,（一）第一法 硫代乙酰胺法,1. 原理 对照法,适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物。,

18、2. 测定条件,（1）用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止Pb2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成，标准硝酸铅溶液10g Pb2+/ml，适宜比色范围为27ml溶液中含1020g的Pb2+。,（2）本法用2ml pH3.5的醋酸盐缓冲液控制溶液pH值为33.5。,（3）显色剂：从ChP（1990）开始改用硫代乙酰胺做显色剂,（1）供试品如有色，需经处理后方可检查。,A. 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液。,B. 内消色法,C. 改用第四法，微孔滤膜过滤法,3. 干扰及排除,（2）若供试品中有微量Fe3+存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或盐酸羟胺（0.5

19、1.0g）还原Fe3+为Fe2+，可消除干扰,（3）若供试品为铁盐，Fe3+在盐酸中生成HFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量铁在氨碱性溶液中，加KCN掩蔽，然后用第三法检查,（4）若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加入掩蔽剂消除干扰。如ZnSO4中重金属的检查，要在碱性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法检查,（二）第二法 炽灼残渣法,适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。,500600炽灼后的残渣，经处理后，依一法检查。,1. 原理 对照法,2. 操作方法,含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷坩埚，带入大量重金属）,（三）第三法 硫化钠法,适

20、用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。,1. 原理 对照法,2. 测定条件,（1）NaOH碱性条件下,（2）显色剂：硫化钠,（四）第四法 微孔滤膜法,适用于含25g重金属杂质及有色供试液的检查。重金属限量低时，用纳氏比色管难以观察，用微孔滤膜滤过，重金属硫化物沉集于滤膜形成色斑，与标准铅斑比较，可提高检查灵敏度。,USP（23）检查重金属时，使用硫化氢试液显色。检查时，除用供试管、对照管，还规定用监控管，三管同法检查。我国药品检验操作标准中规定，检查新产品中重金属时，应用该法。,97：78重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶液控制最佳的pH值是（ ） A. 1.5 B

21、. 3.5 C. 7.5 D. 9.5 E. 11.5,95：84微孔滤膜法是用来检查（ ） A. 氯化物 B. 砷盐 C. 重金属 D. 硫化物 E. 氰化物,例1. 中国药典(2000年版)重金属检查法中，所使用的显色剂是（ ）A. 硫化氢试液B. 硫代乙酰胺试液C. 硫化钠试液D. 氰化钾试液E. 硫氰酸铵试液,例2. 葡萄糖中进行重金属检查时，适宜的条件是（ ） A. 用硫代乙酰胺为标准对照液 B. 用10ml稀硝酸/50ml酸化 C. 在pH3.5醋酸盐缓冲溶液中 D. 用硫化钠为试液 E. 结果需在黑色背景下观察,例3. 现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属检查，应采用中国药典上收载

22、的重金属检查的哪种方法（ ） A. 一法 B. 二法 C. 三法 D. 四法 E. 以上都不对,例4. 下面哪些方法为中国药典收载的重金属检查方法（ ）A. 500600炽灼残渣后,按一法操作B. pH33.5条件下，加入硫化氢试液C. 碱性下，加入硫化钠试液D. 按一法操作，结果用微孔滤膜过滤后观察色斑 E. 以上都对,六、砷盐检查法,（一）古蔡法 ChP（2000）、BP（1998）,遇HgBr2试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。,1. 原理 对照法,HCl、 KI TS、 酸性SnCl2 TS,Zn粒,1）装置： 检砷瓶： 砷化氢发生瓶A导气管C配套具

23、孔塞DE,2. 测定条件,（1）标准砷溶液临用新配，1gAs/ml。,（2）酸为反应物，酸量应足够，所以加浓盐酸5ml。,（3）酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：,A. 还原As5+为As3+，加快反应速度；,B. 碘化钾被氧化生成的I2又可被氯化亚锡还原为I-，I-与反应中生成的Zn2+能形成稳定的配位离子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；,C. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氢气均匀而连续地发生；,D. 可抑制微量Sb的干扰，在实验条件下，100 gSb存在不干扰。,（4）醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg装管高度6080mm。,（5）锌粒应无砷

24、,（6）砷斑不稳定，应立即观察,4. 干扰及排除,（1）供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐时，加HNO3，使氧化成硫酸盐，以除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。,（2）供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试液，将Fe3+还原为Fe2+。如枸橼酸铁铵中砷盐的检查。,（3）具环状结构的有机药物，要先行有机破坏后再进行检查。常用的有机破坏方法：,（4）本法适用于不含Sb或含Sb量小于100g的供试品。,碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查,（二）Ag-DDC法 检查、含量测定 ChP(2000)、USP（24）,砷盐的限量检查 微量砷盐的含量测定.,砷化氢与Ag-DDC

25、溶液作用，还原 AgDDC为红色胶态银，直接比色或于510nm波长处测定吸收度，进行比较。,第一步：同古蔡氏法生成砷化氢第二步：砷化氢还原Ag-DDC的 吡啶溶液,产生红色的胶态银, 与同条件下一定量标准砷溶液所呈颜色用目视比色法或在510nm波长处测定吸收度进行比较判断.,用有机碱吸收反应产生的HDDC有利于反应的进行。USP（24）用吡啶，ChP（2000）用三乙胺。,本法适用于含Sb量小于500g的供试品。,（三）白田道夫法 ChP（2000）含Sb药物中砷盐的检查如葡萄糖酸锑钠,原理 对照法,（四）次磷酸法 BP（1998）,原理 在盐酸酸性溶液中, 次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷,与标

26、准砷溶液同法处理后比较颜色.NaH2PO2+HClH3PO2+NaCl3H3PO2+H3AsO33H3PO3+2AS 优点：不受S2-,SO32-,Sb,Hg,Ag干扰 缺点：灵敏度低.,98：82. 在药物的杂质检查中，其限量一般不超过百万分之十的是（ ） A. 氯化物 B. 硫酸盐 C. 醋酸盐 D. 砷盐 E. 淀粉,97：79. 在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入醋酸铅棉花的目的是（ ） A. 除去I2 B. 除去AsH3 C. 除去H2S D. 除去HBr E. 除去SbH3,95：83. AgDDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与AgDDC吡啶作用，生成的物质是（ ） A. 砷斑 B.

27、 锑斑 C. 胶态砷 D. 三氧化二砷 E. 胶态银,98：137. 中国药典（1995年版）收载的古蔡法检查砷盐的基本原理是（ ）A. 与锌、酸作用生成H2S气体B. 与锌、酸作用生成AsH3气体C. 产生的气体遇氯化汞试纸产生砷斑D. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积大小E. 比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色强度,例15用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，排除干扰的方法：A. 先用硝酸或溴水氧化B. 先加酸性氯化亚锑还原C. 改用白田道夫法 D. 先加氰化钾掩蔽E. 先加草酸生成沉淀1. 硫化物（ ）2. 亚硫酸盐（ ）3. 硫代硫酸盐（ ）4. 高铁盐（ ）5. 锑盐（ ）,例6. AgD

28、DC法检查砷盐时，所产生的红色溶液为（ ）A. HDDC吡啶溶液B. Ag吡啶溶液C. Ag的胶态溶液D. Ag(DDC)溶液E. AsAg3溶液,例7. ChP（2000）检查葡萄糖酸锑钠中的砷盐时，应选用（ ） A. 古蔡氏法 B. 白田道夫法 C. 碘量法 D. AgDDC法 E. 契列法,例8. 葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有（ ）APb2+标准液BSnCl2试液CKI试液DZnE醋酸铅棉花,例9. Ag-DDC法检查砷盐时，加入碘化钾和酸性氯化亚锡的作用为（ ） A将As5+还原为As3+ B有利于AsH3生成反应 C抑制SbH3的生成 D形成Zn-Sn齐以均匀而连续地发生氢气

29、E催化加速生成AsH3,97：106110 A. 硝酸银试液 B. 氯化钡试液 C. 硫代乙酰胺试液 D. 硫化钠试液 E. 硫氰酸盐试液 97：106药物中铁盐检查（ ） 97：107磺胺嘧啶中重金属检查（ ） 97：108药物中硫酸盐检查（ ） 97：109葡萄糖中重金属检查（ ） 97：110药物中氯化物检查（ ）,98：96100可用于检查的杂质为 A. 氯化物 B. 砷盐 C. 铁盐 D. 硫酸盐 E. 重金属 98：96在酸性溶液中与氯化钡生成浑浊液的方法（ ） 98：97在酸性溶液中与硫氰酸盐生成红色的方法（ ） 98：98在实验条件下与硫代乙酰胺形成均匀混悬溶液的方法（ ） 9

30、8：99Ag-DDC法（ ） 98：100古蔡法（ ）,例15 杂质检查中所用的酸是 A. 稀硝酸 B. 稀盐酸 C. 硝酸 D. 盐酸 E. 醋酸盐缓冲液 1. 氯化物检查法（ ） 2. 硫酸盐检查法（ ） 3. 铁盐检查法（ ） 4. 重金属检查法（ ） 5. 砷盐检查法（ ）,检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物中混入的无机杂质(金属氧化物或无机盐类)。1. 原理样品炭化后+ H2SO4湿润700800炽灼至恒重炽灼残渣（硫酸灰分）限量一般为0.1%0.2%,七、炽灼残渣检查法,2. 操作方法,3. 注意事项,（1）供试品的取样量应根据炽灼残渣限量和称量误差决定。,（3）若残渣需留作重

31、金属检查，则500600炽灼至恒重。,（2）含氟的药物对瓷坩埚有腐蚀，应采用铂坩埚。,（4）加硫酸处理是使杂质转化为稳定的硫酸盐，并帮助有机物炭化,例1. 炽灼残渣检查法一般加热恒重的温度为（C） A. 500600 B. 600700 C. 700800 D. 8001000 E. 10001200,例2. 炽灼残渣检查后，将残渣留作重金属检查时，炽灼温度应为（A） A. 500600 B. 600700 C. 700800 D. 8001000 E. 10001200,例3. 炽灼残渣的限量一般为（E） A. 1 B. 0.51 C. 0.40.5 D. 0.20.3 E. 0.10.2,

32、例4. 炽灼残渣检查时，炭化后经硫酸处理后灰化至完全的称为（C） A. 灰分 B. 残渣 C. 硫酸灰分 D. 炽灼灰分 E. 残余灰分,八、溶液颜色检查法,控制药物中有色杂质限量的方法。,ChP(2000)采用三种方法检查。,第一法 目视比色法 即与标准比色液比较的方法，全波长范围定性观察,观察方法,标准比色液的配制,第二法 分光光度法 单一波长定量,第三法 色差计法 全波长范围定量,本法是通过色差计直接测定溶液的透视三刺激值，对其颜色进行定量表述和分析的方法。,测色仪器一般为光电积分型色差计,九、易炭化物检查法,检查药物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有机杂质。,方法：H2SO4炭

33、化后与对照液比较。,对照液： （1）“溶液颜色检查”项下的标准比色液； （2）由比色用氯化钴液，比色用重铬酸钾液，比色用硫酸铜液按规定方法配成的对照液；,比色：同置白色背景前，平视观察比较。,（3）高锰酸钾液,十、澄清度检查法,检查药物中的微量不溶性杂质，用作注射剂的原料药一般应作此项检查。,1. 检查方法 对照法,2. 浊度标准液的配制,中国药典规定用浊度标准液作为澄清度检查的标准。,反应原理：乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与肼缩合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色浑浊。,1.00硫酸肼溶液与10乌洛托品溶液等量混合配制浊度标准贮备液 浊度标准原液 浊度标准液（5个级号）,3. 判断

34、药典中规定的“澄清”，系指供试品溶液的澄清度相同于所用溶剂，或未超过0.5号浊度标准液。,4. 溶剂：水、酸、碱、有机溶剂 有机酸的碱金属盐类药物强调用“新沸过的冷水”,十一、干燥失重测定法,干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，主要是水分，也包括其它挥发性物质。测定方法：,（一）常压恒温干燥法,适用于受热较稳定的药物。干燥温度一般为105。,干燥失重：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。,炽灼残渣：第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续炽灼.5h后进行。,（二）干燥剂干燥法,适用于受热易分解或挥发的供试品。,干燥剂：硅胶、浓硫酸、P2O5 。,（三）减压干燥

35、法,适用于熔点低，受热不稳定或水分难赶除的药物。,除另有规定外，压力应在2.67kPa（20mmHg）以下。,例15A干燥失重测定法 B炽灼残渣检查C两者皆是 D两者皆不是 1. 有机物杂质检测法（D） 2. 不溶物的测定法（D） 3. 杂质检查法（C） 4. 有机药物中不挥发无机物的检测法(B) 5. 药物中挥发性物质的检测法（A）,例6. 干燥失重测定的方法有（BCDE） A炽灼（500600）法 B常压恒温干澡法 C减压干燥法 D干燥剂干燥法 E减压干燥剂干燥法,例7. 干燥失重测定中应注意哪几个方面（ABCD）A. 供试品平铺在称量瓶中的厚度一般不超过5mmB. 干燥温度一般为105C

36、. 可用干燥剂干燥D. 主要指水分和挥发性物质E. 测定时间不超过3小时,第三节 特殊杂质检查,特殊杂质是指在该药物生产和储藏过程中,根据其生产方法、工艺条件及药物本身结构性质可能引入的特有杂质.阿司匹林水杨酸肾上腺素中的酮体 特殊杂质的检查方法在中国药典2005年版中列入该药正文的“检查”项下。,特殊杂质的检查法,一、物理性质的差异 二、化学性质的差异 三、色谱性质的差异 四、光学性质的差异,臭味及挥发性差异 颜色差异 溶解行为差异 旋光性质的差异 吸附或分配性质的差异 对光吸收性质的差异,一、物理性质的差异,(一) 嗅味及挥发性差异,1. 杂质有特殊气味：乙醇中的杂醇油（异臭） 2. 杂质

37、无挥发性利用药物在室温或加热挥发后,遗留残渣于一定温度加热至恒重,其重量不得超过规定. 例：乙醇中不挥发物的检查.,(二) 颜色差异,药物自身无色生产中引入有色的有关物质或分解产物. 例：磺胺嘧啶原料药中颜色检查磺胺苯环上胺基被氧化生成有色偶氮苯化合物.,(三) 溶解行为的差异,例：葡萄糖中糊精的检查葡萄糖在热乙醇中溶解大,而糊精不溶,因此用90%乙醇回流检查样品的澄清度.,(四) 旋光性质的差异,1. 药物有旋光度而杂质没有. 例:黄体酮在乙醇中比旋度186-198,通过测定比旋度是否偏离规定范围来判断. 2. 杂质有旋光度而药物没有. 例:硫酸阿托品中莨菪碱的检查,供试品水溶液50mg/m

38、L不得过-0.4 ,二、化学性质的差异,1. 酸碱性的差异苯巴比妥中苯基丙二酰脲检查-甲基橙不得显红色. 2. 氧化还原性的差异 氯化物中碘化物. 3. 杂质与一定试剂反应产生沉淀 间苯二酚中邻苯二酚检查. 4. 杂质与一定试剂反应产生颜色盐酸普萘洛尔中游离a-萘酚 5. 杂质与一定试剂反应产生气体盐酸乙基吗啡中胺盐检查.,三、色谱性质的差异,色谱法包括:(一)薄层色谱法(TLC)(二) 高效液相色谱法(HPLC)(三)气相色谱法(GC),(一)薄层色谱法(TLC),将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的色谱图做对比，用以进行药品的

39、鉴别、杂质检查或含量测定的方法。,（二）检查,供试品供试品溶液,杂质对照品对照品溶液,1. 杂质对照品法,优点：同一物质，同一Rf值比较，准确度高、直观性强,缺点：需要杂质对照品,2、高低浓度对比法以供试品溶液的稀溶液作为对照液,A、供试品所显杂质斑点与对照液主斑点比较，不得更深 B、规定供试品杂质斑点的个数,缺点：不同物质，不同Rf值的比较， 准确度差、直观性差,优点：以供试品的稀溶液作为对照液， 不需要杂质对照品，简单、价廉，还可配成几种限量的对照溶液,例：氢化可的松中“其他甾体” 检查,供试液:3mg/ml 对照液:60g/ml(供试液稀释50倍) 判断:供试液的杂质斑点数3个, 且供试

40、液的杂质斑点颜色对照 液主斑点颜色.,(二) 高效液相色谱法(HPLC),1. 峰面积归一化法以杂质峰面积占总面积的比例不超过一定数值来限量 2. 不加校正因子的主成分自身对照法(无对照品) 3. 加校正因子的主成分自身对照法（有对照品） 4. 内标法加校正因子测定杂质的含量 5. 外标法,(三)气相色谱法(GC),用于药物中挥发性杂质的检查, 如药物中残留溶剂、农药残留量等.检查方法:同高效液相色谱法.,四、光学性质的差异,光谱法包括:(一) 紫外分光光度法(二) 红外分光光度法用于药物中无效或低效晶型的检查。（三）原子吸收分光光度法灵敏度高，专属性强，主要用于金属元素的检测。,紫外分光光度法,利用药物和待检杂质对光选择吸收性质的差异进行.,肾上腺素,肾上腺酮,例1: 肾上腺素中肾上腺酮的检查,1. 检查原理,肾上腺酮在310nm 波长处有最大吸收而肾上腺素在这个波长下几乎没有吸收,所以利用肾上腺素和肾上腺酮光谱行为的差异,在310nm处测定吸收度,检查肾上腺素中肾上腺酮的限量.,规定：A310nm0.05,2. 方法,例2: 地蒽酚中二羟基蒽醌的检查,二羟基蒽醌为地蒽酚合成工艺中的原料及氧化分解产物.二羟基蒽醌在 432nm波长处有最大吸收,而地蒽酚没有.供试液浓度: 0.01%A 432nm: 0.12二羟基蒽醌限量: 2.0%,