药物分析绪论讲稿.doc

1、药物分析讲稿：绪 论 12013-02-25 18:14:08 来源： 评论：0 点击：43绪 论药物分析的性质与任务 药物分析学是一门研究药品及其制剂的组成、理化性质、真伪鉴别、纯度检查及其有效成分的含量测定等内容的一门学科。药物分析学科是整个药学科学领域中一个重要的组成部分，目的是为. 绪 论 药物分析的性质与任务药物分析学是一门研究药品及其制剂的组成、理化性质、真伪鉴别、纯度检查及其有效成分的含量测定等内容的一门学科。药物分析学科是整个药学科学领域中一个重要的组成部分，目的是为了保证人们用药安全、合理、有效，提高药品质量，促进药品生产发展的正常化。规范化，为合理使用国家资源作出应有的贡献

2、。药品质量的全面控制是一项涉及多方面，多学科的综合性工作，他既要与生产单位紧密配合，积极控制药物生产过程的质量，从而发现问题、促进生产、提高质量；也要与供应管理部门密切协作，注意考察药物贮存过程的质量，以便进一步研究。改进药物的稳定性，采取科学合理的管理条件与方法，以保证和提高药物的质量。药物分析的基本任务主要有两方面：一是运用化学、物理化学或其他有关化学的方法和技术来研究化学结构已经明确的合成药物或天然药物及其制剂的质量问题，其中至少包括：药物成品的化学检验工作；药物生产过程的质量控制；药物贮存过程的质量考察。二是临床药物分析工作，其中包括：运用适当的分离分析方法，测定药物制剂的生物利用度以

3、及动力学数据；研究药物的作用特性和机制；分析药物进人体内，吸收、分布、代谢、消除等动力学过程。判断药品质量的依据应该遵循国家规定的药品质量标准（国家药典、部颁标准、地方标准）。 药典和药品质量标准（一）、中国药典基本知识1.中国药典的沿革中华人民共和国药典简称中国药典，用英文表示则为 chinese Pharmacopoeia，其后以括号注明是哪一年版，如中国药典（2000 年版）。1953 年批准并由卫生部发行了中国药典（1953 年版）。于 1957 年出版了中国药典（1953 年版）第一增补本。 1963 年，经国务院批准，出版了中国药典（ 1963 年版）。分一、二两部，各有凡例和有关

4、的附录。1979 年 10 月 4 日，卫生部颁布中国药典（1977 年版），并于 1980 年 1 月 1 日起执行。1977 年版药典分一、二两部。1985 年，中国药典（1985 年版）于 9 月出版，1986 年 4 月起执行。这版药典分一、二两部。1987 年 11 月出版中国药典（1985 年版）增补本，新增品种 23 种。1988 年正式出版了中国药典（1985 年版）英文版，同年还出版了二部注释选编。 1990 年 12 月 3 日，卫生部颁布了中国药典（1990 年版），并自 1991 年 7 月 1 日起执行。这版药典分一、二两部，并对药品的名称作了适当的修订。把作用与用途

5、”和“用法与用量”分别改为“ 类别”和“剂量” 。另外编著了中华人民共和国药典临床用药须知一书，有关品种的红外光谱图谱收入药品红外光谱集另行出版。1994 年卫生部批准颁布中国药典（ 1995 年版），并自 1996 年 4月 1 日执行。这版药典仍分一、二两部。二部药品外文名称改用英文名，取消拉丁名；中文名称只收载药品法定通用名称，不再列副名。编制了药品红外光谱集增补本续编。 还于 1992 年、1993 年先后编制出版了中国药典（1990 年版）第一、第二增补本，二部注释和一部注释选编，中药彩色图集和中药薄层彩色图集以及药名词汇等标准方面的丛书。中国药典（2000 年版）已经颁布执行。这版

6、药典仍分一、二两部。本版药典在品种上作了较大的增加和修订。其中增加和修订品种最多的是抗生素类和生化及生测药品。二部附录新增了毛细管电泳法、热分析法和 X-射线粉末衍射法这三种仪器分析方法。除此之外还增加了粒度测定法，渗透压摩尔浓度测定法，片剂脆碎度检查法，制药用水，药品质量标准分析方法验证，药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则，药物稳定性试验指导原则，缓释、控释制剂指导原则，微囊、微球与脂质体制剂指导原则。与此同时，药典还修定了高效液相色谱法、相对密度测定法、pH 值测定法、水分测定法、溶液颜色检查法、注射液中不溶性微粒检查法、结晶性检查法及崩解时限检查法。至此，我国已经先后出版了七

7、版药典和若干种药品的部颁标准。2.中国药典的基本结构和内容药典的内容一般分为凡例、正文、附录和索引四部分。中国药典（2000 年版）附有中文索引，以便于使用者检索。3.中国药典（2000 年版）采用的计量单位、符号与专业术语（1）中国药典（2000 年版）的法定计量单位和符号 长度 米 m 分米 dm 厘米 cm 毫米 mm 微米 m 纳米 nm体积 升 L 毫升 ml 微升 l质（重）量 千克 kg 克 g 毫克 mg 微克 g 纳克 ng压力 帕 Pa 千帕 kPa 兆帕 MPa动力粘度 帕秒 Pas运动粘度 平方毫米每秒 mm2/s波数 厘米的倒数 cm-1密度 千克每立方米 kg/m3

8、 千克每立方厘米 g/cm3放射性活度 千兆贝可 GBq 兆贝可 MBq（2）专业术语溶解度溶解度是药品的一种物理性质，是指药品在溶剂中的溶解能力。药典中的溶解度是指在各品种项下选用的溶剂中的溶解性能。药品的近似溶解度以下列名词表示：极易溶解 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂不到 1ml 中溶解；易溶 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂 1不到 10ml 中溶解；溶解 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂 10不到 30ml 中溶解；略溶 系指溶质（1g 或 im1）能在溶剂 30不到 100ml 中溶解；微溶 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂 100不到 1000ml 中溶解；极微

9、溶解 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂 1000不到 10000ml 中溶解；几乎不溶或不溶 系指溶质（1g 或 1m1）能在溶剂 10000ml 中不能完全溶解。温度：以摄氏度（）表示： 水浴温度 除另有规定外，均指 98100 ；热水 系指 7080；微温或温水 系指 4050；室温 系指 1030；冷水 系指 2 10；冰浴 系指 0 ；放冷 系指放冷至室温。百分比（% ）百分比用“表示，系指重量的比例；但溶液的百分比除另有规定外系指溶液 100 ml中含有溶质若干克；乙醇的百分比系指在 20时容量的比例。此外，根据需要可采用下列符号： （gg） 表示溶液 100 种含有溶质若干克；

10、（mlml） 表示溶液 1006 中含有溶质若干毫升；（mlg） 表示溶液 1009 中含有溶质若干毫升；（gm1） 表示溶液 100ml 中含有溶质若干克。溶液的滴 液体的滴系指在 20时，1.0ml 水相当于 20 滴。溶液后记示的“ （110）”等符号 药筛和粉未粗细 药筛 药典所用的药筛，选用国家标准的 R403 系列，分等。 粉末粗细 滴定液和试液的浓度本版药典使用的滴定液和试液的浓度，以 molL（摩尔/升）表示。 贮藏项下的规定，系对药品贮存与保管的基本要求，以下列名词表示：遮光 系指用不透光的容器包装，例如棕色容器或黑纸包裹的无色透明、半透明容器；密闭 系指将容器密闭，以防止尘

11、土及异物进入；密封 系指将容器密封以防止风化、吸潮、挥发或异物进入；熔封或严封系 指将容器熔封或用适宜的材料严封，以防止空气与水分的侵入并防止污染；阴凉处 系指不超过 20；凉暗处 系指避光并不超过 20t ：冷处 系指 210。3.标准品、对照品与试药的区别及其选用原则标准品： 系指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位（或 g）计，以国际标准品进行标定。对照品： 系指在用于检测时，除另有规定外，均按干燥品（或无水物）进行计算后使用的标准物质。试药： 系指不同等级的符合国家标准或国家有关规定标准的化学试剂。选用原则：标准品、对照品系指用于鉴别、检查、含量测定的标

12、准物质。标准品与对照品（不包括色谱用的内标物质）均由国家药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。标准品与对照品的建立或变更其原有活性成分和含量，应与原标准品、对照品或国际标准品进行对比，并经过协同标定和一定的工作程序进行技术审定。标准品与对照品均应附有使用说明书，质量要求（包括水分等）、使用效期和装量等。在检测时，除效价测定采用“标准品” 、以及某些检查或含量测定应采用 “对照品”外，其他可用化学试剂取代的，应尽量避免使用标准品或对照品。4.取样量的准确度、试验精密度及限度数值要求（1） .取样量的准确度、试验精密度“ 称取”或“量取”的精密度试验中的供试品与试液等“称重” 或“量取”的量

13、，均以阿拉伯数码表示，其精确度可根据数值的有效数位来确定。如称取“01g”，系指称取重量可为 006014g；称取“2g”，系指称取重量应准确至所取重量可为 15 25g；称取“20g”，系指称取重量可为1952 05g；称取“200g”，系指称取重量可为 1 9952005g。规定“精密称定”时，系指称取重量应准确至所取重量的千分之一；规定“称定”时，系指称取重量应准确至所取重量的百分之一；规定精密量取时，系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密度要求；规定“量取” 时，系指可用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具；取用量为“约” 若干时，系指取用量不得超过规定量的 10%。

14、恒重恒重系指供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在 03mg 以下的重量。干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥 1h 后进行；炽灼至恒重的第二次的称重应在继续炽灼 30min 后进行。“ 按干燥品计算” 的概念试验中规定“按干燥品（或无水物，或无溶剂）计算”时，除另有规定外，应取未经干燥（或未去水、或未去溶剂）的供试品进行试验，并将计算中的取用量按检查项下测得的干燥失重（或水分、或溶剂）扣除。空白试验试验中的“空白试验” ，系指在不加供试品或以等量溶剂替代供试液的情况下，按同法操作所得的结果；含量测定中的“并将滴定的结果用空白试验校正” ，系指按供试品所耗滴定液的毫升数与空

15、白试验中所耗滴定液毫升数之差进行计算。（二） 、 几种常用外国药典内容和特点1.英国药典英国药典 （British pharmacopoeia，缩写为 BP） ，目前版本为 1998 年版，本书缩写为 BP（ 1998） ，一般版与版之间逐年出版补遗，如 BP I988 Addendum l989。英国药典有悠久的历史，从 1618 年开始编写，当时为伦敦药典 ，以后又有爱丁堡药典和爱尔兰药典 ， 1864 年合为英国药典 。1968 年第十一版以前，在英国医学委员会指导下编辑出版， 1973 年交由卫生-社会安全部管辖。基本结构：正文每一个品种项下首先为结构式、分子式与分子量、化学名称与含量

16、限度，然后是性状、溶解度、鉴别、检查、含量测定、贮藏、作用与用途，最后为用量。其中有品种采用欧洲药典标准。编排格式：英国药典在正文前有前言、引言和凡例。通则插在正文里面；所以附录部分就没有制剂通则了，附录部分第一项则为试液、试药与标准对照品，以后才是各种检验法和测定法，最后为原子量表与度衡表及索引。2.美国药典美国药典 （The pharmacopoeia of the united states of America） ，简称 USP。由美国药典会编辑出版，最新的是 1999 年的第 24 版（即 USP） 。美国药典每 5 年修订一次。发展历史：美国药典已有 170 多年的历史。1820

17、年 12 月 15 日，在波士顿发行了第一部美国药典（USP） 。 1888 年第一部国家处方集（NF）正式出版。1961 年，美国药典委员会开始编制美国采用药名 （USAN ） ，除 FDA 不定期公布的药品名称外， 联邦食品，药品与化妆品法规规定选用的药品通用名称应以 UsAN 为准。1971 年，USP 与 NF 合并，1980 年出版了第一部 USP 一 NF 合订本。在 1980 年，美国药典委员会首次出版了美国药典药品信息 （USP DI）一书，使美国药典会的工作范围从药学界发展到与医学界紧密联系的领域。基本结构 :美国药典的每一个品种项下，首先是结构式、分子式与分子量、化学名称，

18、然后是类别、常用量、规格、性状、溶解度、贮藏、鉴别、检查，最后是含量测定。编排格式：名单，前言，历史概况及有关药典的法案和决议，品种分类表，品种增删表，凡例等。正文后面有制剂通则和一般检验测定方法、试药和试液、药品溶解度表、原子量表、分子式和分子量表、乙醇比重表、温度换算表、度量衡表、最后为索引、正文各品种分为两大类，一类为治疗用的药品，另一类是供制剂用的药品，各按英文字母顺序排列。但英语的习惯把剂型名称放在后面，这一点是和拉丁文不同的。3.日本药局方日本药局方简称 JP，目前为 13 版，即 JP（13） 。日本药局方的历史也较悠久， 1886 年出版第一版，至今已有一百余年，共出版了 13

19、版，原定 10 年改版一次，近几版已改为 5 年左右改版一次。 基本结构：每一个品种项下首先是日文名称，有用汉字写的，也有用假名写的，也有假名里面夹汉字的，其次是拉丁名、结构式、分子式与分子量，然后是性状、鉴别、检查、含量测定、贮藏、有效期，最后为常用量和极量。编排格式：日本药局方分为二部，合订为一册。一部主要收载无机药品、有机药品、抗生素、放射性药品以及各种制剂；二部主要收载生药、生物制品、调剂用的附加剂等。编排次序为：通知，目次，沿革略记，前言，一部，二部，原子量表，日本名索引，拉丁名索引。一部中有通则（相当于凡例） ，制剂通则，医药品各条，一般试验法，标准品，试药和试液，当量液，比色液，

20、计量仪器，灭菌法；二部有生药总则，医药品条。 三、 药品检验工作的基本程序（一） 、药品检验工作程序：取样、鉴别、检查、含量测定、写出报告。1取样：分析任何药品首先是取样，要从大量的样品中取出少量的样品进行分析，应考虑取样的科学性。真实性与代表性，不然就失去了检验的意义。据此，取样的基本原则就是均匀、合理。2鉴别鉴别就是依据药物的的化学结构和理化性质进行某些化学反应，测定某些理化常数或光谱特征，来判断药物及其制剂的真伪。通常，某一项鉴别试验，如官能团反应。焰色反应等，只能表示药物的某一特征，绝不能将其作为判断的唯一依据，3检查药物在不影响疗效及人体健康的原则下，是可以允许微量的杂质存在的；但其

21、量必须在药品标准规定之内。通常按照药品质量标准规定的项目进行“限度检查“ ，就是判断药物的纯度是否符合标准的限量规定要求，所以也可称为纯度检查。4含量测定通过上述检验合格后，可进行含量测定。含量测定就是测定药物中有效成分的含量。一般采用化学分析或理化分析方法来测定，以确定药物的含量是否符合药品标准的规定要求。总的来说，鉴别是用来判断药物的真伪，而检查和含量测定则用来判定药物的优劣。药物的内在质量应综合外观、理化常数、鉴别、检查和含量测定等多种要素来进行考察。5记录及报告记录：要求完整。无缺页损角；内容必须真实、简明、具体；宜用钢笔或特种圆珠笔书写；字迹清晰。色调一致，一般不得涂改。记录的内容应

22、包括供试品的名称、批号、规格、数量、供试品来源（取样或送样部门或单位） 、取样方法、外观性状、包装情况、检验目的、检验项目、检验方法与依据、取样日期或收到日期、报告日期、检验中观察到的现象、检验数据（有计算式） 、结果、结论及处理意见、检验者签名或盖章、复核者签名或盖章等。报告：要求完整，无缺页损角，字迹清晰，色调一致；并应注意文字简洁，意思全面。报告一般包括的内容和顺序如下：供试品名称、批号、规格、数量、来源、外观性状、包装情况、检验目的、检验项目、检验依据、取样日期或收到日期、报告日期、检验结果（书写顺序为鉴别、检查、含量测定） 、结论（或判定） 。检验报告是对药品质量检验结果的证明书，结

23、论必须明确、肯定、有依据。检验报告上必须有检验者。复核者及部门负责人签名或盖章，签名或盖章应写全名，否则该报告书无效。（二） 、 药品质量标准分析方法验证药品质量标准分析方法验证的目的是证明采用的方法适合于相应的检测要求。需验证的分析项目有：鉴别试验、杂质定量或限度检查、原料药或制剂中有效成分含量测定以及制剂中其他成分（如降解产物、防腐剂等）的测定。药品溶出度、释放度等功能检查中，其溶出量等测试方法也应作必要的验证。验证内容有：准确度、精密度（包括重复性，中间精密度和重现性） 、专属性、检测限、定量限、线性范围和耐用性。1准确度：指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般以百分回收率

24、表示，准确度应在规定的范围内建立。精密度：指在规定的条件下，同一个均匀样品，经过多次取样测定所得结果之间的接近程度。一般，精密度用偏差、标准偏差或相对标准偏差（变异系数）来表示。在相同条件下，由一个分析人员测定所得结果的精密度称为重复性；在同一个实验室，不同时间由不同分析人员用不同设备测定结果的精密度，称为中间精密度；在不同实验室，不同分析人员测定结果的精密度，称为重现性。3专属性：指在其他成分（如杂质、降解产物、辅料等）可能存在的情况下，采用的方法能准确测定出被测物的特性，能反映该分析方法在有共存物时对供试物准确而专属的测定能力。检测限：指试样中被测物能被检测出的最低量，是一种限度试验的参数

25、，用以表示测量方法在所述条件下对样品中供试物的最低检出浓度，无需定量测定，只需指出高于或低于该规定浓度即可，常用百分数、ppm 或 ppb 表示。定量限：指样品中被测物能被定量测定的最低量，其测定结果应具一定准确度和精密度。进行杂质和降解产物定量测定方法研究时，应确定定量限。他与上述检测限的不同在于：定量限规定的最低测得浓度应该符合一定的精密度和准确度的要求。定量限也往往用百分数、ppm 或 ppb 表示。线性：指在设计的范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比关系的程度。换句话说，就是供试物浓度（或质量）的变化与试验结果（或测得的响应信号）成线性关系。范围： 指能达到一定精密度。准确度和

26、线性的条件下，测试方法适用的高低限浓度或量的区间。范围应根据分析方法的具体应用和线性、准确度、精密度结果和要求确定。原料药和制剂含量测定，范围应为测试浓度的 80120%；制剂含量均匀度检查，范围应为测试浓度的 70 130，根据剂型特点，如气雾剂、喷雾剂，范围可适当放宽。耐用性：指在测定条件稍有变动时，测定结果不受影响的承受程度，为常规检验提供依据。耐用性表示工作与环境的变化对分析方法没有多大影响，是衡量实验室和工作人员之间在正常情况下试验结果重视性的尺度。（三）、药品质量标准制定的原则和基本内容药品质量标准制定的内容名称 性状（性状项下记述药品的外观、臭、味和一般的稳定性情况，溶解度以及物

27、理常数等。）鉴别 杂质检查含量测定或效价测定（凡用理化方法测定药含量，按有效物质的质量计算的称“含量测定 ”。凡以生物学方法或生化方法测定生理活性物质，并按效价单位计算的，称“效价测定 ”。）生物检定法（利用药物对生物体或其离体器官组织等所起的药理作用来检定药物效价的方法，称为生物检定法。用于成分复杂且又来源于生物体的药物。）类别、剂量、注意 贮藏 制剂 药物的鉴别试验 鉴别的项目（一）性状外观、色、味、嗅、溶解度以及物理常数、药物特有的物理性质。（二）一般鉴别试验以药物的化学结构及物理化学性质为依据，通过化学反应来鉴别药物真伪。一般鉴别试验仅适用于单一的化学的药物，如为数种化学药物的混合物或

28、有干扰物质存在时（除另有规定外），应不适用。一般鉴别试验只能证实是某一类药物，而不能证实是哪一种药物。想证实被鉴别的物质到底是哪一种药物，必须在一般鉴别试验的基础上，再进行专属鉴别试验，方可确认。如：药典附录官能团鉴别中丙二酰脲类、托烷类生物碱；金属盐类 K、Na、Ag；无机酸类 Cl、SO 42-、SO 32-。1.化学鉴别法 干法：a 焰色 Na-黄色 K-紫色b 分解（气味） NH4HCO3-NH3湿法（溶液中）：颜色、沉淀、气体、荧光等2.光谱鉴别法 紫外 a 标准品对照法b 规定吸收波长法c 规定吸收波长和相应的吸收度法d 规定吸收波长和吸收系数法e 规定吸收波长法和吸收度比值法红外

29、 a 标准图谱对照法 ChP、BPb 对照品法 USP3.色谱鉴别法 GC TLC HPLC PC （三）专属鉴别试验证实某一种药物的依据，根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性的不同选用某些特有的灵敏定性反应。如：苯甲酸钠 A FeCl3 反应 在中性溶液中生成碱式苯甲酸铁盐赫色沉淀，加稀盐酸，沉淀分解，生成游离苯甲酸白色沉淀。B 分解反应 在浓硫酸加热条件下，使不炭化，有白色升华物（苯甲酸）mp.121-123.C 光谱法 ChP IR UV：max min E1%1cm二、鉴别的试验条件（一）溶液的浓度样品浓度不能太小，也不能忽视所用试剂的浓度，根据所选方法而定。（二）溶液

30、的温度按要求控制。如：重氮化- 低温，色谱-柱温（三）溶液的酸碱度使各反应物有足够的浓度处于反应活化状态.如:Ag+Cl-AgCl HNO3 酸性,使反应生成物处于稳定和易于观测的状态.（四）干扰成分的存在选择专属性更高的反应消除或分离.如:制剂-阴性试验（五）试验时间有机反应慢,需时间长。如：色谱法- 保留时间，调整，使分离度1.5 ，完全分离。三、鉴别试验的灵敏度（一）反应灵敏度和空白试验灵敏度：在一定条件下，能在尽可能稀的溶液中观测出尽可能少的供试品，反应对这一要求所能满足色程度，即称为反应的灵敏度（sensitivity）。它有两个相关的量，即最低检出量（质量）和最低检出浓度。二者之间

31、的公式：m=10 6v/G空白试验：在与供试品鉴别试验完全相同的条件下，除不加供试品外，其它试剂同样假如进行的试验。（二）提高反应灵敏度的方法1.加入与水不相溶的有机溶剂浓集有色生成物于有机溶剂中，易于观测。2.改进观测方法目视-分光光度法；生成沉淀 -比较浊度第二章 药物的杂质检查一、杂质和杂质限量检查（一）、概述 药物的纯度：是指药物纯净的程度。 在药品质量标准中，杂质的检查收载在药物的“检查” 项下，药物的纯度主要由“检查” 项来控制。药物的性状、理化常数、杂质检查、含量测定等作为一个有联系的整体来评价药物的纯度。 杂质的来源 一是在生产过程中引人；二是在贮藏过程中产生。在合成药的生产过

32、程中，未反应完的原料、反应的中间体和副产物，会成为产品中的杂质。此外，还有残留的有机溶剂、试剂以及由器具引人的无机杂质等。植物中提取的与药物结构、性质相近的物质，提取分离不完全，这些物质便可能引人药物中。制成制剂的过程中，也可能产生新的杂质。 药品在贮藏过程中，受外界条件的影响，可能发生水解、氧化、分解、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化，使药物中产生新的杂质。 药物中的杂质按来源分类，可分为一般杂质和特殊杂质。一般杂质 是指在自然界中分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引人的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。特殊杂质 是指在个别药物的生产和贮藏过程中引人的杂

33、质。药物中的杂质按其性质还可以分为信号杂质（也称一般杂质）和有害杂质。信号杂质 一般无害，但其含量的多少可以反映出药物的纯度水平，氯化物、硫酸盐等就属于信号杂质。有害杂质 如重金属、砷盐、氰化物等，对人体有毒害，所以在质量标准中要加以严格控制，以保证用药的安全。杂质限量 药物中所含杂质的最大允许量，叫做杂质限量。 杂质的限量通常用百分之几或百万分之几来表示，药物中杂质的限量可按照下式来计算：杂质限量 = 杂质最大允许量供试品量100 杂质限量 =标准溶液的浓度标准溶液的体积供试品量 100或 Lc*V S100%（二）、检查规则1. 遵循平行操作原则。 包括仪器的配对性及供试管与对照管同步操作

34、。2. 正确取样及供试品的称量范围（ 1 克以下+2% ，1 克以上+ 1%）。3. 正确的比浊、比色方法。4. 检查结果不符合规定或在限度边缘时，应对供试品和对照品各复查二份。二、一般杂质的检查方法 （一）、氯化物检查法 通过对氯化物的控制，可同时控制与氯化物结合的一些阳离子以及某些同时生成的副产物。因此氯化物的控制，对其它杂质的控制亦具有特殊的意义，可从氯化物的检查结果显示药品的纯度，间接考核生产、贮藏过程是否正常，因而氯化物又被认为是一种“指示性杂质”。氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银的白色浑浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银浑浊液比较，以判断供试品中

35、的氯化物是否超过了限量。 以上检查方法中使用的标准氯化钠溶液每 1ml 相当于 10g 的 Cl-。在测定条件下，氯化物浓度以 50ml 中含 5080g 的 Cl-为宜。 条件：硝酸酸性溶液中进行。观察前应在暗处放置 5min。检查有机氯杂质，需破坏结构后方能检查。如为氯代脂烃，可在碱性溶液中加热使水解，使有机氯杂质水解成氯化钠，再依法检查。如杂质中氯连接于芳环上，则需采用氧瓶燃烧法进行有机破坏，使氯转化为 Cl-后再检查。注意：1.供试液稀释后，再加 AgNO3 试液，避免在较大氯化物浓度下产生沉淀，不易分散，影响比浊；缓慢摇匀，过快则生成的混浊减少；暗处放置 5min，避免光线直射引起

36、AgCl分解。2.检测灵敏度为 1gCl-/ml，以 50ml 中含 5080g 的 Cl-为宜，所显混浊梯度明显，应以此计算供试品取样量范围。3.温度对产生 AgCl 的混浊有影响。以 30-40产生的浊度最大，结果也稳定。但作为限量检查，供试管与对照管在平行条件下操作，故可在室温下进行。4.供试品溶液如不澄明，可用含 HNO3 的水溶液（1-100）洗净滤纸中的氯化物后过滤。5.供试品如有色，药典规定用内消法处理。外消法：加入某种试剂，使供试液褪色后再检查。6.供试液显碱性，应先中和为中性后再依法检查。避免 AgNO3 在碱性条件下生成AgOH、Ag 2O。7.干扰物的排除（1）碘中 Cl

37、-检查本品加水研磨后的滤液中加还原剂锌粉或亚硫酸，使 I2 还原为无色的 I-，再加氨试液与 AgNO3 试液。AgI 不溶于氨试液中，而氯化物此时生成可溶性的银氨配离子，滤除 AgI，滤液加 HNO3，析出 AgCl 混浊与标准比较即得。（2）碘化物中 Cl-的检查先加浓 H2O2 溶液和 H3PO4，将 I-氧化为 I2，加热煮沸，使 I2 挥发后再依法检查。（3）溴化物中 Cl-的检查溴化物在氨试液中能与 Ag+生成银氨配离子Ag(NH 4) Br，不能用（1）法排除。供试品加 HNO3、浓 H2O2，加热，使 Br-氧化为 Br2 挥去。Cl -/Cl 的氧化电位高，Cl -不能被氧化

38、为Cl2，溶液澄明后，准确稀释至一定体积，取出适量，再依法检查。8.溶于水的有机药物直接依法检查。不溶于水的有机药物可采用加水振摇，使所含氯化物溶解，滤除不溶物或加热溶解供试品，放冷后析出沉淀，滤过，取滤液依法检查。溶于稀乙醇或丙酮的有机药物，可加稀乙醇或丙酮溶解后依法检查。9.有机药物中的有机氯杂质的检查，需根据有机药物的结构选择适宜的有机破坏方法，使有机氯转变为无机氯后，再依法检查。（二）、硫酸盐检查法SO42-与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的浑浊比较，以判断药物中硫酸盐是否超过限量。标准硫酸钾溶液每 1ml 相当于 01mg 的 S

39、O42-，本法适宜比浊的浓度范围为每 50ml溶液中含 0105mg 的 SO42-。溶液加盐酸使成酸性，可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀的生成。(三)、铁盐检查法硫氰酸盐法 其原理为铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸胺生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后所显的颜色进行比较。Fe3+6SCN - Fe（SCN） 6 3-条件：在盐酸酸性条件下反应，可防止 Fe3+ 的水解。加入氧化剂过硫酸铵氧化供试品中的 Fe2+成 Fe3+ ，同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。本法用硫酸铁铵 FeNH4（SO4） 212H2O配制标准铁溶液，并加入硫酸防止铁盐水解，使易于保存。标准铁溶液

40、每 1ml 相当于 10g 的 Fe。本法以在 50ml 溶液中，含1050gFe 3+为宜。某些有机药物，特别是具环状结构的有机药物，在实验条件下不溶解或对检查有干扰，需经炽的破坏，使铁盐成三氧化二铁留于残渣中，处理后再依法检查。如盐酸普鲁卡因、泛影酸、羟丙纤维素等。(四)、重金属检查法重金属系指在实验条件下能与 S2-作用显色的金属杂质，如银、铅、汞、铜、镉、锡、锑、铋等，重金属影响药物的稳定性与安全性。由于生产中遇到 Pb 的机会多，又易在体内蓄积中毒，检查时以铅为代表。第一法 又称硫代乙酰胺法适用：在实验条件下供试液澄清、无色，对检查无干扰或经处理后对检查无干扰的药物。硫代乙酰胺在弱酸

41、性（pH3.5）条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混悬液。CH3CSNH2 十 H2O CH3CONH2 十 H2S H2SPb 2+ PbS十 2H+(1)本法用醋酸盐缓冲液（pH3.5）控制溶液 pH 值 3 3.5，硫化铅沉淀的较完全，若酸度增大，重金属离子与硫化氢呈色变浅，酸度太大时甚至不显色。(2)本法的适宜目视比色范围为每 27ml 溶液中含 1020g 的 Pb2+。(3)供试品有色 :对照管用稀焦糖调色.对照管仍用供试液, 但必须除去 Pb2+.(4)供试品中若有微量高铁盐存在,在弱酸性溶液中氧化 H2S 析出 S,干扰检查, 可在供试管与对照

42、管中分别加入维生素 C 或盐酸羟胺(0.5-1.0g),使 Fe3+还原为 Fe2+,再依法检查.(5)供试品本身为 Fe3+如枸橼酸铁铵中铅盐的检查,可利用 Fe3+在比重 1.103-1.105 的盐酸(9mlHCl 加水 6ml)中成为 HFeCl62-,用乙醚提取除去,加氨试液呈碱性, 再加 KCN 掩蔽残存的Fe3+,用 NaS 作显色剂-见第三法.(6)若供试品含杂环或为芳环结构及不溶于水、稀酸、乙醇的有机药物，用第二法。如：苯佐卡因、甲硝唑等。（7）不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的药物，用第三法。（8）含量低的，可用第四法。第二法 是将供试品炽灼破坏后检查或取炽灼残渣项下遗留的残渣

43、进行检查的方法。适用：在水、乙醇中难溶或能与重金属离子形成配位化合物而干扰检查的有机药物。蒸干后残渣加盐酸使重金属成为氯化物，以氨试液调至对酚酞指示液显中性，加醋酸盐缓冲液（pH3.5 ） 微热溶解后，再依法检查。第三法 是取规定量的供试品，加氢氧化钠试液 5ml 和水 20ml 使溶解后，加 NaS5 滴试液再与一定量标准铅溶液经同样处理后的颜色进行比较。适用：难溶于稀酸但能溶解于碱性水溶液的一些有机药物（如磺胺类、巴比妥类）。第四法 铅斑法 又称微孔滤膜法 通过微孔滤膜过滤，使试验条件下生成的硫化铅沉淀富集于滤膜上，形成铅斑，比较供试溶液和对照溶液铅斑的颜色，来判断供试品中的重金属是否超过

44、限量。过程同第一法，硫代乙酰胺改用 1ml，显色时间延长为 10min。适用：含 25g 重金属杂质的检查，因重金属限量低时，用纳氏比色管难以观察比较，改用微孔滤膜法，提高了检查的灵敏度。(五)、砷盐检查法1.古蔡法古蔡法检查砷盐的原理为：金属锌与酸作用产生新生态的氢，氢与药物中微量砷盐反应，生成具挥发性的砷化氢气体，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液在同样条件下生成的砷斑比较，来判定药物中砷盐的含量。其反应式如下：AsO33- 3Zn 9H+ AsH3 3Zn2+ 3H2OAsH3 十 2HgBr2 2HBrAsH(HgBr) 2（黄色）AsH3 十 3HgBr2 3HBr

45、As(HgBr) 3（棕色）氯化亚锡的作用：与碘化钾将供试品中存在 As5+还原为 As3+加快反应的进行。还可抑制锑化氢的生成，因锑化氢也能与溴化汞试纸作用生成锑斑，抑制微量锑的干扰。氯化亚锡又可于锌作用，在锌粒表面形成锌锡齐，起去极化作用，从而使氢气均匀而连续地发生。锌粒及供试品中可能含有少量硫化物，在酸性液中能产生硫化氢气体，与溴化汞作用生成硫化汞的色斑，干扰试验结果，故用醋酸铅棉花 60mg 填充 60-80mm 吸收硫化氢。由于砷斑的颜色不够稳定，在反应中应保持干燥及避光，反应完毕后，立即与标准砷斑比较。注意： 能溶解于水，且不干扰检查的药物，直接依法检查。多数环状结构或不溶于水的有

46、机药物，因砷在分子中可能以共价键形式存在，要先进行有机破坏，使砷离子释放。常用的有机破坏方法有碱破坏法和酸破坏法，中国药典（2000年版）采用碱破坏法，即于供试品中加氢氧化钙（石灰法）或无水碳酸钠（不能用石灰法破坏完全，如苯甲酸钠），先小火灼烧使炭化，再于 500600 炽灼至完全灰化。些药物采用 KBr-Br2 溶液。如葡萄糖。含锑药物（如葡萄糖酸锑钠）用古蔡法检查砷时，锑盐也可被还原为锑化氢，与溴化汞试纸作用，产生灰色锑斑，干扰试验结果。采用白田道夫法。SbH3 十 HgBr2 HBrSbH 2(HgBr)（灰色）白田道夫法 原理为氯化亚锡在盐酸酸性条件下能将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一

47、定量标准砷溶液用同法处理后的颜色进行比较，即可判断供试品的含砷量。2As3+ 十 3SnCl2 十 6HCl 2As十 3SnCl4 十 6H+灵敏度 20gAs2O3/10ml，加入少量二氯化汞能提高反映灵敏度，达 2gAs2O3/10ml。讨论：氢气发生的速度过缓或过于剧烈，都将影响砷化氢的逸出速度，使砷斑的色泽和清晰程度受到影响，氢气的发生速度与溶液的酸度、锌粒的粒度与用量以及反应温度等有关。药典：2mol/L 盐酸、水、KI2.5%、SnCl 20.3%,加入试液后在室温下放置 10min，再加锌粒（通过 1 号筛） 2g，立即密塞导气管，水浴 25-40，45 分钟。所用锌粒应无砷，

48、粒度较大时，用量酌情增加，反应时间延长为 1 小时。溴化汞试纸与砷化氢作用较氯化汞试纸灵敏，其灵敏度为 1g（以 As2O3 计），但所呈砷斑不稳定，反应中应保持干燥及避光，反应后立即比色。滤纸质量对溴化汞试纸有影响，不可用定性滤纸，应采用质地疏松的定量滤纸制作，所得砷斑色调鲜明，梯度规律。应用镊子取用溴化汞试纸，不可用手接触生成砷斑部分。供试品为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，在酸性溶液中生成 H2S 或 SO2，与溴化汞作用生成黑色硫化汞或金属汞，干扰比色。应先加硝酸处理，使氧化成无干扰的硫酸盐，过量的硝酸及产生的氮的氧化物应蒸干除尽。供试品为铁盐，不仅消耗还原剂，影响测定条件，且能氧化砷