1、大鼠交配确定妊娠(1)合笼比例雌雄比为 1:2;交配的适宜比例为雄雌比 1:(23) ,每个笼子里 5 只雌鼠,然后选择 2只雄鼠与之交配,雄雌比为 2:5。(2)晚 6 点合笼早 8 点之前检查;大鼠排卵发生在发情后 810h,大多在夜间进行交配,并发情多在夜间。排卵多是自发的,但强壮的雄鼠能强迫雌鼠在非发情期接受交配。查阅文献发现大多采用晚上合笼,第二天早晨检查来确定妊娠;也有一些采用 1:1 长期合笼,随时观察阴栓来确定妊娠。考虑到笼子和工作量及频繁阴道涂片对雌鼠有一定的刺激作用的问题还是采用前者;但有研究发现,雌雄鼠同笼饲养时雄鼠可能会对雌鼠的发情周期产生影响,诱发雌鼠进入发情期、提高
2、交配后受孕的成功率,因此同笼饲养的时间越长越有利于交配成功。有资料:查精子最佳时间是早晨 6-8 点,所以应尽量在 8 点之前检查。(3)通过观察阴栓法和阴道涂片检查精子法来确定妊娠;由于大鼠的阴栓容易脱落,采用观察阴栓+阴道涂片检查精子法来确定妊娠。合笼后第二天晨起首先观察阴栓,若发现阴栓记为 GD0;若无阴栓者进行阴道涂片,发现精子记为 GD0,若未发现精子继续合笼观察。交配过的雌鼠阴阴唇常肿大和充血。观察阴栓法:在合笼后次日清晨检查阴栓, 以左手拇指和食指捏住鼠尾, 将其放在鼠笼盖上, 当鼠前爪抓住铁丝时, 提起尾巴观察是否有阴栓,以确定是否进行交配。但大鼠的阴栓容易脱落,一般不易观察到。发现阴栓记为GD0,依此类推。阴道涂片检查精子法:从笼中取出雌鼠,左手固定,右手将内含 0.05-1ml 生理盐水的滴管(管尖用火烧光滑)轻轻插入阴道,再将盐水注入阴道内并随机将阴道灌洗液吸回。将灌洗液滴于显微镜载玻片上,并立即在镜下检查有无精子。阴道有精子的雌鼠其阴唇常肿大和充血。镜下精子既可能成片存在,或整个涂片仅数个精子。发现精子记为 GD0,依此类推。 或显微镜涂片法: 将载玻片上滴 2 滴生理盐水, 用细棉棒蘸温生理盐水插入雌鼠阴道内, 旋转 1 圈取出, 涂于滴有生理盐水的载玻片上, 于光学显微镜下观察。