1、HE 染色操作流程HE 染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学最常用的染色方法,在质量较佳的 HE染色切片上,各种组织或细胞的一般形态结特点都可以观察到。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。试剂材料1.试剂:0.5%醇溶性伊红染液,改良的哈瑞( Harris)苏木素,0.5%盐酸酒精溶液1.1 伊红:配制方法:中性红 0.5g,80%酒精 100ml,将伊红溶于酒精内搅拌,全部溶解后即可使用。1.2 苏木精:配制方法:A 液: 苏木素 1g,无水酒精 10mlB 液: 硫酸铝钾 20g,蒸馏水 200ml两液
2、分别溶解后混合,加热煮沸后,慢慢加入红色氧化汞 0.5g,此时有大量气泡产生,故容器要大,以防液体溢出,然后将染液迅速冷却,冷却后过滤,并每 100ml 加入冰醋酸6ml,甘油 10ml。1.3 0.7%盐酸酒精溶液配制方法:盐酸 0.7ml,70%酒精 100ml2.材料:石蜡切片操作流程1.将石蜡切片置于烘箱中 60烤 12h;2.石蜡切片常规二甲苯,乙醇脱蜡至水,3.苏木素染 10 分钟,4.流水冲洗,去余色,5.0.7%盐酸乙醇分化数秒钟,6.流水冲洗,切片变蓝约 15 分钟,7.95%乙醇 30 秒钟,8.酒精性伊红染 30 秒,9.I 95%乙醇 30 秒钟,10.II 95%乙醇
3、 30 秒钟,11.I 100%乙醇 30 秒钟,12.II100%乙醇 30 秒钟,13.石碳酸二甲苯 30 秒钟, (1: 4 石碳酸 1-二甲苯 4)14.I 二甲苯 30 秒钟,15.II 二甲苯 30 秒钟,16.中性树胶封片。实验结果:镜下观察细胞核呈蓝色;细胞浆一般呈红色;胶原纤维呈不同程度的红色,红细胞呈亮红色;粘蛋白呈浅蓝色;钙化组织呈深蓝色等。实验中所需试剂的生产商,货号及产地:试剂名称 生产商 货号 产地中性红 国药 71028144 中国苏木精 国药 71020784 中国盐酸 国药 10011018 中国无水乙醇 国药 10009218 中国硫酸铝钾 国药 10001060 中国