1、无菌验证方案罐号：编码：批准人：会签人：一、验证目的: 验证罐体设备无菌情况；二、验证要求:1、必须针对整个设备系统的严密性进行检查；2、采用培养基模拟试验进行无菌验证；三、质量标准1、设备系统方面没有跑、冒、滴、漏；2、培养基模拟试验运行连续两批处于无菌状态；三、验证方法（一）系统严密性检查：罐体、管线采用压缩空气（压力约 0.12-0.15MPa）保压；用肥皂水喷淋焊点、接点，确认焊点、接点有无渗漏。（二）培养基模拟试验：若试验失败则重新进行罐体、管道清洁、消毒后进行培养基试验。第一次采用无菌培养基，第二次采用 Q10 种子培养基（配方减半）1、工艺控制点罐型号及用途 罐号温度（）罐压（M
2、Pa）空气流量（m 3/hr）投料体积（L）备注1 m3 种子罐 QZ01 .QZ02 32-34 0.04-0.05 30 500 开搅拌1 m3S 罐 QS01-QS03 32-34 0.04-0.05 30 500 开搅拌4m3 种子罐 A101-B104 32-34 0.04-0.05 120 2000 开搅拌30 m3 种子罐 A201-B206 32-34 0.04-0.05 900 15000 开搅拌136 m3 补料罐 A401-A403 32-34 0.04-0.05阀门开70%60000开搅拌136 m3 发酵罐 A301-A315 32-34 0.04-0.05阀门开70
3、%60000开搅拌2.培养基配方序号 代号 配比（ %） 用量（Kg） 备注1 蛋白胨 0.42 盐 0.43 消沫剂 0.054 葡萄糖 0.35 轻质碳酸钙 0.36 玉米浆 1序号 代号 配比（% ） 用量（Kg） 备注1 P14 0.42 P18 0.333 P20 0.1254 P03 0.15 P05 0.16 P15 0.057 P11 0.0258 P13 0.0259 P16 0.02510 P17 0.0511 P07 0.00512 P08 0.001513 P09 0.000514 P19 0.033、无菌监控方法：每 4 小时取样一次；肉汤直接从罐上取样；平板在超净工
4、作台上进行无菌操作取样；实样镜检采用美兰染色方法。4、运行方式：单罐批运行 60h 以上无菌正常视为罐体无菌试验成功。.四、时间进度表2007 年 11 月 11 日开始；五、组织实施部门生产部发酵车间组织实施；具体：维修组负责设备方面的维护；消毒组负责罐体方面的打压试漏、空气过滤器的灭菌、培养基的灭菌；值班组负责工艺参数的控制；种子组负责取样以及无菌检测、监控；工艺组负责结果的判定；统计员负责验证原始材料的整理、汇总；化验组负责离线参数的检测。无菌验证报告一、 验证项目名称：发酵设备无菌验证；二、 验证对象：微生物发酵培养罐、补料罐；三、 验证日期：2007 年 12 月 5 日四、 验证人
5、员：生产部发酵车间全体员工。五、 验证结果：1、验证方案实施情况：主要陈述验证方案规定的各项指标或指标的误差范围的事项情况。2、数据综述：综述试验过程中所得到的各项关键性数据。一般情况下原始记录不包括在报告中，但可附在验证报告之后，或存档于验证资料档案中。3、偏差情况分析：验证过程中的特殊情况或异常情况应在报告中加以说明。4、图表：必要的图表有利分析评价。六、最终结果1、通过打压试漏，罐体、管线没有跑、冒、滴、漏。2、通过培养基模拟试验，连续两批在规定的时间内没有染菌。（在准备验证报告时，必须按照验证方案的内容进行审查与核对。具体有以下几点：（1）校对验证是否按规定方法和步骤进行；（2）验证过程对原方案有无修改；（3）若对验证方案有修改，是否按规定程序办理批准手续；（4）验证记录是否完整；（5）验证结果是否符合原定合格标准；（6）如有偏差或因故无法进行的试验，是否进行分析及合理的解释，并经批准。 ）验证报告应由起草人签名，并注明日期。
