1、實驗六、光合色素的色層分析與定量光合作用是利用地球上維持能量流轉與物質循環的重要作用之一，透過光合作用綠色植物利用光能，在葉綠體內將二氧化碳、水、及無機物合成有機養分，葉綠體內的可吸收光能，以利光合作用的進行，葉綠體內的色素主要由葉綠素及胡蘿蔔素所構成，其中葉綠素 a 為主要色素，而葉綠素 b、葉黃素、胡蘿蔔素是補助吸收光能傳遞給葉綠素 a，稱為輔助色素。一、實驗目的：本實驗一共分成兩個部分:A、濾紙色層分析法：利用濾紙色層分析方法分離及檢定光合作用色素的種類B、葉綠素吸收光譜：利用丙酮萃取法萃取葉呂素病測定葉綠素吸收光譜以及定量葉片中葉綠素總量以及葉綠素 a 葉綠素 b 類蘿蔔素二、實驗原理
2、：A、濾紙色層分析法：生物學家以及生化學家藉由分離、分析分子的技術，來對蛋白質、脂質、及植物色素作深入的瞭解，然而，分析這些分子最重要的技術之一就是色層分析，它是依據分子對親水性的固定相與厭水性的移動相來將分子分開。濾紙的色層分析是色層分析法中最簡單的一種，也已經被廣泛的利用，它是利用溶劑對不同溶質得分配能力之差異性原理，以分離各種物質。 （混合物對固定相和移動相的親合力不同，造成分離效果） 其移動相與固定相均為液體，移動相為一種或數種混合的有機溶劑（極性） ，固定像為附著再多孔濾紙上的水（非極性） ，利用物質在兩相間產生不同比例的分配性質。物質依其個別的分配係數停留在固定的位置物質與一動像所
3、行的距離稱為 Rf 值Rf（濾紙上物質移動的距離）（濾紙上移動相移動的距離）Rf 值的應用：單一化合物以同樣的層析法分離時必有其特定的 Rf 值，所以，鑑得一些未知的化合物時，將測得的 Rf 值和標準的 Rf 值作對照比較，即可初步確定此化合物。B、葉綠素吸收光譜：根據 Arnon 於 1949、1956 年的報導，利用公式算出每單位葉片中各種葉綠素的含量。本次用到的公式葉綠素 a（mg） 【12.7（D663）2.69（D645） 】【V（1000W） 】葉綠素 b（mg） 【22.9（D663）4.68（D645） 】【V（1000W） 】葉綠素總量（mg） 【20.2（D645）+8.0
4、2（D663） 】【V（1000W） 】三、實驗材料：A、濾紙色層分析： B、葉綠素吸收光譜：長條厚濾紙 一張 新鮮菠菜葉 1g80丙酮 30mL 80丙酮 100mL石油醚 10mL 研缽 1 套烘乾波菜葉 1g 濾紙 數張量筒 1 支 錐形瓶 1 個毛細管 1 支 光電比色計 1 台研缽 1 套 光電比色管 1 支膠帶 拭鏡紙 數張紗布四、實驗結果：五、問題與討論：1. 各組做出來的 Rf 值是否相同？理論上，相同條件下相同的物質所做出來的應該是相同的，但是，因為認何一項實驗都多多少少會存在著實驗誤差而 Rf 值又會因為有機溶劑的差異有所不同，所以，各組的或許會相同也或許存在著誤差。2. 若適用新鮮菠菜葉進行濾紙色分析，實驗結果是否相同？不會，烘乾的菠菜葉已經失去了水分，當然也會減少光合作用的繼續進行然，然而，新鮮的菠菜葉是水分較充足的，這樣一來，兩個的基本差異就會造成實驗結果的不同。3. 還有哪些材料可以用來同時抽取四種色素？基本來說，幾乎所有的植物都會具有這四種植物色素，所以都可以進行。4. 老葉與新葉中葉綠素含量是否有不同？是，因為老葉的先陳代謝會較新葉遲緩，所以，葉綠素含量會有所差異。學號：94110038姓名：許婉婷組別：第十組
