1、厚德树人 笃学致用,答辩人：徐刚红 班 级：2008级生物系（3）班 学 号：08410803037 指导老师：李小霞,苏铁叶枯病病原菌分子鉴定,一、选题的目的及意义 二、研究材料与内容 三、结果与分析 四、讨论,一、选题的目的及意义,苏铁（Cycas revoluta） 属于苏铁纲，苏铁属（Cycas） 又名铁树，辟火蕉，凤尾草，凤尾松。常绿木本植物，茎干粗壮，常不分枝。在福建、广东、江苏、浙江、贵州及华北各省等地都有栽培，是优美的观赏树种。苏铁茎及种子含有丰富的淀粉，可供食用和药用。苏铁叶枯病是一种常见病害，发病率很高，常发生在植株的叶片上。对植株的危害很大，轻者使叶片干枯，重者会导致植株
2、整株死亡。通过本实验在形态学鉴定的基础上进行了分子生物学的鉴定，拟对苏铁叶枯病的防治提供一些帮助和参考。,二、研究材料与内容,1.研究材料通过形态学鉴定初步认定为苏铁拟茎点霉的病原菌 2.研究内容对苏铁拟茎点霉病原菌，用CTAB法进行DNA的提取，然后进行rDNA-ITS序列分析,三、结果与分析,1.病害症状,图1 铁树叶枯病的自然发病症状,2. ITS区段的PCR扩增：,供试菌株ITS扩增产物电泳图谱,500bp,GCGCCCAGGCGCACCCAGAAACCCTTTGTGAACTTATACCTTACTGTTGCCTCGGCGCATGCCGGCCCCCCTGGGGGCCCCTCCTTCTGG
3、AGGAGCAGGCACGCCGGCGGCCAACCTAACTCTTGTTTTTACACTGAAACTCTGAGAATAAAACATAAATGAATCAAAACTTTCAACAACGGATCTCTTGGTTCTGGCATCGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATAAGTAATGTGAATTGCAGAATTCAGTGAATCATCGAATCTTTGAACGCACATTGCGCCCTCTGGTATTCCGGAGGGCATGCCTGTTCGAGCGTCATTTCAACCCTCAAGCCTGGCTTGGTGATGGGGCACTGCCTGTAAAAAGGCAAGCCCTGAAATTCATTGG
4、CGAGCTCGCCAGGACCCCCAGCGCACTAATTAAACCCTCGCTTTGTAAGGACCGGGCGGGGCCCTGCCGGTAAACCCCCAACTTCCGAAAATTTGACCTCGGATCAAGTAGGAATACCCACTGAACTTAATCATATC苏铁拟茎点霉rDNA-ITS的序列,四、讨论,本实验通过对已纯化的苏铁叶枯病病原菌进行病分子鉴定（病原菌DNA的提取及rDNA-ITS序列的分析），确定导致遵义市动物园苏铁叶枯病的病原菌为苏铁拟茎点霉（Phomopsis cycadis），症状主要表现为感病叶片发黄、干枯、形状不规则，病部与健部交界处呈砖红色线纹，严重时可致整株叶片发黄、烧焦状、干枯死亡。,感谢各位老师的指导！,
