1、中国测序论坛 miRNA测序概述及实验分析流程一 、 microRNA测 序概 述MicroRNAs（ miRNAs）是 在真 核生 物中 发现 的一 类内 源性 的具 有调 控功 能的 非编 码 RNA，其 大小 长约 2025个核 苷酸 。 成熟的 miRNAs是由 较长 的初 级转 录物 经过 一系 列核 酸酶 的剪 切加 工而 产生 的， 随后 组装 进 RNA诱导 的沉 默复 合体 ，通 过碱 基互补 配对 的方 式识 别靶 mRNA， 并根 据互 补程 度的 不同 指导 沉默 复合 体降 解靶 mRNA或者 阻遏 靶 mRNA的翻 译 。 最近 的研 究表 miRNA参与 各种 各
2、样 的调 节途 径， 包括 发育 、病 毒防 御、 造血 过程 、器 官形 成、 细胞 增殖 和凋 亡、 脂肪 代谢 等等 。microRNA(miRNA)是一 种大 小 约 21 23个碱 基的 单链 小分 子 RNA， 是由 具有 发夹 结构 的 约 70 90个碱 基大 小的 单 链 RNA前体 经过 Dicer酶加 工后 生成 ， 不同 于 siRNA（ 双链 ） 但是 和 siRNA密切 相关 。 microRNA通过 和靶 基因 mRNA碱基 配对 引导沉 默复 合体 （ RISC）降 解 mRNA或抑 制 mRNA的翻 译， 从而 在转 录后 水平 调控 蛋白 表达 （最 新发
3、现 microRNA也能 在转录水 平调 控基 因表 达 ） 。 microRNA在物 种进 化中 相当 保守 ， 在动 物 、 植物 和真 菌等 中发 现的 microRNA表达 均有 严格 的组 织特异 性和 时序 性。 microRNA在细 胞生 长和 发育 过程 中起 多种 作用 ，包 括调 控发 育、 分化 、凋 亡和 增殖 等。目前 研究 microRNA的方 法主 要是 realtime-PCR、 生物 芯片 技术 以及 第二 代测 序技 术 。 基于 第二 代测 序技 术的 microRNA测序 ， 可以 一次 获得 数百 万条 microRNA序列 ， 能够 快速 鉴定 出不
4、 同组 织 、 不同 发育 阶段 、 不同 疾病 状态 下已 知和 未知 的 micoRNA及其 表达 差异 ，为 研究 microRNA对细 胞进 程的 作用 及其 生物 学影 响提 供了 有力 工具 。中国测序论坛 二、 microRNA测序技术特点1.高灵 敏度 ：理 论上 可以 检测 单个 细胞 中一 个拷 贝的 microRNA；2.高精 度： 可以 检测 microRNA单个 碱基 的差 异；3.不受 先验 信息 的干 扰， 既能 鉴定 已知 microRNA，又 有能 力发 现新 的 microRNA；4.保留 定向 信息 ，用 于链 特异 的表 达分 析；5.利用 Barcode在单 次运 行中 经济 地分 析多 个样 品。三、 miRNA测序实验技术路线中国测序论坛 四、 microRNA测序数据分析技术路线中国测序论坛 五、 microRNA测序数据可研究的方面1.差异表达的 microRNA基因，2.可做分型的 microRNA基因，用于诊断疾病3.新的 microRNA发现4.（欢迎补充。）来源于： htp:/
