1、TEV Protease产品概述TEV Protease (烟草蚀纹病毒蛋白酶；Tobacco etch virus protease) 是来源于烟草蚀纹病毒(TEV) Nla 的重组蛋白酶，此蛋白酶被用来切除纯化后融合蛋白的亲和标签。TEV 蛋白酶具有很强的位点特异性，能够识别EXXYXQ(G/S)的七氨基酸序列(Glu-Asn-Leu- Tyr-Phe- Gln-Gly)，最普通的是 ENLYFQG，其切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸或丝氨酸之间。该酶在 PH 5.5-8.5和 4-30的广泛范围内皆有活性，使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而修改。该酶带有 His-sumo Tag经 6H
2、is标签纯化，剪切反应完毕后可通过 Ni-NTA（产品货号：PAN001）去除。本蛋白酶来源于大肠杆菌重组表达。酶活性单位定义在 1X TEV Buffer (50 mM Tris-HCl, pH8.0, 0.5 mMEDTA, 1mM DTT) 中，30条件下反应 1 小时，能够切割 3 g 的反应底物达 85%以上所需的酶量定义为一个活性单位。产品溶液组分TEV protease储存液 10X Cleavage Buffer25 mM Tris-HCl，pH 8.0 500 mM Tris-HCl，pH 8.0150 mM NaCl 5 mM EDTA1 mM EDTA 10 mM DTT
3、5 mM DTT50%（V / V）Glycerin推荐反应体系反应物组成 体积融合蛋白 50 gTEV Protease 2 l（10 U/l）10X TEV Buffer 10 lddH2O 至 100 l不同温度下的参考反应时间：1. 4反应 16 小时2. 20反应 6 小时3. 30反应 2 小时活性测试待测融合蛋白 100g，加入 TEV protease 2l，4反应 16 小时，取酶切前后样品 SDS-PAGE检测，如右图所示 90% 融合蛋白被切割。储存条件长期储存于-80，可保存 2 年；或小量分装后保存于-20，可保存 6 个月，避免反复冻融。10X TEV Buffer 置于-20保存。包装规格货号 规格RPP002-100 100 URPP002-500 500 URPP002-2000 2000 U
