1、文件编号：ZYJYK-MZ-002 兰州军区兰州总医院 门诊检验指导书规程编写：张 艳生效日期：20100101主题内容 AB0 血型鉴定标准操作规程第 1 页 共 5 页AB0 血型鉴定标准操作规程1.AB0 血型鉴定原理常用盐水凝集法检测红细胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗体，依据抗原抗体存在的情况判定血型。常规的方法有：正向定型：用已知抗体的标准血清检查红细胞上未知的抗原。反向定型：用已知血型的标准红细胞检查血清中未知的抗体。结果判定：凡红细胞出现凝集者为阳性，呈散在游离状态为阴性。2.鉴定方法 （1）生理盐水凝集法:玻片法：操作简单，适于大量标本检查，但反应时间长；被检查者如
2、血清抗体效价低，则不易引起红细胞凝集，因此，不适于反向定型。试管法：由于离心作用可加速凝集反应，故反应时间短，而且，借助于离心力可以使红细胞接触紧密，促进凝集作用，适于急诊检查。 红细胞亚型抗原性弱，如抗 A 抗 B 标准血清效价低时，易造成漏检或误定。如加用 O 型（抗 A、B）血清和反向定型，可避免此类错误。 文件编号：ZYJYK-MZ-002 兰州军区兰州总医院 门诊检验指导书规程编写：张 艳生效日期：20100101主题内容 AB0 血型鉴定标准操作规程第 2 页 共 5 页玻片法凝集结果判断：红细胞呈均匀分布，无凝集颗粒，镜下红细胞分散。在低倍镜下凝集程度强弱判断标准：呈一片或几片凝
3、块，仅有少数单个游离红细胞为（+） 。呈数个大颗粒状凝块，有少数单个游离红细胞为（+） 。数个小凝集颗粒和一部分微细凝集颗粒，游离红细胞约占 12 为（+） 。肉眼可见无数细沙状小凝集颗粒。于镜下观察，每凝集团中有58 个以上红细胞凝集为（+） 。可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多的游离红细胞（） 。可见极少数红细胞凝集，而大多数红细胞仍呈分散分布为混合凝集外观。镜下未见细胞凝集，红细胞均匀分布为（-） 。 （2）凝胶微柱法：是红细胞抗原与相应抗体在凝胶微柱介质中发生凝集反应的免疫学方法。血型抗体为单克隆抗体，加入试剂、标本，用专用离心机离心后可直接用肉眼观察结果或用血型仪分析。此法操作标准
4、化，定量加样，确保结果准确性。 3.抗 A、抗 B 和抗 AB 标准血清标准 准血清均采自健康人，并应符合下述条件：特异性：只能与相应的红细胞抗原发生凝集，无非特异性凝集。效价：我国标准抗 A 和抗 B 血清效价均在 1：128 以上。文件编号：ZYJYK-MZ-002 兰州军区兰州总医院 门诊检验指导书规程编写：张 艳生效日期：20100101主题内容 AB0 血型鉴定标准操作规程第 3 页 共 5 页亲和力：我国标准要求抗 A 对 A1、A2 及 A2B 发生反应开始出现凝集的时间分别是 15s、30s 和 45s；抗 B 对 B 型红细胞开始出现凝集的时间为 15s。凝集强度为 3min
5、 时，凝块不小于 1mm2。冷凝集素效价：在 1：4 以下。无菌。灭活补体。 4.血型鉴定操作时注意事项 所用器材必须干燥清洁、防止溶血，凝集和溶血的意义一样。为避免交叉污染，建议使用一次性器材。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，用毕后应尽快放回冰箱保存。加试剂顺序：一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清。虽然 IgM 抗 A 和抗 B 与相应红细胞的反应温度以 4最强，医学教育网收集整理但为了防止冷凝集现象干扰，一般在室温2024内进行试验，而 37条件，可使反应减弱。幼儿红细胞抗原未发育完全、老年体弱者抗原性较弱，最好采用试管法鉴定血型。玻片法反应时间不能少于
6、10min，否则较弱凝集不能出现，造成假阴性。正、反定型结果一致才可发报告。文件编号：ZYJYK-MZ-002 兰州军区兰州总医院 门诊检验指导书规程编写：张 艳生效日期：20100101主题内容 AB0 血型鉴定标准操作规程第 4 页 共 5 页反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，长期大量应用免疫抑制，血型抗体可减弱或消失；血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难；新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体，且自身血型抗体效价又低，因而出生 6 个月以内的婴儿不宜做反定型。老年人血清中抗体水平大幅度下降或被检者血清中缺乏抗 A 及（或）抗 B 抗体，可引起假阴性或血型鉴定错误。 文件编号：ZYJYK-MZ-002 兰州军区兰州总医院 门诊检验指导书规程编写：张 艳生效日期：20100101主题内容 AB0 血型鉴定标准操作规程第 5 页 共 5 页
