1、离子通道概论 钙拮抗药 General discussion of ion channels & calcium antagonists,第一节 离子通道概论,Patch-clamp技术,新药开发,Na+,Ca2+,K+,Cl-等电流,分子生物学技术,单细胞电流记录,离子通道的结构与功能,药物作用机制,基因克隆及蛋白表达,通道蛋白功能测定,Patch-clamp(膜片钳)技术,探头,计算机,模数转换,膜片钳放大器,样品池,单细胞,K+,Ca2+,Na+,+,+,-,电极,电极,-,-,激活态（activation）：外界因素作用下，通道允许某种或某些离子顺浓度差和电位差通过膜，相当于开放。 失
2、活态（inactivation）：通道关闭，同时即使有外来刺激也不能使之进入开放状态。 关闭态（静息态）：,离子通道分类,离子通道按激活方式分类 电压门控离子通道 voltage gated channels,VGC 化学门控离子通道 ligand gated channels,LGC 离子通道按离子选择性分类 钠通道（sodium channels） 钙通道（calcium channels） 钾通道（potassium channels） 氯通道（chloride channels）,钠通道 钙通道电压门控钙通道：L,N,T,P,Q,R型；配体调控性钙通道：IP3Rs钙通道,RyRs钙通道
3、 钾通道电压依赖性钾通道：Ikr,Iks, Ito, If等；钙依赖性钾通道：BKCa,IKCa,SKCa等；内向整流钾通道：KATP,KAch,IK1等； 氯通道-氨基丁酸受体（GABA-R),离子通道分类,钠通道 (sodium channels),功能 选择性允许钠离子Na+跨膜通过的离子通道。 电压门控，维持细胞膜兴奋性和传导。在心脏神经和骨骼肌，快钠通道激活和钠离子内流引起动作电位的0相除极。 特征 电压门控，INa 激活1ms和失活10ms速度快 分类： 神经类（对河豚毒素TTX敏感） 骨骼肌类（对芋螺毒素CTX敏感） 心肌类（均不敏感）,钙通道（calcium channels）
4、,心肌细胞,为细胞外Ca2+ 内流通道，调节细胞内Ca2+ 浓度 电压门控钙通道： L型( DHPs，维拉帕米敏感的钙通道）：外钙内流，分布于各种兴奋细胞，是心肌动作电位2相平台期形成的主要离子流。 T型：分布于心脏、神经，调节心脏自律性。 N型； P型；Q型；R型。,钙通道（calcium channels）,受体门控钙通道： 位于肌质网和内质网膜上，是储钙释放进入胞浆的途径。IP3或者Ca2+激活。 名词解释*： Ca2+诱发Ca2+释放（以Ca2+释Ca2+ ） 当细胞膜去极化时，电压门控钙通道开放，钙内流使细胞内钙突然增加而触发钙释放，从而引起细胞兴奋收缩偶联等生理活动这一过程被称为。
5、触发细胞兴奋收缩偶联，心肌收缩和心脏节律调节， T淋巴细胞激活等 Ryanodine受体(RyRs)激活的Ca2+通道（骨骼肌、心肌、平滑肌、脑、内分泌等） IP3受体激活的Ca2+通道（心脏收缩和节律）,心肌细胞AP复极3期,胺碘酮,钾通道（potassium channels）,一、电压依赖性钾通道 1. 延迟整流钾通道(delayed rectifier K+ channels)，外向电流Ik, 与膜复极化有关。慢激活整流钾通道 ( Iks )快激活整流钾通道(Ikr),钾通道（potassium channels）,一、电压依赖性钾通道 2. 瞬时外向钾通道 ( transient o
6、utward K+ channels，Ito) 参与动作电位1期的复极过程，去极化明显时激活。 3. 起搏电流 ( pacemaker channels, If ) 非特异性阳离子电流， K+、 Na+ 。是窦房节、房室节、和希浦系统的起搏电流之一，超极化激活。+ 起搏电流 ( If ) - Adr Ach心率,钾通道（potassium channels）,二、钙依赖性钾通道(Ca2+ dependent K+ channels ) ： IKCa、 除极化和提高Ca2+浓度使之开放 K+外流 膜复极化和超极化 血管扩张; 参与血管张力的负反馈调节调节。,钾通道（potassium chann
7、els）,三、 整流钾通道: （1）KIR 通道：存在于心肌细胞（心室、心房、普肯耶细胞Pf），主要维持4相静息电位。 （2） KATP 通道： 心肌缺血、缺氧、ATP减少时开放 K+外流 APD缩短 心肌收缩性 耗氧保护心肌；引起缺血性心律失常。 血管平滑肌-开放超极化Ca2+内流血管扩张 开放剂：克罗卡林、二氮嗪； 阻滞剂：格列苯脲、D860 （3）Ach激活的钾通道（K Ach ）: 心房、窦房结、房室结；Ach+M2-R 通道开放RP超极化负性频率作用。,离子通道的生理功能,决定兴奋细胞的兴奋性、不应性和传导性 钠钙钾通道和神经肌肉等细胞形成动作电位、传递信号，调节机能活动相关。 介导
8、兴奋收缩耦联、兴奋分泌耦联 钙通道调节心肌骨胳肌收缩和腺体分泌等生理功能 调节血管平滑肌的舒缩 钙钾氯通道调节血管平滑肌舒缩 参与细胞跨膜信号转导 神经末梢释放递质突出前后膜的去极化或超极化 维持细胞形态功能完整 调节细胞内外渗透压,电压敏感氯通道：1、2、3型 Na+-k+-2Cl 转运系统（利尿药） GABA受体氯通道（镇静催眠药）,氯通道（chloride channels）,VGC 的分子结构及钠、钙和钾通道共性,Primary functional domains: P loop: ion selectivity S4: voltage dependence,Na+,Ca2+,N,C
9、,s1-s6,s1-s6,s1-s6,s1-s6,VGC 的分子结构及钠、钙和钾通道共性,1. S4 电压感受器感受膜电位变化和通道激活开放2. S5 - S6之间肽链形成孔道或P区（pore region）；S5S6及其相邻S片段连接的肽链与通道失活有关。3. 孔道和S6片断内侧或外侧有药物结合位点,第二节 作用于离子通道的药物,一、作用于钠通道的药物钠通道阻滞药局麻药、抗癫痫药、类抗心律失常药 二、作用于钾通道的药物和作用及其应用1.钾通道阻滞药（PCBs）： 阻滞KATP 磺酰脲类- 降低血糖； 阻滞IK 索他洛尔 延长APD抗心律失常2.钾通道开放药（PCOs）： KATP，促钾外流苯
10、并吡喃类：克罗卡林 吡啶类：尼可地尔；嘧啶类：米诺地尔 氰胍类：吡那地尔；苯并噻二嗪类：二氮嗪 硫代甲酰胺类 1，4二氰吡啶类 扩张血管-高血压、心绞痛、心梗、CHF等,第三节 钙通道阻滞药,一 钙通道阻滞药的类型 二 钙通道阻滞药的作用方式 三 钙通道阻滞药的药理作用和临床应用,心脏工作肌收缩,窦房结、房室结 （起搏、传导）,动静脉（冠状、肺、外周）收缩,骨骼肌收缩,肥大细胞组胺释放,腺体分泌,释溶酶体酶,血小板聚集、收缩、胞排,神经细胞递质释放,Ca2+,受体调控性钙通道（receptor operated calcium channel, ROC） 电压依赖性钙通道 L-,T-,N-,P
11、-,Q-,R-（voltage dependent calcium channel, VDC）心血管系统以L-及T-型钙通道为主,钙通道的类型,（一） 选择性钙拮抗药 1 苯烷胺类 （phenylalkylamines,PAA）维拉帕米（verapamil,ver）,加洛帕米，噻帕米2 二氢吡啶类（dihydropyridines,DHP）硝苯地平（nifedipine，nif）,氨氯地平，尼莫地平3 苯并噻氮卓类（benzothiazepines，BTZs） 地尔硫卓(diltiazem，dil)（二） 非选择性钙拮抗药4 二苯哌嗪类 桂利嗪,氟桂利嗪5 普尼拉明类 普尼拉明6 其它类 派克
12、昔林,钙拮抗药的分类,开放时间 较久 较短暂 激活电位 -10mv -70mv 失活电位 -60mv-10mv -100mv60mv 主要分布 心肌 动脉血管血管平滑肌 心脏传导系统 （窦房结）,L-型钙通道 T-型钙通道,（long-lasting） (transient),二 对钙通道的作用方式,失活态,PAA,DHP,钙通道阻滞药的作用方式,亲水性的维拉帕米和地尔硫卓与激活或失活通道结合，降低通道的开放概率。疏水性的硝苯地平与失活状态的通道结合延长恢复活性时间。 维拉帕米和开放状态的通道的内侧结合有频率依赖性和使用依赖性。抗心律失常。 硝苯地平与钙通道外侧结合，抑制失活通道，有电压依赖性
13、，适用于病变血管的扩张。,1. 药理作用 2. 临床应用 3. 作用机制,三 钙拮抗药的作用与临床应用,（一）对心肌的作用 直接抑制作用 间接兴奋作用 1 负性肌力作用 反射性兴奋交感神经2 负性频率作用3 负性传导作用 4 对缺血心肌的保护作用 5 逆转心室肥厚 氨氯地平，nif,药理作用,（二）血管 扩张动脉 扩张冠状动脉，治疗心绞痛扩张外周动脉，解除痉挛扩张脑动脉，增加脑血流,药理作用,（三） 其他平滑肌的作用松弛支气管平滑肌明显减少组胺释放和LTD4的合成减少支气管粘膜分泌较大剂量 松驰胃肠，子宫，输尿管平滑肌,药理作用,（四）改善组织血流的作用1 抑制血小板聚集2 降低钙内流减轻钙超
14、载对红细胞的损伤。,药理作用,（五）其他作用抗动脉粥样硬化作用（氨氯地平） 阻滞L-型钙通道，减少钙超载对动脉壁的损伤。 降低脂质过氧化，保护内皮。 抑制血管壁平滑肌增生及基质蛋白合成，增加顺应性。 降低细胞内胆固醇水平。,药理作用,（一） 心血管系统疾病1 高血压 nif, dil, ver2 心绞痛 稳定性心绞痛 nif, dil, ver 不稳定型心绞痛 dil, ver, nif不宜单用 变异型心绞痛 nif首选药,临床应用,3 心律失常 室上性心律失常 ver, dil 阵发性室上性心动过速 （ver 首选药） 心房颤动，心房扑动机制： 阻滞房室结钙内流，使房室结传导减慢，ERP延长
15、 后除极和触发活动导致的心律失常。,临床应用,4 肥厚性心肌病 ver， 氨氯地平5 慢性心功能不全（CHF） 氨氯地平 （二） 脑血管疾病 尼莫地平，氟桂嗪 （三） 其他雷诺病 （nif，尼莫地平）支气管哮喘 急性胃肠痉挛性腹痛,临床应用,三种重要钙拮抗药 硝苯地平（nifedipine, nif） 维拉帕米（verapamil, ver） 地尔硫卓（diltiazem） 三药的体内过程特点 三药的药理作用和临床应用 三药的不良反应,常用钙拮抗药,1 PO吸收快而完全，首关消除明显，生物利用度较低，血浆蛋白结合率高。维持时间 3-5小时2 主要在肝脏代谢 nif 无活性代谢产物ver,dil
16、 有活性代谢产物3 肾，消化道排泄,三药的体内过程特点,药理作用 1 扩张血管 扩张外周血管 + + + 扩张冠状血管 + + + 2 心脏 直接抑制作用 较弱 强 较强 间接兴奋作用 较强 较弱 较弱 心率 0，加快 减慢 减慢 心肌收缩力 0，增加 明显减弱 减弱 房室结传导 0 明显减慢 减慢 房室结 ERP 0 延长 延长 抗血小板聚集抑制血管平滑肌增生,三药的药理作用及临床应用nif ver dil,nif ver dil临床应用 高血压 室上性心律失常 心绞痛 心绞痛外周血管 高血压痉挛性疾病 肥厚性心肌病,三药的不良反应1 一般反应 头痛，面红，眩晕，恶心，心悸 nif 便秘 v
17、er 心动过缓 ver,dil 踝部水肿 下肢水肿 nifverdil,2 严重心血管反应 严重心绞痛或急性心肌梗死 nif 心功能不全 ver，dil 室性心动过速而猝死 血压剧降,1 起效慢，可减轻由扩张血管所致的反射性心率加快， 头痛，面红等症状。 2 PO 吸收良好，生物利用度高。t1/2 36h 3 血药浓度的峰谷波动小 4 促进缓激肽中介的NO的产生 5 防止或逆转心肌肥厚 抗TNF-及 抗IL作用 应用 高血压 心绞痛 CHF,氨氯地平 （amlodipine）,尼莫地平（nimodipine） 桂利嗪（cinnarizine） 氟桂利嗪（flunarizine）,其他钙拮抗剂,
