1、动物细胞培养,姜松祥 江苏省如皋市丁堰中学,问题讨论,烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?,取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植,动物细胞培养,请同学们阅读课本后,简述动物细胞培养的基本过程?,动物细胞培养,思考题,1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗?,、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗?,、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢?,、如何将动物组织分散成单个的细胞呢?,、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?,没有,是,成块的组织细胞靠在一起,
2、彼此限制了细胞的生长和增殖,先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理,胰蛋白酶水解蛋白质,细胞间的成份是蛋白质,思考题,、细胞膜的主要成份是什么?,、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗?,、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉,那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢?,、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么?,、动物细胞培养取材时,一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官,请解释原因?,蛋白质和磷脂,能,注意时间的控制,不能,因为两的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近,胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛,思考题,11、动物细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒?,12、培养瓶中的细胞培养到
3、什么时候就不再分裂、增殖?,13、如此时细胞数量并未达到人们的需求,应该怎样办?,易于培养细胞贴壁,进行生长增殖,当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞分裂就会停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。,将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后继续增殖。,这样的过程叫做传代培养,思考题,14、如何理解原代培养和传代培养?,15、传代培养的细胞能一直传代下去吗?,16、有些为何能一直传下去吗?,17、动物细胞培养就是为了得到这些细胞吗?,18、人类一般保存的是哪类细胞呢?为什么?,上述过程中,在第一培养瓶中培养就是原代培养,之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养,不都能,发生突变,朝着癌细胞方向发展,不
4、是,保存10代以内的细胞,因为1050部分细胞的细胞核型可能发生变化,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,胰蛋白酶,单个细胞,加培养液,制成,细胞悬浮液,原代培养,动物细胞培养,细胞增殖,部分细胞无限传代,去掉组织间蛋白,动物细胞培养不能 最终培养成生物体,传代培养,请总结出动物细胞培养的定义,动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。,思考题,多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢?,无菌、无毒,全部的营养物质,适宜的温度和PH值,必要的气体条件,动物细胞培养条件:,1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液) 2、营养 (葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。) 3、温度和PH36.5+(-)0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境:O2和CO2(95%空气和5% CO2 ),保证细胞顺利的生长增殖,获得细胞,细胞的全能性,植物体,培养结果,或细胞产物,快速繁殖、培育无病毒植株等,培养目的,葡萄糖、动物血清,蔗糖、植物激素,培养基特有成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物细胞和动物细胞培养的比较,细胞群体,请举出动物细胞培养应用的实例,