1、请同学们在课本P32页上找出： 1.细胞融合的概念 2.诱导动物细胞融合的方法 3.意义 并用笔画出来,2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体,2.动物细胞融合过程：,诱导,细胞膜穿通,细胞膜融合,细胞核融合，形成单核杂种细胞,动物细胞融合,杂种细胞,愈伤组织,杂种植株,植物细胞A,植物细胞B,原生质体A,原生质体B,植物体细胞杂交,去壁,原生质体融合,植物组织培养,物理法,化学法,生物法： 灭活的病毒,常用方法,4、原理,膜的流动性,5、最有价值的应用,制备单克隆抗体,3、过程,不同DNA的两个细胞,灭活的病毒,PEG,杂交细胞,细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核,主要用于制备,单克隆抗体
2、,获得杂种植株,用途,物理、化学方法,（同左）,灭活的病毒,物理（离心、振荡、电激）,化学（聚乙二醇）,诱导方法,使细胞分散后诱,导细胞融合,去除细胞壁后诱,导原生质体融合,细胞融合的方法,膜的流动性,膜的流动性、,植物细胞全能性,原理,动物细胞融合,植物体细胞杂交,比较项目,、植物、动物细胞融合的比较,1.能使动物细胞融合的特有的诱导方法是 A离心 B灭活的病毒 C电刺激 D振动,B,2.动物细胞融合的目的中最重要的是 A克服远源杂交不亲和 B制备单克隆抗体 C培育新物种 D生产杂种细胞,B,原始的方法获得抗体，特异性差，纯度低。 想获得单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，通过克隆形
3、成细胞群。 问题：体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增值的，如何使单个淋巴细胞增殖呢？,单克隆抗体的制备,设计方案：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖,杂种细胞,1、单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,诱导其融合的方法有哪些？,（1）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？,思考：,因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领，所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞，能够在体外大量繁殖，并且产生特定的单克隆抗体。,（2）单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞 工
4、程技术手段？,动物细胞融合技术 动物细胞培养技术,？,？,抗原,效应 B细胞,筛选,筛选,杂交瘤细胞,（3）制备过程为何要经过两次筛选？,【堂堂清】,1.单克隆抗体的优点是_,特异性强、灵敏度高、可大量制备,2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是 _,每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,3.产生抗体的细胞是_产生单克隆抗体的细胞是_,效应B细胞（浆细胞）,杂交瘤细胞,4.杂交瘤细胞的特点: _,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体,5.首次筛选是为了获得_第二次筛选时为了获得 _,杂交瘤细胞,既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,第一步：从一只小鼠体内提取T淋巴细胞，然后与骨髓瘤
5、细胞诱导融合。第二步：再用普通培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死去。第三步：对上述经选择性培养的杂交瘤细胞直接在体外条件下做大规模培养，这样从细胞培养液中就可以提出破伤风杆菌单克隆抗体。,实验评价,1、已注入过灭活破伤风杆菌的小鼠,2、B淋巴细胞,3、选择培养基,4、必须经过专一抗体阳性检验,下面是某同学根据单克隆抗体技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。指出不足之处。,单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点,1、作为诊断试剂,2、用于治疗疾病和运载药物,疗效高、毒副作用小的新型药物 “生物导弹”,应用：,生物导弹,4、科
6、学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓疤细胞融合的是（ ） A.经过免疫的B淋巴细胞 B.没经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的淋巴细胞,A,5、单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是 B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞 A、 B、 C、 D、 ,A,6下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：,（1）图中A过程是从小鼠的脾脏中取得_细胞，该细胞能够产生_。从小鼠体内提取分离该细胞之前
7、，应给小鼠注射_类物质。 （2）B过程是一个_过程，该过程的进行需要灭活的_或_的诱导。,效应B,抗体,抗原,细胞融合,病毒,聚乙二醇,7右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答： （1）该方案能达到预期效果吗？ 。原因是 。 （2）图中为 过程，常用 作为诱导剂。该细胞继承了 ，因此不仅能分泌 ，还有 本领。 （3）该方案的目的是 。,不能,没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的B淋巴细胞.,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞的遗传物质,特异性抗体,在体外培养条件下大量增殖,制备单克隆抗体,7、下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。,（1）_技术是单克隆抗体技术的基础。 （2）根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于_培养基。 （3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是_。 （4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用_。 （5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_特点，又具备淋巴细胞的_特点。 （6）淋巴细胞是由动物体_中的_细胞分化、发育而来。 （7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是_。,动物细胞培养,选择,特异性强,灵敏度高,灭活的病毒,在体外大量增殖,分泌特异性抗体,骨髓,造血干细胞,主动运输,
