1、利穗科技(苏州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 山茶花中纯色素制备 山茶花一般春季开花,园艺品种繁多,其中深红色重瓣山茶花具有丰富的红色素,是开发天然红色素的良好资源。山茶花性甘凉而味苦辛,为凉血、止血、散癖、消肿的良药,故山茶花色素具有天然食用色素安全、营养、药用等典型特征。 样品十分复杂,含有大量难分离杂质。为提高产量同时保证产品纯度,使用两步制备方法。首先,使用大直径制备柱对样品进行粗分,实现目标物与大部分杂质的分离。然后以粗分产品为样品,使用小直径制备柱,通过串联的方式加长色谱柱柱长提高柱效,进行第二次制备分离。 山茶花样品分析 图1 山茶花样品
2、HPLC谱图 仪器:依利特EliteP230II高效液相色谱仪; 色谱柱:SinoChrom ODS-BP (4.6150mm 5um); 流动相:A0.1三氟醋酸水溶液,B乙腈,梯度洗脱; 检测波长:230nm ; 流速:1.0ml/min。 利穗科技(苏州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 初步制备分离 仪器:Dr FlashII中压制备系统; 流动相:A0.1三氟醋酸水溶液,B甲醇 ,梯度洗脱; 分离柱:2根40g制备柱串联,填料ODS AQ(30-50m); 收集波长:230nm; 监测波长:254nm; 流速:25 ml/min。 图2 制备粗分
3、图 收集物HPLC分析检验 Minutes0.06.012.018.024.030.036.040.0-2042104166228290350mV1 23 45 6 7 89 1011121314 151617图3 粗分收集目标物HPLC谱图 条件同图1 利穗科技(苏州)有限公司 Lisure Science (Suzhou)Co.,Ltd 第二次制备分离 样品太复杂,一次分离不能达到高纯度要求。以初步分离中收集的目标物进样,进行第二次制备分离,纯化目标物。 图4 样品第二次制备分离图 分离柱:3根12g制备柱串联,填料ODS AQ(30-50m);B为乙腈,其余同图2 收集物HPLC分析检验 图5 最终目标物HPLC分析谱图 条件同图1 目标物纯度达到设计要求。 地址:苏州工业园区星湖街218号生物纳米园C12幢 电话(Mr Pang):139 1400 6701 QQ技术交流: 1320083680