1、自身抗体检测在自身免疫性疾病中 的临床应用专家建议解读 武汉市第一医院 崔天盆，陈超 一、自身免疫性疾病发病机理进展 (一)凋亡清除缺陷与自身免疫性疾病 凋亡细胞释放找我信号 一、自身免疫性疾病发病机理进展 (二)中性粒细胞外捕网与自身免疫性疾病 一、自身免疫性疾病发病机理进展 (三) CRP在风湿免疫病中的地位 CRP在风湿免疫病中的地位 二、 自身抗体检测在自身免疫性 疾病中的临床应用专家建议 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5
2、.ANA、dsDNA抗体规定 ! 6.不同疾病推荐:RA、SLE等 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! “非感染非肿瘤性炎症”诊断思路: ! 非感染非肿瘤性炎症是疑难病诊断思路,也是风湿免疫 科医生多年来惯用的一种临床思维。除了排除感染、 肿瘤，当然也要排除物理化学损伤、过敏、移植排斥 等导致的炎症。 ! 如何知道存在炎症？不明原因发热、非特异炎症指标 CRP升高等。 ! 当临床高度怀疑“自身免疫疾病”应检测自身抗体。 Addisino 1 / “ ” 已明确40多种，高度相关20多；可能相关100多种 自身免疫性疾病诊断与实验室检测 ! 一、病史和查体 ! 二、影像学检查 ! 三、组织病理
3、学检查 ! 四、实验室检查 ! 1.三大常规、肝功、肾功、甲功 ! 2.炎性标志物：CRP、SAA、PCT、IL-6 ! 3.其他：HLA分型、T细胞 ! 4.自身抗体：重要特征，诊断鉴别诊断、治疗 检测、预后判断 为什么要作自身抗体检测 ! 自身抗体产生是自身免疫疾病（AID）的基本特征 ! 自身抗体成为绝大多数AID的血清学标记物 ! 自身抗体检测用于AID的定义和分类 ! 自身抗体检测是AID诊断和鉴别诊断的重要依据之一 ! 某些自身抗体可用于AID活动度监测和治疗效果评价 ! 某些自身抗体可用于AID预后或累及器官的估计 ! 某些自身抗体对AID发病有预警价值 ! 自身抗体检测新的应用
4、领域（肿瘤、感染、血栓） 自身抗体临床应用专家共识 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5.ANA、dsDNA抗体规定 ! 6.不同疾病推荐:RA、SLE等 IIF ELISA Western-blot 2. 公认方法、定量/半定量/滴度 自身抗体检测目前存在的问题 ! 检测人员：人、质量管理理念局限性 ! 检测方法：局限性 ! 检测程序：局限性 ! 检测试剂、仪器：质量问题 自身免疫检验技术的影响因素 正确认识阴阳性对照与质控 ! !
5、 ! ! 筛查实验与确认实验存在差异? ! 筛查实验 抗原含量丰富、抗原存在分布不均、含量过 低,不同处理方法对特定抗原的破坏 可能导致部分特异性抗体的漏检 ! 确认实验 特异性抗体数量极其有限 自身免疫性疾病患者体内存在的自身抗体多 确认实验不能代替针对总抗体筛查实验 ! 检测方法敏感性、特异性差异 自身抗体检测项目合理选择 “ 自身抗体临床应用： 自身抗体(谱) ，分型 “ 大撒网式筛查不是好医生 “ 临床需求，基本项目 检测项目、检测程序合理选择 疾病诊疗临床路径 检测程序的标准化 临床血清（浆） 标本IIF筛查 阳 性 阴性但有自身 免疫病症状 特异抗体检测及确认试验 NCCLS I/
6、LA2-A 95% 99% SLE SLE IC RA SLE ENA dsDNA Sm rib ANA 自身抗体检测的质量管理 ! 室内质控 ! 实验室间比对：项目少 ! 专业机构：NCCL 2002年ANA，2009年 353家；CAP40项目。 ! 专业学会：中华风湿病协会 ! 商业公司 90% anti-CCP97.1, AMA96.7, anti-M296.0, RF94.7, anti-SSB93.1, anti-SSA91.5 90% ANA 89.4, anti-Jo-187.1, anti-MPO86.9, anti-rRNP82.6, ANCA82.4, anti-PR38
7、2.4 80% anti-Scl-7080.0, anti-Sm74.1, anti- nRNP72.0 70% ASMA65.1 60% anti-2-GP160.0, aCL59.5, APF 57.7 anti-dsDNA52.9, AKA51.9 2012自身抗体比对最低准确率 参加277家，其中210家回报,总体回报率75.81% 自身抗体临床应用专家共识 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5.ANA、dsDNA抗体规定 !
8、 6.不同疾病推荐:RA、SLE等 预测自身抗体 ! 一、预测疾病 ! AMA可在原发性胆汁性肝硬化发病前十年发现 ! 抗胰岛细胞抗体可在I型糖尿病发病前5年检出。 ! 二、预测疾病特异临床表现 ! RA患者中CCP可预测疾病的侵蚀性 ! SLE抗磷脂抗体可预测脑卒中 ! SLE抗核糖体P蛋白预测神经精神症状 自身抗体临床应用专家共识 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5.ANA、dsDNA抗体规定 ! 6.不同疾病推荐:RA、SLE
9、等 自身抗体临床应用专家共识 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5.ANA、dsDNA抗体规定 ! 6.不同疾病推荐:RA、SLE等 1.ANA 2.ANA , 3.IIFA ANA 4. ANA 5.ANA,anti-dsDNA ENA SARD AID ! 6、ANAIIFA依赖于试剂、设备和其他因素，因而筛查 稀释度可因地而异。 一个ANA的异常结果应是在正常 对照人群第95百分位以上的滴度。通常而言， 以 Hep-2细胞为底物
10、检测ANA评价成人人群SARD时，所 用的稀释度为1:160； ! 7、 ANA阳性时，推荐同时报告荧光图型和最高稀释度； ! 8 、ANAIIFA荧光图型的报告应采用标准化术语； ! 9、可能时，除了细胞核荧光图型外，其他的细胞浆和 有丝分裂荧光图型也应一并报告； anti-dsDNA检测 ! 1、临床怀疑SLE时，如ANA阳性，则还需检测anti- dsDNA抗体； ! 2、检测anti-dsDNA时，Farr试验和CLIFT（短膜虫免 疫荧光检测）具有高临床特异性。其他方法的特异性 较低，因而推荐这些方法检测阳性时再用Farr试验和 CLIFT加以确认，并分别报告结果； ! 3、在报告a
11、nti-dsDNA结果时应包括检测方法； ! 4、anti-dsDNA结果的报告应是定量的（或CLIFT半定 量）； ! 5、应以相同方法用于anti-dsDNA的定量检测和SLE病 情活动监测； anti-ENA检测 ! 1、ANA阳性时，推荐还检测anti-ENA； ! 2、检验报告中应注明anti-ENA检测方法。如与IIFA或临床诊断偏 差时，应考 ! 虑用其他检测方法； ! 3、应分别报告anti-ENA（包括阴性结果）；如ANA筛查结果为阴 性时，只要注明哪项anti-ENA阳性即可； ! 4、当临床怀疑混合型结缔组织病时，推荐定量检测anti-RNP抗体； ! 5、当临床高度怀疑
12、并要求检测anti-ENA时，不管ANA结果如何， 也要满足临床要求。如anti-Jo-1对炎症性肌病、anti-ribosomal P 对SLE、anti-SS-A/Ro ! 6.对先天性心脏传导阻滞/新生儿狼疮/干燥综合征/亚急性皮肤狼 疮； 自身抗体临床应用专家共识 ! 中华风湿病学杂志,2014,18(7):437-443 ! 1.怀疑自身免疫疾病检测自身抗体 ! 2.公认方法、定量/半定量/滴度 ! 3.检验与临床结合 ! 4.诊断标准中的项目应开展 ! 5.ANA、dsDNA抗体规定 ! 6.不同疾病推荐:RA、SLE等 1997 (AFA) 1993 (APF) : - (Sim
13、on, 1993) 1979 IFA: RA ( ,AKA)(Young BJJ.Br Med J.1979,2:97) 1964 IFA: RA APF(Nienhuis RLF.Ann Rheum Dis,1964,23:302) 1999 CCP RA CCP CCP 2010 RA新诊断标准( ACR/EULAR) (%) (%) RA33/36 Sa CCP CB10 BiP 50-70 25-45 37 33 38-62 60-70 72 70 86 93.6 78-97 87-92 70-90 96 70-88 92 RA 1 2 3 4 5 2 2009 SLE -SLICC
14、- 94% 92% 6 7 0.5g/24h RBC 8 9 10 WBC 4109/L 1 1109/L 1 11 100109/L 1 1 ANA 2 dsDNA ELISA 2 3 Sm 4 5 C3 C4 CH50 6 Coombs 1 LN ) Ig C3 C4 C1q “ ” 2 4 1 1 血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA 、抗dsDNA 、抗ENA 、 ACL SLE随访 血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA谱 、 ACL 、抗B2GPI、狼疮抗凝物 Coombs试验 SLE初筛（全套） 血常规血沉 尿常规、沉渣、24小时尿蛋白 肝肾功能 补体、免疫球蛋白 ANA 、抗dsDNA SLE初筛（普通） 检测项目的选择 “ 抗磷脂综合征（APS）1/3 SLE（凝血危险） RA 炎性疾病 “ 狼疮抗凝物（LA） “ 抗心磷脂抗体（aCL） “ 抗2糖蛋白-1（2GP-1）抗体 “ 抗磷脂酰丝氨酸抗体 “ 抗磷脂酸抗体 抗磷脂抗体谱 !“#$%&
