蝴蝶兰的快速繁殖技术和规模化栽培研究.doc

1、新疆农业职业技术学院毕业论文蝴 蝶 兰 的 快 速 繁 殖 技 术和 规 模 化 栽 培 研 究姓 名：学 号：系 别：专 业： 园艺技术 年 级：指导教师： 2010 年 11 月 8 日目 录摘要 （1）前言（2）1 材料与方法（2）1.2.蝴蝶兰原球茎诱导（2）1.2.2 蝴蝶兰原球茎增植 （2）1.2.3 蝴蝶兰原球茎分化（2）1.2.4 蝴蝶兰炼苗（2）1.2.5 规模化栽培（2）2 结果与分析（3）2.1 原球茎的诱导、增植、分化的一般情况（3）2.2 原球茎诱导（3）2.3 原球茎增植（3）2.3.1 不同激素的配比对原球茎增殖的影响（3）2.3.2 天然提取物对原球茎增植的影响

2、（4）2.3.3 蔗糖浓度对原球茎增植的影响（5）2.4 原球茎分化（5）2.4.1 植物激素对原球茎分化的影响（5）2.4.2 天然提取物对原球分化的影响（6）2.4.3 蔗糖浓度对原球茎分化的影响（6）2.5 蝴蝶兰炼苗（7）2.6 规模化温室栽培（7）3 讨论 （7）参考文献（9）致谢（10）蝴 蝶 兰 的 快 速 繁 殖 技 术 和 规 模 化 栽 培 研 究摘 要 ： 以 蝴 蝶 兰 的 花 梗 、 幼 叶 、 茎 尖 、 根 尖 为 外 植 体 ， 对 影 响 原球 茎 发 生 、 增 殖 、 分 化 、 炼 苗 、 规 模 化 栽 培 的 外 部 因 子 进 行 了 系统 研 究

3、 。 试 验 结 果 表 明 ： 茎 尖 是 蝴 蝶 兰 原 球 茎 诱 导 的 较 佳 外 植 体 ；1/2MS+2 mg/L6-BA+20%椰 汁 +5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 +2%蔗 糖 是 蝴蝶 兰 原 球 茎 增 殖 理 想 的 培 养 基 ； 1/2MS+0.1mg/LNAA+2%蔗 糖 +10%椰 子 汁 +5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 是 原 球 茎 分 化 的 适 宜 培 养 基 ； 活 性炭 可 促 进 生 根 壮 苗 。关 键 词 ： 蝴 蝶 兰 原 球 茎 诱 导 增 殖 分 化 炼 苗 规 模 化 栽 培前 言蝴 蝶 兰 为 兰 科 多 年 生 附

4、 生 草 本 ， 主 要 分 布 在 热 带 及 亚 热 带 地 区 。 其 花 形奇 特 ， 色 彩 艳 丽 ， 花 期 持 久 ， 素 有 “兰 中 皇 后 ”的 美 誉 ， 具 有 极 高 的 观 赏 和经 济 价 值 ， 在 国 内 外 花 卉 市 场 上 极 受 欢 迎 。 但 由 于 蝴 蝶 兰 属 于 单 茎 性 气 生 兰 ，再 生 能 力 弱 ， 很 难 进 行 分 株 繁 殖 ， 常 规 情 况 下 种 子 发 育 不 完 全 ， 极 难 萌 发 ，增 殖 系 数 很 低 ， 因 此 利 用 蝴 蝶 兰 快 速 繁 殖 技 术 对 扩 大 蝴 蝶 兰 的 繁 殖 是 非 常

5、 必要 的 。 在 蝴 蝶 兰 组 织 培 养 技 术 方 面 ， 国 内 外 都 有 一 定 研 究 ， 为 了 充 分 准 备 试验 ， 笔 者 参 考 了 国 内 外 蝴 蝶 兰 组 织 培 养 的 研 究 现 状 ， 设 计 了 这 次 试 验 。 本 文将 以 蝴 蝶 兰 快 速 繁 殖 技 术 和 产 业 化 生 产 的 系 统 研 究 为 我 国 蝴 蝶 兰 的 大 规 模 工厂 化 生 产 和 推 广 提 供 参 考 。材 料 和 方 法1.1 材 料蝴 蝶 兰 品 种 多 个 ， 花 色 有 白 花 、 红 花 、 黄 花 、 粉 红 、 等 ， 以 花 梗 侧 芽 为外 植

6、 体 培 养 获 得 无 菌 苗 。1.2 方 法1.2.1 蝴 蝶 兰 原 球 茎 诱 导取无菌苗的幼叶、茎尖、根尖为外植体，在各种诱导培养基上培养。以上培养基中琼脂均为 5g/L,PH5.8-6.1 培养条件：温度为 252 ，每日光照 12h，光照强度 12002000 Lx。1.2.2 蝴 蝶 兰 原 球 茎 增 殖对 增 殖 培 养 基 采 用 单 因 素 对 比 试 验 ， 包 括 植 物 激 素 试 验 (培 养 基 为1/2MS+2 蔗 糖 20 椰 子 汁 +5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 )， 天 然 附 加 混 合 物 试验 (培 养 基 为 1/2MS 2 蔗 糖

7、 6-BA2 mg/L) ， 蔗 糖 浓 度 试 验 (培 养 基 为1/2MS+6-BA2 mg/L+20%椰 子 汁 +5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 )。 1.2.3 蝴 蝶 兰 原 球 茎 分 化对 分 化 培 养 基 也 采 用 单 因 素 对 比 试 验 ， 包 括 植 物 激 素 试 验 (1/2MS 2蔗 糖 10 椰 子 汁 ),天 然 附 加 混 合 物 试 验 (1/2MS 2 蔗 糖 +0.1mg/LNAA)，蔗 糖 浓 度 试 验 (1/2MS 20 椰 子 汁 +5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 +0.1mg/LNAA)。 .2.4 蝴 蝶 兰 炼 苗炼

8、苗 前 准 备 、 水 草 选 择 、 温 度 、 湿 度 、 通 风 的 控 制 。1.2.5 规 模 化 栽 培温 室 建 设 、 基 质 选 择 、 换 盆 、 浇 水 、 施 肥 。2.结 果 与 分 析2.1 原 球 茎 诱 导 、 增 殖 和 分 化 的 一 般 情 况原 球 茎 是 一 类 呈 珠 粒 状 的 ， 由 胚 性 细 胞 组 成 的 ， 类 似 嫩 茎 的 器 官 ， 在 兰科 植 物 中 多 以 这 种 器 官 发 育 、 增 殖 和 分 化 。 外 植 体 接 种 在 适 宜 的 诱 导 培 养 基约 10 天 切 口 边 缘 开 始 有 原 球 茎 状 体 颗

9、粒 出 现 ； 原 球 茎 经 分 割 后 ， 接 种 在 增殖 培 养 基 8 天 左 右 ， 开 始 有 黑 色 物 质 分 泌 ， 少 数 原 球 茎 表 面 形 成 白 色 的 绒 毛 ，12 天 后 开 始 出 现 1 个 或 多 个 肉 眼 可 见 的 黄 绿 色 瘤 状 突 起 ， 即 新 的 原 球 茎 ；原 球 茎 的 分 化 指 原 球 茎 由 淡 黄 色 转 变 为 绿 色 ， 并 出 现 绿 色 叶 原 基 的 假 鳞 茎 原球 茎 ， 两 个 月 后 ， 当 长 成 具 三 张 以 上 叶 片 ， 3-4 条 根 的 小 苗 时 ， 就 可 进 行 炼苗 移 栽 。2

10、.2 原 球 茎 的 诱 导以 盆 栽 苗 的 花 梗 侧 芽 、 花 梗 切 片 ， 无 菌 苗 的 幼 叶 、 茎 尖 、 根 尖 为 外 植 体在 兰 花 快 速 繁 殖 常 用 的 1/2MS、 MS、 KC、 V&W、 Kyoto 等 多 种 培 养 基 上 培 养 ，激 素 6-BA（ 或 KT） 、 NAA 的 浓 度 分 别 为 0、 0.1、 1、 2、 3、 5mg/Ll 进 行 组合 诱 导 原 球 茎 。 花 梗 侧 芽 在 1/2MS+2mgL 6-BA 培 养 基 上 形 成 大 量 丛 生 芽 ，增 殖 效 果 较 好 ； 花 梗 切 片 在 1/2MS+10mg

11、/LKT+5mg/LNAA 培 养 基 上 有 少 量 原球 茎 诱 导 产 生 ； 幼 叶 能 在 多 种 培 养 基 上 诱 导 产 生 原 球 茎 ， 其 中 以 培 养 基1/2MS+5mg/L6-BA 效 果 最 佳 ， 其 原 球 茎 的 诱 导 产 生 速 度 最 快 ； 茎 尖 的 原 球 茎的 诱 导 效 果 为 这 五 种 外 植 体 之 首 ， 其 诱 导 最 佳 培 养 基 为 1/2MS+2mg/L6-BA；根 尖 的 原 球 茎 的 诱 导 效 果 最 差 ， 其 相 对 较 佳 培 养 基 为 1/2MS+10mg/L6- BA+1mg/LNAA。 从 以 上 原

12、 球 茎 的 诱 导 实 验 结 果 可 知 ， 1/2MS 是 一 种 诱 导 蝴 蝶兰 原 球 茎 较 理 想 的 基 本 培 养 基 ， 但 以 不 同 的 外 植 体 进 行 诱 导 时 需 添 加 不 同 配比 的 激 素 。2.3 原 球 茎 的 增 殖2.3. 不 同 激 素 的 配 比 对 原 球 茎 增 殖 的 影 响 。表 1 说明在单独添加 6-BA2mg/L 的培养基中，原球茎的增殖频率与平均每块增殖数要高于其它各激素浓度的配比，且原球茎增殖迅速，呈淡绿色、饱满；6-BA 低于 2mg/L 培养基中，原球茎增殖的数量较少，但颗粒较大；6-BA 高于2mg/L 的培养基中

13、，原球茎增殖的数量很多，但颗粒较小，易黄化死亡。从添加不同浓度的 NAA 来看(6-BA 固定为 2mg/L 时)：随 NAA 浓度增加(03)，增殖频率相应从 96.7%下降到 38.3%，平均每块增殖数也下降，说明 NAA 对蝴蝶兰原球茎的增殖有一定的抑制作用，浓度越高，抑制作用越强。从实验中可以发现：随 NAA 浓度的增加，增殖形成的原球茎颜色相对较黄，增殖速率较慢，死亡率也相应提高。在无激素的培养基中，也有一定的增殖频率，但原球茎都已分化，有绿色细叶的出现。因此适宜蝴蝶兰原球茎增殖的培养基的激素应为：6-BA2mg/L。表 1 植物激素对蝴蝶兰原球茎增殖的影响植物激素 接种原球茎 进行

14、增殖的原 增殖频率 平均每块 NAA 6BA 块数 球茎块数 （%） 增殖数0 0 60 4 6.7 少 0 1 6034 56.7 较少0 2 6058 96.7 多0 3 60 5693.3 多0 5 6054 90.0 多0.1 2 60 48 80.0 较多1 2 60 32 53. 较少3 260 23 38.3 较少2.3.2 天 然 提 取 物 对 原 球 茎 增 殖 的 影 响原球茎接种 7 天后，在附加椰子汁+香蕉汁+马铃薯汁、 香蕉汁+马铃薯汁+苹果汁、 香蕉汁+地瓜汁+马铃薯的培养基中开始出现瘤状突起，培养 30 天后统计结果（见表 2）：附加香蕉汁+马铃薯汁+椰子汁、香

15、蕉汁+马铃薯汁+苹果汁、香蕉汁+马铃薯汁+地瓜汁的培养基与无添加物相比，增殖频率明显提高。从原球茎的生长情况来看：附加香蕉汁+马铃薯汁+苹果汁的培养基中，原球茎平均增殖数多，但体积小，出现分化；在附加香蕉汁+马铃薯汁+地瓜的培养基中，增殖数量较少，且原球茎颜色偏黄；而在附加香蕉汁+马铃薯汁+椰子汁的培养基中原球茎不仅增殖数量多，且颜色翠绿、饱满。因此，本实验表明：在蝴蝶兰的增殖过程中应添加 5%香蕉汁+1.5%马铃薯汁+20%椰子汁。表 2 天然提取物对原球茎增殖的影响附加物种类 增殖率(%) 增殖速度 原球茎生长情况无 35 + 增殖形成芽点,数目少,呈淡黄色原球茎半数左右变黄，少数死亡香蕉

16、汁+马铃薯汁 92 + 数目多，50%左右的个体饱满呈黄+苹果汁 绿色香蕉汁+马铃薯汁 97 + 数目多，深绿色，个个饱满+椰子汁香蕉汁+马铃薯汁 89 + 部分形成芽点，呈团块状，体积+地瓜 小，颜色偏黄，未增殖的原球茎变黄注：+表示快；+表示较快；+表示一般2.3.3 蔗糖浓度对原球茎增殖的影响表 3 蔗糖浓度对原球茎增殖的影响蔗糖浓度 接种原球茎 进行增殖的 增殖率 原球茎生长情况(%) 块数 原球茎数 (%)1 60 44 73.3 增殖较慢，平均增殖数少，呈黄绿色 2 60 59 98.2 增殖迅速，平均增殖数多，体积较大，呈深绿色。3 60 52 86.6 平均增殖数一般，增殖较慢

17、，呈淡绿色，有分化现象，部分黄化。 4 60 38 63.3 平均增殖数少，呈黄化分化，未增殖的原球茎黄化5 60 915.0 原球茎变黄，褐化，有少数死亡从表 3 可知：蔗糖浓度为 2%的培养基中的原球茎的增殖率明显高于其它浓度；当蔗糖浓度在 2%以上时，原球茎体积小，增殖速度减慢，生长情况差，到5%时原球茎几乎不再增殖，且少数褐化死亡(详见表 3)。以上说明：蝴蝶兰原球茎增殖的适宜蔗糖浓度为 2%。从 以 上 影 响 原 球 茎 增 殖 各 因 素 的 比 较 试 验 中 ， 我 们 获 得 原 球 茎 增 殖 的 最佳 培 养 基 为 1/2MS+2mg/L 6-BA+20%椰 子 汁

18、+5%香 蕉 +1.5%的 马 铃 薯 +2%蔗 糖 。2.4 原 球 茎 分 化2.4 1 植 物 激 素 对 原 球 茎 分 化 的 影 响表 4 植物激素对蝴蝶兰原球茎分化的影响植物激素 接种原球茎 进行分化的原 分化频率 NAA 6BA 块数 球茎块数 （%） 0 0 60 53 88.30.1 0 60 60 1001 0 6037 61.72 0 6032 53.32 0.1 60 34 56.72 2 601626.7本 实 验 仍 采 用 NAA 和 BA 的 不 同 浓 度 组 合 （ 表 4） ， 结 果 表 明 ： 只 添 加激 素 NAA0.1mg/L 的 1/2MS

19、培 养 基 非 常 适 合 原 球 茎 分 化 ， 其 分 化 率 可 达 到100%； 而 常 规 分 化 中 经 常 使 用 的 高 浓 度 和 低 浓 度 6 组 合 对 蝴 蝶兰 原 球 茎 分 化 有 一 定 的 抑 制 作 用 ， 达 不 到 添 加 低 浓 度 NAA 的 培 养 基 所 产 生 的分 化 效 果 。2.4.2 天 然 提 取 物 对 原 球 茎 分 化 的 影 响表 5 天 然 提 取 物 对 原 球 茎 分 化 的 影 响天然提取物 12 片叶苗 34 片叶苗 苗情况 分化率（30 天） （60 天） 5%香蕉汁+1.5%马铃薯 有 有 叶片翠绿、肥厚， 较高

20、 +10%椰子 汁有少量根，苗整齐粗壮，长势好 5%香蕉汁+1.5%马铃薯 有 有 叶色淡绿，苗较整齐， 高+15%地瓜汁 长势好 5%香蕉汁+1.5%马铃薯 有 有 叶少数为 3 片，多为 较 低 +15%苹果汁 1-2 片苗不整齐 结 果 表 明 ： 添 加 10 的 椰 子 汁 对 原 球 茎 分 化 的 效 果 最 好 ， 分 化 苗 整 齐 ，叶 色 翠 绿 ， 长 势 最 佳 ， 分 化 率 最 高 ， 苹 果 ， 地 瓜 的 次 之 ， 因 此 ， 5%香 蕉 汁+1.5%马 铃 薯 +10 椰 子 汁 对 原 球 茎 分 化 最 理 想 。2.4.3 蔗 糖 浓 度 对 原 球

21、 茎 分 化 的 影 响 。图 1 蔗 糖 浓 度 对 原 球 茎 分 化 的 影 响不 同 的 蔗 糖 浓 度 对 原 球 茎 的 分 化 有 明 显 的 影 响 。 实 验 发 现 ， 加 蔗 糖 浓 度1 和 2 的 培 养 基 都 能 使 原 球 茎 100 分 化 ， 尤 其 蔗 糖 浓 度 为 2 时 ， 分 化速 度 最 快 。 蔗 糖 浓 度 为 3 5 时 ， 由 于 培 养 基 的 渗 透 压 的 升 高 ， 抑 制 了原 球 茎 的 分 化 和 生 长 ， 分 化 质 量 和 分 化 速 度 都 显 著 下 降 ， 所 以 最 适 蔗 糖 浓 度为 2%。 从 以 上 对

22、 原 球 茎 分 化 的 影 响 因 素 的 对 比 试 验 中 ， 我 们 基 本 可 以 得 到以 下 结 论 ： 1/2MS+0.1mg/LNAA+10%椰 子 +5%香 蕉 +1.5%马 铃 薯 汁 +2%蔗 糖 最 适合 原 球 茎 分 化 。 原 球 茎 从 分 化 到 成 苗 需 要 3 个 月 时 间 ， 在 此 过 程 中 须 及 时继 代 。 继 代 培 养 基 中 应 添 加 活 性 碳 0.1g/L， 这 样 可 以 促 进 再 生 植 株 壮 苗 生根 ， 有 利 于 下 一 阶 段 的 炼 苗 成 活 。2.5 蝴 蝶 兰 炼 苗生 根 苗 接 种 一 周 后 移

23、至 炼 苗 室 炼 ， 盖 一 层 70%黑 色 遮 阳 网 使 光 照 在60007000Lx,温 度 在 2530 ,一 般 4560 天 即 可 移 栽 。选 择 两 叶 一 心 ， 3 4 条 根 ， 5 10 厘 米 长 的 健 壮 苗 。 从 瓶 内 取 出 小 苗 ，洗 净 根 部 培 养 基 ， 注 意 勿 伤 根 用 事 先 准 备 好 的 水 草 将 根 包 好 放 入 1.7 寸 塑 料杯 中 ， 送 入 温 室 炼 苗 ， 温 室 内 最 低 温 度 要 在 8 以 上 ， 其 最 适 温 度 ： 夜 间2022 ； 白 天 2528 。 要 避 免 33 的 高 温

24、， 因 此 蝴 蝶 兰 种 苗 以 春 季 4,5月 份 炼 苗 最 适 宜 ， 其 次 为 9,10 月 份 。 其 次 还 应 注 意 做 好 保 温 ， 保 湿 ， 遮 光等 管 理 工 作 ， 使 之 尽 力 接 近 最 佳 生 长 环 境 ， 为 保 证 苗 全 苗 壮 ， 可 在 种 苗 渡 过缓 苗 期 并 开 始 生 长 时 ， 进 行 施 肥 及 病 虫 害 防 治 ， 蝴 蝶 兰 对 湿 度 和 通 风 要 求 很高 ， 因 此 ， 应 在 基 质 干 后 再 浇 水 ， 水 温 与 室 温 接 近 ， 增 加 湿 度 ， 用 加 湿 器 最好 ， 也 可 用 喷 雾 器

25、向 叶 面 喷 细 雾 ， 叶 面 潮 湿 即 可 0204060801001201 2 3 4 5蔗 糖 浓 度 %分 化 率2.6 规 模 化 温 室 栽 培蝴 蝶 兰 从 小 苗 至 开 花 大 约 需 两 年 时 间 ， 而 蝴 蝶 兰 适 宜 生 活 在 遮 阴 、 高 温 、高 湿 、 通 风 的 栽 培 环 境 ， 因 此 必 须 建 立 一 个 能 人 工 控 温 控 湿 控 光 的 温 室 。 现在 许 多 蝴 蝶 兰 栽 培 基 地 都 采 用 玻 璃 温 室 ， 一 般 采 用 暖 气 加 热 ， 水 帘 加 湿 ， 遮阳 网 遮 阴 等 。小 苗 可 根 据 大 小 放

26、 入 兰 花 专 用 软 塑 料 杯 ， 基 质 用 水 草 ， 移 栽 时 可 先 用 水草 缠 绕 兰 根 ， 再 植 于 杯 内 。 一 般 幼 苗 的 适 宜 光 照 强 度 为 10000Lx 左 右 ， 成 苗为 2000030000Lx， 因 此 蝴 蝶 兰 苗 移 栽 后 应 遮 阴 、 保 湿 （ 湿 度 80%以 上 ） 、通 风 、 保 温 （ 25 左 右 ） 。一般从出瓶的小苗种植到成苗开花需要换盆 23 次。换盆的依据：盆苗长大，旧盆无法满足兰苗的生长，这时就应进行正常的换盆。从小盆换至大盆时不用将原有的水草等栽培基质去除；直接将新鲜、干净、浸泡挤干水分后的水草包住

27、原有根团，塞入大一号的盆中即可，新加入水草的紧实度同样以手指轻压有弹性、也不太硬为度。 3.讨 论3.1.不 同 的 天 然 附 加 物 对 原 球 茎 诱 导 增 殖 分 化 影 响 较 大 ， 其 中 附 加 香 蕉 汁 马铃 薯 汁 椰 子 汁 的 培 养 基 最 佳 ， 这 说 明 香 蕉 汁 马 铃 薯 汁 椰 子 汁 对 蝴 蝶 兰 的 增 殖和 分 化 有 较 大 促 进 作 用 ,其 中 的 原 由 有 待 进 一 步 的 研 究 。3.2.实 验 发 现 ： 某 些 培 养 基 ， 如 本 实 验 中 所 用 的 6-BA 浓 度 较 低 的 1/2MS 培养 基 与 添 加

28、 香 蕉 汁 +马 铃 薯 汁 +苹 果 汁 的 培 养 基 会 出 现 分 化 现 象 ； 增 殖 后 的 原球 茎 ， 若 不 及 时 继 代 ， 也 会 出 现 分 化 现 象 。 但 要 达 到 高 效 率 ， 应 在 最 适 宜的 培 养 基 上 进 行 分 化 原 球 茎 。 原 球 茎 在 增 殖 过 程 中 ， 应 尽 早 周 期 性 地 进 行 分割 。 但 在 生 产 中 我 们 也 可 以 利 用 6-BA 浓 度 相 对 较 低 的 培 养 基 同 时 产 生 相 应比 例 增 殖 用 的 原 球 茎 和 一 定 量 的 分 化 苗 ， 以 保 证 原 球 茎 定 量

29、留 种 和 每 期 出 苗量 。3.3.在 蝴 蝶 兰 组 织 培 养 中 ， 维 持 一 定 的 渗 透 压 ， 是 比 较 重 要 的 ， 在 基 本 培 养基 和 蔗 糖 试 验 中 都 得 到 验 证 。3.4.采 用 不 同 激 素 组 合 能 极 大 地 提 高 增 殖 和 分 化 效 率 及 速 度 ， 这 在 实 验 中 已得 到 验 证 ， 同 时 这 对 蝴 蝶 兰 的 工 厂 化 生 产 也 是 有 实 际 上 的 理 论 指 导 价 值 。3.5.炼 苗 时 ， 通 过 控 制 水 ， 减 肥 ， 增 光 ， 降 温 等 措 施 ， 使 生 理 形 态 ， 组 织 上发

30、 生 相 应 的 变 化 ， 使 之 更 适 合 于 自 然 环 境 ， 只 有 这 样 才 能 保 证 瓶 苗 顺 利 移 栽成 功3.7 以 井 水 代 替 蒸 馏 水 、 白 糖 代 替 蔗 糖 、 大 量 元 素 减 半 的 MS 培 养 基 用 于 蝴蝶 兰 的 大 规 模 生 产 可 以 降 低 成 本 ， 提 高 经 济 效 益 。参 考 资 料1.彭 立 新 ,王 姝 等 . 蝴 蝶 兰 组 织 培 养 繁 殖 的 研 究 J. 天 津 农 业 科 学 ,1999.2. 张 福 明 ,徐 希 玉 . 植 物 组 织 培 养 简 报 摘 编 （ 蝴 蝶 兰 种 子 苗 ） J.

31、植 物生 理 学 通 讯 ,1999.3.张 秀 清 . 蝴 蝶 兰 实 生 苗 不 同 器 官 的 离 体 培 养 J. 植 物 学 通 报 ,1996.4.张 振 龙 .植 物 组 织 培 养 . 中 国 农 业 大 学 出 版 社 ， 2007.5.朱 红 ， 华 张 雨 蝴 蝶 兰 试 管 苗 继 代 及 生 根 培 养 的 研 究 科 技 情 报 开 发 与 经济 2009-7-10.6. 曾 宋 君 ， 彭 哓 明 等 . 蝴 蝶 兰 的 组 织 培 养 和 快 速 繁 殖 J. 武 汉 植 物 学研 究 , 2000.7. 杨 美 纯 ,周 歧 伟 等 .外 部 因 子 对 蝴 蝶 兰 叶 片 原 球 茎 状 体 发 生 的 影 响 J. 广 西 植 物 ,2000： .8. 张 治 国 等 . 铁 皮 石 斛 组 培 研 究 J. 中 国 中 医 杂 志 , 1993.9.丁 世 民 . 组 织 培 养 炼 苗 要 把 三 关 . 植 物 杂 志 M. 中 国 科 学 出 版 社 .10.朱 建 华 彭 士 勇 等 .植 物 组 织 培 养 实 用 技 术 ： 中 国 计 量 出 版 社 ， 2002.11.田 国 . 兰 科 植 物 菌 根 的 研 究 进 展 J. 微 生 物 学 通 报 , 1998.