1、脱乙酰度测定酸碱滴定法测定:测定原理壳聚糖的自由氨基呈碱性,可与酸定量地发生质子化反应,形成壳聚糖的胶体溶液,溶液中游离的 H+离子用碱进行滴定。这样从用于溶解壳聚糖的酸量与滴定用去的碱量之差,即可推算出壳聚糖自由氨基结合酸的量,从而计算出壳聚糖中自由氨基的含量。一、 测定方法1、 水分含量的测定称取 0.3 g 壳聚糖样品,在 105下烘干至恒重,计算失重,即得水分含量。水分(%)=(W 1-W2)/(W1-W0)100式中,W 1 为 105烘干前样品及称样皿质量(g), W2 为 105烘干后样品及称样皿质量(g)W0 为已恒重的称样皿质量(g)。2、 脱乙酰度的测定准确称量 8g 壳聚
2、糖样品(相当于 0.2g 壳聚糖,样品中壳聚糖含量为25mg/g),置于 250ml 锥形瓶中,加入标准 0.1mol/L 盐酸溶液20ml。将锥形瓶置于电磁搅拌器座上,在 20条件下搅拌使样品溶解,再加 50ml 蒸馏水。加入 2-3 滴甲基橙-苯胺蓝混合指示剂(1g/1L甲基橙:1g/1L 苯胺蓝=1:2,体积比,其中苯胺蓝为水溶性)。用标准0.1mol/L 氢氧化钠溶液进行滴定,滴定至溶液由紫红色变为蓝绿色,为滴定终点。计算公式:氨基含量=(C 1V1-C2V2)0.016/G(100 -W)100%式中,C 1 为酸盐标准溶液的浓度(mol/L)C2 为氢氧化钠标准溶液的浓度(mol/L)V1 为加入的酸盐标准溶液的体积(ml)V2 为滴定用消耗的氢氧化钠标准溶液的体积(ml)G 为样品的重量W 为样品的水分 (%)0.016 为 1ml 的 1mol/L 盐酸溶液相当的氨基量(g)。脱乙酰度=氨基含量(%)/(9.94%)100%