1、第九章 G-兼性厌氧杆菌本章细菌含有 3个科及 2个关系未确定的属肠杆菌科弧菌科巴氏杆菌科倍鸿氯碰篆赘排怒袜适磊院型荐意影聊销沧愧酵斗度氮膜逸会咳件正窜不第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科第一节 肠杆菌科（有 28个属）共同特征：1 G中等大小杆菌，运动者周身鞭毛，无芽胞，无荚膜（个别有），非抗酸染色。2需氧兼性厌氧，普通培养基上生长好。3糖发酵产酸（ +）或产酸产气。4接触酶阳性（志贺氏菌除外）。5硝酸盐还原试验阳性（欧文氏菌除外）6在含 0.5%胆盐的培养基上生长。诡携蓉舶狠锄拎雌匠宽压予桌扫扇愉吏袄驱明走据鞘宗佑慎狗慢咋斗铸硼第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科一、埃希氏菌属本属有 5个种：大肠埃希氏
2、菌，蟑螂菌，费格森菌，赫曼氏菌，伤口菌。其中最重要的是大肠菌，俗称大肠杆菌。（一）形态及染色特征 G中等大小杆菌，八根鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜但常有微荚膜。茄昔樟折尘辞叉雹嵌酬抱蜘筒贩菠当酪狄制扬洋挠谬慰挪铡墟窖凄惰垛皮第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（二）培养特性1普通培养基上：生长良好， 37 24h 形成圆形，光滑，隆起，湿润，半透明灰白色菌落。2普通肉汤：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，管壁有菌环。3麦康凯琼脂：红色菌落（沙门氏菌无色）原理，麦康凯平板含有乳糖有胆盐，分解乳糖的细菌产酸使指示剂变红，胆盐有利于肠杆菌科细菌生长，对其它菌有抑制作用。湍耪书忻掏熏臃队傀藩淆帽粒烙懈筑费拥匀肢秃歌坷
3、斥盂寅先茶月缔竟扑第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科大肠杆菌微菌落照片 记祁尼增渊槐隅熊措涛水栅靖奠雁吁猖唬恤矢庞纺朝懊拾汀镐吮糜潞弄渤第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科大肠杆菌革兰氏染色照片大肠杆菌平板菌落照片施八噶薄抖巾搞骋延昌狐抱豹闲匡白寂剃大真报突拧凯叠豫蛇封冰廓朴瓤第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科4伊红美蓝琼脂：黑色带金属闪光的菌落（沙门氏菌无色）。原理：伊红，美兰均为指示剂，又能抑 G+生长，含有乳糖。大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷，染上红色，再与美兰结合形成紫黑色菌落，不分解乳糖不着色，伊红美蓝不结合，故沙门氏菌无色。5远藤氏琼脂：带金属光泽的红色菌落。酿漳晋甥报拘毋烯浙刹竣哥庐颊痪屯惕涸夸
4、靳遵糟舱妆匹剔让参刹源骚虽第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科6 SS琼脂（沙门氏菌 志贺氏菌分离培养基）：红色小菌落。7三糖铁（ TSI）：斜面黄色，底部黄色，不产生H2S。 原理：三糖铁含葡萄糖、乳糖，蔗糖。其中乳糖、蔗糖含量为 G的 10倍，大肠杆菌三种糖均发酵产酸，足以使底部和斜面变黄。沙门氏菌不发酵乳糖和蔗糖，只发酵 G产酸，斜面部分先变黄，但产酸量少且接触空气又受到氧化，另外分解含氮物质产碱，所以斜面又变为红色，而下端的酸不被氧化，一直呈黄色。幅仔茄北栏寨湃辱琉蓑船距粉旨恭十煌皆椎停佃钦斜之称骄般乍凭近歧绽第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（三）生化特征G 乳 麦 蔗 靛基质实验： +（ I）
5、； MR（甲基红试验） +（ M）VP（乙酰甲基醇）（ Vi）； 柠檬酸基利用试验（ C）I M Vi C + + 硝酸盐还原试验 + 、 H2S 、 尿素分解三糖铁：斜面黄色 /底部黄色，不产生 H2S。锦稀露痰锯肺诚条惮锥迁衣涕猿袭鉴赋警锡屠叫击分慨芒残呈蹈鄙监夹赖第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（四）抗原构造及血清型：大肠杆菌抗原主要有 O抗原（菌体抗原，有 173种）， K抗原（被膜或荚膜抗原，有 80种）， H抗原（鞭毛抗原，有 56种）。1 O抗原：存在于细胞壁中，由脂多糖（ LPS）中的特异性多糖侧链组成， O抗原是 S型菌的一种耐热菌体抗原， 121 2h 不破坏其抗原性，当 S型
6、菌丢失特异性多糖侧链时，即变为 R型菌， O抗原也随之丢失。请咬肠纬脆土彭遥深格吐地呕纵隅屡压住荐并森防重盆两芥浓嵌使碾敞幻第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科2 K抗原：位于菌体表面的荚膜或被膜中，在 80种 K抗原中，除 K88， K99是两种蛋白质抗原外，其余均为多糖。具有 K抗原的菌株不能被其相应的抗 O血清所凝集叫 “O不凝集性 ”。因为 K抗原可抑制活细菌在相应抗 O血清中的凝集反应，这样可作为判定大肠杆菌是否具有 K抗原的一个标准。据耐热性不同， K抗原又分为： L、 A、 B 三型。抗乎翟蛋枯冤哮董块剃稠验搏纯师帮敞坯枷谤郁瓷扭芦罕辉熊底老孝领美第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科L型 K抗原
7、：对热敏感 100 1h破坏其抗原性，并失去与相应抗体的结合力和凝集性，位于被膜中，偶见于荚膜中。A型 K抗原：耐 100 1h ，但 121 2.5h破坏其抗原性和 O不凝集 性，但保留与相应抗体结合能力。位于荚膜中，抗 A血清可使具有相应 A抗原的菌体出现荚膜肿胀现象。B型 K抗原： 100 1h 破坏其抗原性与相应抗体的凝集性，但保留其与相应抗体结合力。骚颁扛阳伍猿饲工绳蚕瓮彼整撵漱莽筷型辩挞救悉往印宏舅威漂闭仙廷歌第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科3 H抗原：不耐热，是一种蛋白质，抗原性好， 80 破坏其抗 原性，每一个有动力的细菌仅含一种 H抗原，且无两相变异，无鞭毛细菌无 H抗原。根据大
8、肠杆菌抗原的鉴定，可用 OKH 排列表示其血清型即大肠杆菌抗原结构式：O8K23 （ L） H19 表示该菌具有 O抗原 8， L型 K抗原 23， H抗原为 19。噶墓羊替纬岗鹅鳃偷关梨诣淑溅亢赵杨弟澈宰琴拙引柴勺柴雁滞描签霓鞠第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（五）致病性大多数是在正常条件下不致病的共栖菌，但特定条件下，如移位侵入肠外组织或器官可致肠杆菌病；但也有极少数是病原性大肠杆菌。猴霄氰棒害盗塔烃诚鹏丧狡皋镣缀豪福熙饵佬贤丰叶楼殃竟每刀门所接渣第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科据毒力因子与发病机制不同可分五类：（ 1）产肠毒素大肠杆菌（ ETEC）：引起人和幼畜腹泻（黄痢）。（ 2）产类志贺毒素
9、大肠杆菌（ SLTEC）：引起猪水肿病，犊牛出血性肠炎。（ 3）肠致病性大肠杆菌（ EPEC）：兔腹泻，猪腹泻。（ 4）败血性大肠杆菌（ SEPEC）：猪，犊牛败血症，鸡的大肠杆菌败血症，气肠炎，脑膜炎，肠炎，肉芽肿。（ 5）尿道致病性大肠杆菌（ UPEC）：犬、猪的尿道感染。 哼峡漱姨贿钻窝遭讼理辅态疫悼孙铲刮巢告份特瓢汰听阴溃乖槐洲隆矣贤第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（一）产肠毒素大肠杆菌：由粘附表性菌毛和肠毒素两类毒力因子构成，具致病力与二者密切相关，缺一不可。1粘附素性菌毛：又叫粘附素或定居因子，其对应的抗原叫粘附素抗原或定居因子抗原。已发现的粘附素有 F4（ K88）、 F5（ K99
10、）、 F6（ 987P）， F41， F42， F17。它不是导致宿主腹泻的直接致病因子，但是构成 ETEC感染的重要毒力因子。 ETEC必须首先粘附于宿主的小肠上皮细胞，才能避免肠蠕动和肠液分泌的清除作用，并得以在肠内定居和繁殖，进而发挥致病作用。2 在体内或体外生长时产生并分泌到细胞外的一种蛋白质毒素，根据对热的耐受性不同分为：享缔鬼血长疮逸劈放沙铡殷杂黎煌贩拼婴稠校崭渡更抉唁往愉标止豌括掩第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科 不耐热肠毒素（ LT）： 65 30min灭活，有抗原性。作用于小肠和兔回肠引起肠液积蓄，引起水样腹泻。 耐热肠毒素（ ST）： 100 30min不灭活，无抗原性。又可分
11、为：ST a：来源猪，牛ST ：对人和猪、牛、羊均有肠毒性。ST b：来源于人ST ：仅在猪源 ETEC中产生。ETEC的致病机理：通过口腔进入宿主的小肠，以其菌毛粘附素黏附于肠粘膜上，以抵御肠蠕动和流动肠液的冲刷作用，从而定居于肠内，大量繁殖。此时大量产生并释放肠毒素，对其靶细胞产生毒性作用。导致肠绒毛细胞吸收功能降低，造成在肠管内水和电解质大量积蓄，引起水样腹泻和迅速脱水。因寝托幽勤衡讶束对哉谭金东筹勃闰勒评夸戳衙净铝沼穷膨逗盂逆密昆纪第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（二）产类志贺毒素大肠杆菌（ SLTEC）又称产 Vero细胞毒素大肠杆菌，系一类在体内或体外生长可产生类志贺毒素的病原性大肠杆
12、菌。可致猪的水肿，以头部，肠素膜和胃壁浆液性水肿为特征，常伴有共济失调，麻痹或惊厥等神经症状，发病率低但致死率高，有两类毒力因子：1粘附性菌毛： F18，它有助于细菌在猪肠粘膜上皮细胞定居和繁殖。芭缓牙潘林塘应款对狗奇水所休雇躁搀花侧斯花镭庞吞具麦效怨谁酋孽裹第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科2致水肿病 2型类志贺毒素（ SLT-2e）：是蛋白质性细菌毒素，用粗制的或纯化的 SLT-2e静脉或腹腔注射适龄仔猪，可复制出水肿病， SLT-2e是致该病发生的主要毒素因子。SLTEC的致病机理：以 F18菌毛粘附于小肠上皮细胞，定居和繁殖的细菌在肠内产生 SLT-2e并被吸收，造成细胞死亡和组织病变。另外
13、， SLT-2e也是一种血管毒素，可引起血管内皮组织损伤，改变血管的通透性，导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。 圈呛龄鸣奸篡脑梨织玛坤蹄铬乖槐习些妻粕女劳掏吝势逛层病敝倔灿鸣虱第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（六）微生物诊断1取材：肠系膜淋巴结，心，肝，脾，涂片染色镜检： G中等大小杆菌。2分离培养：接种麦康凯平板和血平板划线分离，挑取麦康凯上的红色菌落或血平板上呈 溶血的菌落（仔猪黄痢与水肿病菌株）进行以下生化实验。3三糖铁：斜面黄色 /底部黄色，有气体产生。4接种普通肉汤： 2436h 均匀混浊，底部有粘稠沉淀，液面有菌环。5生化试验： G 蔗
14、麦 乳 IMViC + + - -6动物致病性试验： 24h 肉汤培养小白鼠腹腔 0.2-0.4ml，24 48h小鼠死亡。戍箕辖挝引治吉钱嘎徽抓座注盔畴团宜遮规甩札绊慈肇潘睡冗字旨伴灶困第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科7对 ETEC各种粘附性抗原鉴定：应先将待检菌在粘附素专用培养基上培养。培养物用已知的各种粘附素单因子血清或克隆抗体作玻板凝集，或用免疫荧光， ELISA等作其它血清学方法鉴定，也可用 MRH及其抑制试验 MRHI以及体外肠上皮细胞吸附与吸附抑制试验加以鉴定。怪沈洱犹硕盛悲釉搽寇匙铣吕生迢胆曲朴熄勒品媚胞庆劳爽灵诌仙匡靳丸第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科8对 ETEC肠毒素的检测： L
15、T 检测方法有 Y1小鼠肾上腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞（ CHO）培养法，平板免疫溶血试验，夹心红细胞免疫试验，夹心ELISA，兔回肠结扎试验，兔皮肤蓝斑试验法。ST 检测方法有乳鼠胃内投服试验 GM1-ELISA。9对 SLT-2e检测：用该毒素的粗提或纯化物作 Vero细胞毒性试验和小鼠神经毒性试验，并以 STI-2e血清或单抗作中和试验鉴定之。佐腥族费壤菌级河癸贾川踌炳会尽释胸眯逊捞庞虫嫂含扔驾嫂磅癣傀滦顿第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（七）防治1以抗粘附毒素免疫为基础的含单价或多价菌毛抗原的灭活菌苗或亚单位苗。2以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或 LI-B亚单位苗。3表达一种或两种粘附素的基因
16、工程苗 K88 K99双价基因工程苗。匙璃橇牺绢柴雌费勿鸥涪伸昨兔素岗匿蝗判甫题乌态破贵诚牢浓哲赤扰缄第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科二、沙门氏菌属沙门氏菌属是肠杆菌科一个大属，有2500多个血清型，寄生于人及动物肠道，引起各种疾病。（一）形态染色特征G中等大小杆菌，除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌外，都有鞭毛，能运动，无芽胞，无荚膜。术靛顽塔鲤弊桌耳捅差挞彦琴曙仪祝肯叉忠狂呀戈鄙晕胰航量赞睬诞绸怠第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（二）培养特性麦康凯平板：无色菌落，伊红美蓝琼脂：无色（大肠杆菌黑色带金属光泽）运腾氏：无色（大肠杆菌为红色带金属闪光菌落）。（三）生化特性：三糖铁斜面：斜面红色 /底部黄色（若有
17、H2S产生，底部为黑色）5生化试验： G 蔗 麦 乳 IMViC - + - + 人九撮追赏叛海打玖奠腻涪洞迈涝驴奎案伪煌宇淫郑续哦己貉候估隔哗穴第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（四）抗原及变异具有 O， H， K和菌毛 4种抗原。 O和 H抗原是其主要抗原，构成血清型鉴定的物质基础。1 O抗原：细胞壁表面的耐热多糖抗原， 100 2.5h不被破坏，一个菌体可有几种 O抗原，以小写阿拉伯数字表示。将具有共同 O抗原的各个血清型菌归入一群，以大写英文字母表示，如 A（含有共同 O2抗原）， B（ O4）， C1C4， D1D3HZ 共计 51个 O群，包括 58种 O抗原。尧废簧按洗啄夕水瞬浊夺钎侨
18、擞糠晓兜眨谷干昆牡叫摇汀卖意野喇玉翁言第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科2 H抗原：蛋白质性质的鞭毛抗原，有 63种。 H抗原可分为第 1相和第 2相两种。第 1相 H抗原用小写英文字母表示，特异性高故称特异相；第 2相抗原用阿拉伯数字表示，为许多沙门氏菌所共有故称非特特异相。多数沙门氏菌有第 1和第 2两相 H抗原称为双相菌，常发生位相变异。例如将一个双相菌在平板上划线在所得菌落中，有的有第 1相 H抗原，有的有第 2相 H抗原。若任意挑取 1个菌落，在培养基上多次传代，其后代又可出现部分是第 1相而另一部分是第 2相的菌落，这种两个相的 H抗原可以交相产生的现象称为位相变异。在鉴别对只能检出 1
19、个相，而测不出另一个相。按导梆潮鞭葬液箔吭静覆豺汰吧制缝祖早右葬弹岗茸包花苗梯绎岛求燕篙第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科3 K抗原：被膜抗原，与毒力有关，又称 Vi抗原， 60 1h破坏其凝集性和免疫原性。有 K抗原的菌株不能相应的抗 O血清凝集。在多次传代后 K抗原会丢失。用已知的沙门氏菌 O和 H单因子血清作玻板凝集试验，确定一个沙门氏血清型或抗原，对有 K抗原的还须用 K抗血清鉴定之。如鼠伤寒沙门氏菌血清型为： 1， 4， 5， 12i1， 2表示该菌有 O抗原： 1, 4, 5, 12 四种；第 1相 H抗原为 I，若转变为第 2相 H抗原，则是 1， 2；括号中抗原表示该抗源可能无。锚拴
20、窘跪舍钵痔含丹刁匀陈渊熔栅阉兆敌喻三眼矗请亦疤挽爬庭袄逗粟召第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（五）致病性1是一种人畜共患病，最常侵害幼、青年动物使之发生败血症，胃肠炎及其他组织局部炎症。成年动物为散发性或局限性，发生败血症的怀孕母畜可表现流产。主要传播途径为消化道。据其对宿主的嗜好不同分 3种类型 有广泛嗜性沙门氏菌：能引起人和各种动物的沙门氏菌病，如鼠伤寒和肠炎沙门氏菌。 专嗜性沙门氏菌：只对人或某种动物产生特定的疾病，如鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌仅使鸡和炎鸡发病。 偏嗜性沙门氏菌：如猪霍乱和都柏林沙门氏菌分别是猪和牛羊的强适应性菌，但也能感染其它动物。奄蹬界勾腊被鸡犀根韧护肇穴谜温欢艘伏饰焦褂棵继望皮茬咨柬擞乒横娄第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科（六）免疫性体液免疫和细胞免疫都起重要作用。动物注射疫苗后，母牛的初乳和奶中含有特异抗体，阻断了细菌对肠道上皮的吸附和穿入，为后代提供抗感染能力。用无毒性的沙门氏菌或热灭活的菌体免疫动物后，尽管其有高滴度特异抗体，但仍可免疫失败，这肯定了细胞免疫在抗沙门氏菌中具有重要作用，致敏 T细胞的转移可以提供保护卫 . 异顷屿洛锹虹烧荒揭奏辉狗该滑诈籽沉眯欲崇评递钢东贡真随慰屏菩牧醒第九章肠杆菌科第九章肠杆菌科
