1、加速溶剂萃取-离子色谱分离脉冲安培检测茶叶中的游离糖摘要：本文建立了高效阴离子交换-脉冲安培检测器（HPAEC-PAD）方法用于茶叶中的游离糖类的分析。采用加速溶剂萃取（ASE）,KOH 梯度淋洗，在 Dionex CarboPac PA-10 色谱柱上分离.该方法具有良好的重现性和较低的检测限。 关键词： ASE 离子色谱 脉冲安培检测 茶叶 糖1 前言糖是生物环境中含量最多的有机化合物之一，在许多生命体系中起着重要作用。糖类化合物的分析对生命科学、食品科学、药物学、农业科学都有着重要意义 1，2 。茶叶中的糖类物质占干物质的 2025 ，除构成细胞壁的纤维素、木质素，果胶质外，还有部分游离
2、糖、结合态糖脂，蛋白糖等多糖。由于糖类不是茶叶的特征物质，所以对茶叶中的糖类物质的研究不象多酚类、咖啡碱那样系统、深入，但糖类是茶叶中三大自然物质之一。它的代谢直接或间接地影响其它物质的含量，而且随着人们对多糖类物质的功能作用的认识，茶叶中的糖类物质已引起人们越来越多的兴趣 2。 本文通过对各种茶叶中的糖类的提取方法，测定方法进行研究。选择了最简便的预处理方法、合适的离子色谱条件, 可同时测定茶叶中多种游离糖类。该方法具有重现性好、快速、准确等特点。 2 实验部分2.1 仪器和试剂仪器：ICS-2000 型离子色谱仪(美国 Dionex 公司) ，Dionex CarboPac PA-10(4
3、50mm)分离柱，Dionex CarboPac PA-10(4250mm)保护柱，加速溶剂萃取仪(ASE-100 ，美国Dionex公司)，ED40 电化学检测器(脉冲安培检测方式) ，用 Chromeleon 6.8 色谱工作站记录并分析数据。 试剂:试剂均为优级纯或分析纯 , 实验用水全部为 Milli-Q 水(18.2Mcm) ，过0.22m 滤膜以除去颗粒物。为防止微生物生长改变标准溶液浓度，用 20mg/L NaN3 水溶液配制糖的标准溶液。糖的标准储备液均配制成浓度为 1000 mg/L 溶液。工作溶液逐级用20mg/L NaN3 水溶液稀释。当天使用,当天稀释配制。 2.2 色
4、谱条件 采用 KOH 梯度淋洗方法,0-35min,18 mM KOH;35-40min,100mM KOH;40-45,18mM KOH,流速 0.6 mL/ min。脉冲安培检测器工作电极为 Au 电极,参比电极为 Ag/ AgCl 电极, 进样量为 25.0L ,以保留时间定性,峰面积定量。电化学检测器的波形条件：0.00 S，0.10 V；0.20 S，0.10 V，积分开始；0.40 S，0.10 V，积分结束；0.41 S，-2.0 V；0.42 S，-2.0 V；0.43 S，0.60 V；0.44 S ， -0.1 V；0.50 S ，-0.1V。 2.3 样品前处理 用去离子
5、水作为萃取剂，加速溶剂萃取经过研磨的茶叶样品。将萃取得到的样品用去离子水稀释一定倍数。过 Onguard RP 柱和 0.22m 滤膜后注入色谱系统进行分离分析，从色谱柱流出的被分析物在 ED40 电化学检测器上被检测。 3 结果和讨论 本文用去离子水为萃取溶剂，不同品牌的茶叶为研究对象，考察了淋洗液的浓度已经流速对各种糖类的分离情况的影响。结果表明当淋洗液的浓度为 18 mM，流速为 0.6mL/min时可以获得满意的结果。下图为某品牌的茶叶的分离图。 参考文献 1 朱岩, 梯度淋洗离子色谱法测食品中的糖类J. 分析仪器 , 1990, (3) : 43- 46. 2 于弘，牟世芬，高效阴离子交换色谱一积分脉冲安培检测法分析糖类化合物影响因素的研究J. 分析科学学报， 2007,23(6):637-641 3刘霞林，茶叶中糖类研究进展J ，福建茶叶，2004，3 ：27
