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微生物基础.doc

上传人:jinchen 文档编号:7620971 上传时间:2019-05-22 格式:DOC 页数:5 大小:58.50KB
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资源描述

1、1微生物1 微生物的概念、特点? 微生物的三种类型?各种类型包括的种类?概念:微生物是个体微小、结构简单、肉眼不能直接看见的微小生物的总称,必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍、等才能观察到。特点:个体微小、结构简单 比表面积大、吸收多、转化快 繁殖快、代谢强 适应强、易变异 种类多、分布广类型:非细胞型微生物(最小):包括病毒、类病毒、软病毒原核细胞型微生物:包括古菌、细菌、蓝细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体真核细胞型微生物(最高等):真菌、单细胞藻类、原生动物2 细菌大小的测量单位?细菌的基本形态?测量单位:通常是微米(um) ,1um=1/1000mm,一般球菌

2、的直径为 1.0um 左右基本形态:球菌杆菌螺形菌3 细菌的基本结构?细胞壁的主要化学成分?基本结构:各种细菌共同具有的结构,由外向内依次为:细胞壁、细胞膜、细胞质和核质等主要化学组成:肽聚糖 (磷酸壁 外膜层)4 细菌的特殊结构?各种特殊结构的特点、意义?如何观察细菌的特殊结构?特殊结构 特点 功能(意义) 如何观察鞭毛 是从胞质延伸到胞壁外的细长呈波浪形弯曲的丝状物是细菌的运动器官与细菌致病性有关与细菌鉴定、分类及分型有关经特殊鞭毛染色后,才能在光学显微镜下看到;或用电子显微镜直接观察菌毛 主要出现在革兰阴性菌,比鞭毛更细、短、直的丝状附属物普通菌毛:具有粘附性,与细菌的致病性密切相关 性

3、菌毛:是两菌之间传递遗传物质的通道需用电子显微镜才能看见荚膜 胞壁外的黏液性物质,并受环境影响抗吞噬抗杀伤能力抗干燥的作用与致病有关细菌鉴别和分型的依据免疫原性若厚度在 0.2um 以上,经格兰染色、负染色法染色,用普通光学显微镜观察;若厚度小于 0.2um,可用电镜观察芽胞 保留原菌活性细菌的休眠体可转变成繁殖体增强细菌抵抗力可成为某些疾病潜在的病源半段灭菌效果的指标鉴别细菌用芽胞染色法着色,再用普通光学显微镜观察5 L 型细菌的形态特点?主要培养特点?形态特点:多形性可见球状、杆状和丝状,大多数染成革兰阴性,细胞壁染色可见缺壁浓染的菌体。培养特点:普通培养不生长细菌 L 型在普通培养环境中

4、不能耐受菌体内部的高渗透压而易破裂死亡,但在含 10%-20%人或马血清的高渗低琼脂培养基中能缓慢生长,形成中间2较厚,四周较薄的荷包蛋样细小菌落。6 细菌主要的物理性状有哪些?带电现象 光学性质 渗透压 半透性 表面积7 细菌生长繁殖所需营养物质种类?水 碳源 氮源 无机盐 生长因子8 按对氧气的需求不同,将细菌分为哪几类?各类的特点及培养方法?分类 特点 培养方法专性需氧菌 具有完整的呼吸酶系统,需要分子氧作最终受氢来完成呼吸作用需在有氧环境中培养专性厌氧菌 缺乏完整的呼吸系统,不能利用分子氧且游离氧对其有毒性作用只能在无氧环境中培养兼性厌氧菌 既能进行有氧氧化又能进行无氧发酵无氧有氧均可

5、微需氧菌 氧浓度大于 10%对其有抑制作用在低氧环境中培养9 细菌生长繁殖的条件?方式?条件:充足的营养物质、适宜的酸碱度、合适的温度、必要的气体环境方式:细菌一般以无性二分裂方式进行繁殖10 细菌生长曲线及其分期?生长曲线:以培养时间为横坐标,活菌数的对数为纵坐标所绘制的一条曲线。分期:迟缓期 对数期 稳定期 衰亡期11 细菌主要合成代谢产物及其作用?热质原(可导致机体发热)毒性与侵袭性酶类(与细菌致病性有关)色素(有助于鉴定细菌)抗生素(可用于治疗疾病)细菌素(可对细菌分型)维生素(可供人体使用)12 细菌在自然界的分布?正常菌群在人体的分布及其对人体的生理功能?自然界:土壤中的细菌 水中

6、的细菌 空气中的细菌人体:体表、与外界相通的腔道(上呼吸道、口腔、泌尿生殖道)功能:生物拮抗作用 营养作用 免疫作用 抑癌作用13 条件致病菌的形成条件?寄居部位改变 免疫功能下降 菌群失调14 细菌形态检查的工具、方法?工具:显微镜方法:细菌染色标本镜检、细菌不染色标本镜检15 不染色标本检查的方法及主要用途?方法:压滴法、悬滴法、暗视野聚光法、相差显微镜检查法用途:观察细菌的动力和运动方式16 细菌涂片染色的基本步骤、固定目的?步骤:涂片干燥固定染色镜检目的:使细菌的蛋白质凝固,杀死细菌,改变细菌对染料的通透性,有利于细菌细胞着色,并使菌体与玻片粘附牢固,保持细菌原有的形态结构。17 格兰

7、染色法的方法步骤、结果、意义、影响因素?3步骤:涂片干燥固定结晶紫初染 1min卢戈碘液媒染 1min95%乙醇脱色 30s稀 释苯酚复红复染 30s镜检结果:紫色为革兰阳性菌 红色为革兰阴性菌意义:鉴别细菌 选择治疗用药 与细菌致病性有关影响因素:操作因素 染液因素 细菌因素18 培养基的种类及其用途?按物理性状分:a 液体培养基:常用于增菌培养或纯培养后观察细菌的生长现象b 半固体培养基:常用于保存菌种及观察细菌的动力c 固体培养基:用于细菌的分离纯化、监督及药敏试验按用途分:a 基础培养基:用于细菌检查b 营养培养基:用于营养要求较高细菌和需要特殊生长因子细菌的培养c 鉴别培养基:用以观

8、察细菌的生化反应d 选择培养基 e 特殊培养基19 培养基制备的基本程序?常用接种技术的用途与常用培养方法?程序:调配 溶化 矫正 PH 过滤澄清 分装 灭菌 检定 保存常用技术用途:a 平板划线法(分区划线:用于含菌量较多的细菌标本的接种连续划线:用于含菌量较少的标本) b 斜面接种法:用于纯种真菌及保留菌种或生化反应。c 穿刺接种法:用于半固体培养基或细菌生化反应用鉴别培养基的接种。d 液体接种法:多用于普通肉汤,蛋白胨水等液体培养基的接种。e 倾注平板法:用于水、牛乳、饮料及尿液等液体。培养方法:普通培养 CO 2培养 厌氧培养20 细菌在固体平板、半固体、液体培养基中的生长现象?固体平

9、板:菌落或菌苔半固体:有鞭毛的沿穿刺线扩散生长,无鞭毛的沿穿刺线生长。液体:浑浊、沉淀、菌膜21 高温灭菌的原理?常用高温灭菌法、紫外线灭菌法的用途?原理:高温可使细菌的蛋白质及酶类变性凝固、核酸结构被破坏从而导致细菌死亡。高温:紫外线:室内空气灭菌或一些物品表面的消毒。22 影响消毒剂作用的效果因素?消毒剂的性质、浓度和作用时间不同 微生物的种类和数量 温度与酸碱度 环境中化学拮抗物质的存在。23 噬菌体的种类及其感染细菌后的结果?如何观察噬菌体对细菌的裂解现象?种类:毒性噬菌体、温和噬菌体结果:裂解细菌 形成溶原状态现象:毒性噬菌体裂解细菌后在平板上可出现无菌生长的噬菌斑在液体培养基中可导

10、致浑浊的菌液变澄清。24 细菌常见变异现象及其在医学实践中的意义?变异现象:形态与结构变异 菌落变异 毒力变异 抗原变异 耐药性变异 酶活性变异意义:传染病法诊断方面应用(以免造成误诊、漏诊) 在传染病预防方面的应用(提高机体特异性免疫力) 在传染病预防方面的应用(有利于指导正确选择抗菌药物和防止耐药菌株扩散) 在基因工程的应用425 细菌遗传物质的种类?质粒的主要特点?种类:细菌染色体 染色体外 DNA(质粒、转座因子)特点:具有自我复制的能力 可决定细菌的某些遗传性状 可从宿主细胞中消失 具有转移性26 与细菌致病有关的因素?病原菌的感染途径?感染类型?因素:病原体的毒力 侵入机体的数量

11、侵入门户及机体的免疫力 环境因素感染途径:呼吸道感染 消化道感染 皮肤黏膜、创伤感染 接触感染 虫媒感染血液传播 垂直感染类型:外源性感染 内源性感染27 KIA 培养基中反应现象的观察与报告?培养基斜面变黄为发酵乳糖(即+或 A) ,变红为不发酵乳糖(即-或 K) 培养基底层变黄为发酵葡萄糖(即+或 A) ,若出现裂隙则为发酵葡萄糖产气(即 O) ,变红为不发酵葡萄糖(即-或 K) 培养基底层有黑色沉淀则为硫化氢试验阳性(即硫化氢+)28 药敏试验纸片扩散法的主要实验材料、方法与结构判断?实验材料:培养基 抗菌药物纸片 菌液方法:接种 贴放药物纸片 培养结果判断:量取实验菌株的抑菌圈直径据

12、CLSI 标准,对抑菌圈直径作出敏感、耐药、中介的判断29 医院感染的流行病学的特点?常见微生物及其特点?监测的主要对象?特点:感染源:医院内已感染的患者 动物感染源 环境感染储源 未彻底消毒的医疗器械感染途径:接触传播 空气传播 共同媒介物传播 昆虫传播易感者:机体免疫力低下的人 菌群失调者常见微生物【】监测的对象:重点科室的监测(a 手术室和重症监护病房 b 新生儿室 c 血液透析室 d中心供应室 e 血库 f 临床注射治疗室和临床实验室) 空气中细菌含量的监测 物体表面细菌污染监测 医护人员手细菌监测 医疗用品细菌监测 使用中消毒剂与无菌器械保存液细菌监测30 结核分枝杆菌的抗酸染色方法

13、及结果?主要形态、培养、致病特点?结核分枝杆菌抗酸染色方法 染色结果 主要形态 培养特性 致病特点1 涂片自然干燥后,火焰固定 2 滴加苯酚复红染液初染,加热媒染 3 滴加3%盐酸酒精脱色剂脱色 4 滴加亚甲蓝染液复染 5 镜检1 抗酸杆菌阴性(-):连续观察 300 个不同视野,未发现抗酸杆菌 2 报告抗酸性杆菌菌数1-8 条每 300 个视野 3 抗酸杆菌阳性(1+):3-9 条每 100视野 4 抗酸杆菌阳性(2+):1-9 条每 10 视野 5 抗酸杆菌阳性(3+):1-9 条每视野 6 抗酸杆菌阳性(4+):=10 每视野直或弯曲、两端钝圆、菌体细长的杆菌,无芽胞,无鞭毛无荚膜生长缓

14、慢为专性厌氧菌,生长需一定湿度,最适PH:6.5-6.8,营养要求较高产生细胞免疫,迟发型超敏反应对机体造成损伤31 厌氧菌的分布、标本采、送原则与注意事项?分布:多存在于人和动物的口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等处。5采集要遵循不能被正常菌群污染、尽量避免空气的原则;采集后应立即送检。注意事项:运送到实验室后应在 30 分钟内处理完毕,最迟不超过两小时。32 破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、肉毒梭菌的主要形态与培养特性?主要形态 培养特性破伤风梭菌 菌体细长呈杆状,有鞭毛无荚膜,芽胞呈正圆形,宽于菌体,位于菌体顶端,细菌呈鼓槌状严格厌氧,在普通培养基上不易生长。在血平板上可呈薄膜状生长,菌落半透

15、明、灰白色。在庖肉培养基中,肉渣部分消化,微变黑,产生少量气体,有腐败性恶臭产气荚膜梭菌 为革兰阳性粗大杆菌,芽胞呈椭圆形,直径小于菌体,位于次极端。无鞭毛,在机体内可形成明显的荚膜厌氧,繁殖迅速,在血琼脂平板上培养 24 小时,形成圆形、凸起、表面光滑、边缘整齐丝袜菌落。 在卵黄琼脂平板上,菌落周围出现乳白色浑浊圈。 在庖肉培养基中生长迅速,产生大量气体。 在牛乳培养基中,能分解乳糖产酸产气肉毒梭菌 为革兰阳性粗短杆菌,单独或成双排列,芽胞呈椭圆形,宽于菌体,位于菌体次极端,细菌呈网球拍状。有周身鞭毛,无荚膜。严格厌氧。在普通琼脂平板上,形成不规则菌落,能产生酯酶;在血平板上,有 溶血;在卵黄琼脂平板上,菌落周围出现浑浊圈。

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