1、脑脊液常规检查简易操作程序一、一般性状检查观察颜色、透明度、有无凝块，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。二、潘氏(Pandy)球蛋白定性试验取 5苯酚溶液 23m1，置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液 l 一 2 滴，衬以黑背景，立即观察结果。结果判断阴性：清晰透明，不显雾状。极弱阳性(土)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。弱阳性(十)：灰白色云雾状。阳性(2 十)：白色浑浊。强阳性(3 十)：白色浓絮状沉淀。最强阳性(4 十)：白色凝块。三、细胞计数 （一） 、细胞总数1、对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数 10 个大方格内红、白细胞数，其总和即
2、为每 l 的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞10，即得每 l 脑脊液中细胞总数。如用升表示，则再乘以 106。2、浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液 20l，加入含红细胞稀释液 0.38m1 的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数 4个大方格中的细胞总数，乘以 50，即为每 l 脑脊液的细胞总数。（二） 、白细胞数1、非血性标本：小试管内放入冰乙酸 12 滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液 34 滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。2、血性标本：将混匀的脑脊液用 1冰乙酸溶液
3、稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正：每 l 脑 脊液内白 细胞校正数每 l 脑脊液内白细胞未校正数每 l 脑脊液内内红细胞数每 l 血液内白细胞- 每 l 血液内红细胞（三） 、细胞分类在高倍镜下根据细其胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，计算出百分率。如直接分类不易区分细胞，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物 2 滴，加正常血清 l 滴，推片制成均匀薄膜，置室温或 37温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。四、三大染色（一） 、革兰氏染色1、将脑脊液立即离心沉淀，取沉淀物涂片 2 张。2、涂片应在室温中，或置 37温箱中干燥，用火焰固定。3、加
4、结晶紫染 1min，清水冲去染液，倒去玻片上水。4、加碘液染 1min，水冲。5、加脱色液（75%乙醇） ，不时摇动 1030s，至无紫色脱落为止，水洗。6、加复染液，染 30s，水洗。干后镜检。7、报告：涂片找到“革兰氏阴(阳)性细菌” ，或未见革兰氏细菌。（二） 、抗酸染色石炭酸复红染色法：1、涂片经火焰固定后，加石炭酸复红溶液，徐徐加热至有蒸气出现，切不可沸腾。染色 5min，冷却后水洗。2、加脱色剂，不时摇动玻片至无红色脱落为止，水洗。3、加复染液，染 0.51min，水洗。4、干后镜检。分枝杆菌呈红色，背景为蓝色。金永染色法：1、涂片固定后加第 1 液 510min，不必加热。2、弃
5、去第 1 液后水洗，加第 2 液（脱色液）脱色至无红色脱落为止，水洗。3、加第 3 液（复染液）复染 30s，水洗，待干，油镜镜检。抗酸菌染成红色，非抗酸菌及细胞染成谈蓝色。单张涂片抗酸染色阳性率较低，但如果检查涂片增至 4 张，阳性率可达80%以上。报告：涂片发现“抗酸杆菌”或“未见抗酸杆菌” 。（三） 、墨汁染色-真菌检查-新形隐球菌检查1、取脑脊液，以 2000rmin 离心 10min，以沉淀物作涂片，加优质经过滤的细墨汁 l 滴，混合，加盖玻片检查。2、先用低倍镜检查，如发现在黑色背景中有圆形透光小点，中间有一细胞大小的圆形物质，即用高倍镜仔细观察结构，新形隐球菌直径 520m，可见明显的厚膜，并有出芽的球形孢子。每次镜检用空白墨水滴作为对照，以防墨汁污染。3、报告：涂片发现“新形隐球菌” 。
