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HIV-1_p24抗原ELISA检测试剂盒说明书.doc

上传人:j35w19 文档编号:7547315 上传时间:2019-05-21 格式:DOC 页数:1 大小:30.50KB
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1、HIV-1 p24 抗原 ELISA 检测试剂盒说明书本试剂盒采用夹心法原理检测人血清/血浆、培养物上清中的 HIV-1 p24 抗原,预先采用 p24 单克隆抗体包被固相微孔板。若样本中含有 HIV-1 p24 抗原,则与包被板结合,再加入生物素(Biotin,Btn)标记p24 多克隆抗体,反应后再加入辣根过氧化物酶标记的亲和素(SA-HRP) ,结合形成夹心复合物,洗涤除去未结合的酶标记物,加入 HRP 底物液,读数测量,根据临界值判断样本中是否含有 HIV-1 p24 抗原。试剂组分1. 包被板:包被有抗 HIV -1 p24 抗体的 96 孔酶标板, 28保存。2. 阴性对照:1.0

2、mL/瓶;含正常人血清,防腐剂和色素,28保存。3. P24 抗原阳性对照:1.0mL/瓶1 瓶;含基因工程 P24 抗原的人血清,防腐剂和色素,28保存。4. 结合物 1:含有生物素标记的 P24 多克隆抗体(Btn-P24 抗体)5. 结合物 2:含有辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(SA-HRP)6. 底物液 A: 7. 底物液 B:8. 终止液:9. 浓缩洗涤液: 10.封板膜:11.说明书:1 份。操作程序1 实验设计:将包被板从密封袋中取出,根据所需数量在板架上放好微孔板条。设空白对照一孔,阴性对照两孔,P24 抗原阳性对照 2 孔,HIV 抗体阳性对照 2 孔。2 加结合物 1:每

3、孔加入结合物 1 25L。3 加样:依次加入样品、阴性对照、P24 抗原阳性对照 75L。4 温育:用微量震荡器充分振荡混匀,用封板膜封盖反应板,37温育 60 分钟;5 洗板:撕去封板膜,吸干微孔板中所有液体,每孔加入稀释好的洗涤液 400L,浸泡至少 30 秒,吸干。如此洗板 5 次,最后在干净的吸水纸上拍干。6 加酶:空白孔除外,每孔加入结合物 2 100L。7 温育:用新的封板膜封盖反应板,37温育 30 分钟。8 洗板:撕去封板膜,如上述洗板方法洗涤 5 次,最后在干净的吸水纸上拍干。9 加底物液: 每孔加入底物液 A 50L,底物液 B 50L,用微量震荡器充分振荡混匀,37避光温育 15 分钟。10 加终止液:每孔加入终止液 50L。11 检测:双波长测量本试剂盒仅供科研使用

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