1、MMP 2、IL 18 在口腔鳞癌中的表达及其临床意义作者：比力克孜玉素甫,侯向萍 黄雯,罗海鹏 田刚【摘要】 目的 研究口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)中 MMP 2、IL 18 的表达水平，阐明其与口腔鳞癌的关系。 方法 采用免疫 组化法对 50 例口腔鳞癌标本和 12 例对照标本中 MMP 2、IL 18 的表达量检测并进 行比较。结果 正常黏膜、低分化、中分化、高分化之间的 MMP 2、IL 18 阳性表达均有显著性差异（P 0.01），并且有随病理分 级的上升而升高的趋势。MMP 2和 IL 18 表达呈正相关（P0.05）。结论
2、MMP 2 和 IL 18 的表达与 OSCC 的生物学行为 关系密切，对尽早了解癌侵 袭、转移情况有所帮助。 【关键词】 口腔鳞状细胞癌；基质金属蛋白酶 2 ；白细胞介素 18口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)是口腔颌面部最常见的恶性肿瘤，且发病率逐年增加。目前主要依据影像学和组织学检查进行诊断，对人体有一定的伤害，寻找敏感性和特异性强的血清肿瘤标志物提高临床诊断效率是当前的研究热点。单项肿瘤标志物检测口腔鳞癌有一定的局限性，而几个指标联合检测将极大提高诊断的敏感性和准确性1。本研究采用基质金属蛋白酶 2(matrix metallo pmt
3、eineases，MMP 2)和白细胞介素 18（IL 18）联合检测口腔鳞癌，探讨其与口腔鳞癌病变程度的关系，现报道如下。资料和方法 1.病例资料 来自本院病理科 2005 年 5 月至 2006 年 12 月证实为口腔鳞状细胞癌的患者(排除过敏、糖尿病及免疫疾病者 )50 例，同时收集 12例正常口腔黏膜组织作为对照。病理形态与生物学行为分为 3 级即高分化、中分化和低分化。2.试剂 鼠抗人 MMP 2 抗体、兔抗人 IL 18 多克隆抗体（1 200 稀释）、二抗采用生物素标记 IgG，均购自 DAKO 公司，由博士德生物技术有限公司提供。链亲和素 过氧化物酶（SP）试剂盒购自迈新公司。
4、3.免疫组织化学染色法 组织石蜡包埋,4 m 厚切片,常规处理后,微波炉抗原修复,依次加入稀释的一抗(工作浓度均为 1100)、生物素标记二抗、SABC,DAB 显色、苏木素复染,用已知阳性片作阳性对照,PBS 代替一抗作空白对照。4.结果判读标准 MMP 2：染色阳性 为胞浆内出现棕色和棕黄色。显微镜下组织被染成棕黄色的为（+ ），阳性 细胞数40%；成棕色 为（+），阳性细胞数 40%80%；成深棕色（+），阳性细胞数 80%；组织没有着色为阴性2。IL 18 ：阳性表达定位于细胞浆，呈浅黄色至深棕色。阳性判定标准：依据阳性细胞数和阳性反应强度两项指标：阳性着色细胞数25% 定为阳性表达；
5、 阳性反应强度以浅黄色为弱阳性定为（+）、黄色或棕黄色为中等阳性定为（+）、棕色或者深棕色为强阳性定为（+），无棕黄色或与背景着色一致为阴性。5.统计学处理 检测结果采用 SPSS 软件处理， 组间比较行卡方检验，两因素间行相关性分析，以 P0.05 为有统计学意义。结 果 1.MMP 2、IL 18 的表达与病理分级的关系 正常黏膜、低分化、中分化、高分化之 间的 MMP 2、IL 18 阳性表达均有显著性差异（P0.01），并且有随病理分级的上升而升高的趋势。见表 1。表 1 MMP 2 和 IL 18 的表达与病理分 级的关系（略）2.口腔鳞癌 MMP 2、IL 18 表达间的关系 在
6、50 例口腔鳞癌中 MMP 2 和 IL 18 二者共同阳性 20 例，二者共同阴性 8 例。二者表达经相关性检验呈正相关（rs=0.4751，P0.05）。讨 论 口腔鳞癌是预后较差的恶性肿瘤之一。早发现早治疗是提高患者生存率的关键措施。虽然肿瘤标志物在恶性肿瘤的辅助诊断中具有潜在的临床应用价值，但是由于目前尚未找到口腔鳞癌特异性的肿瘤标志物，使得早期诊断受到局限。基质金属蛋白酶（MMP）可破坏基质向周 围组织侵袭和远处组织转移，目前发现有 MMP 1、MMP 9、MMP 2 等 14 个亚型3。Kishida 等4发现，有淋巴结转移的口腔鳞癌患者 MMP 2 呈阳性表达者为 76.9，而无
7、淋巴结转移者仅 25呈阳性，有 MMP 2 分泌的口腔鳞癌较无分泌者更易发生淋巴结转移。其侵袭转移过程涉及细胞的黏附、细胞运动、降解基底膜和细胞外基质，以及血管形成的情况。完善的肿瘤细胞外基质和基底膜可以限制肿瘤细胞的浸润和转移。本研究发现，正常黏膜、低分化、中分化、高分化之间的MMP 2、IL 18 阳性表达均有 显著性差异（ P0.01），并且有随病理分级的上升而升高的趋势。IL 18 存在于多种组织中，可以诱导干扰素 （IFN ）的产生，在 IL 12 的协同作用下，具有重要的抗 肿瘤及免疫监视作用5。众所周知，肿瘤生长与机体免疫系统和细胞因子的调节密切相关。病理分级高的肿瘤细胞恶性度高
8、，机体对抗肿瘤的免疫监视程度加强，这也正是高分化肿瘤 IL 18 表达量高于中、低分化者的缘由所在。值得一提的是 IL 18 在正常口腔黏膜中高表达，主要在上皮的角化层和颗粒层细胞中，表现为胞质中均匀分布的黄染颗粒，阳性率 91.7%，与高分化鳞癌的表达（81.3%）相似，两者之间表达的异同仍有待进一步研究探讨。本研究还发现 MMP 2 和 IL 18 表达呈正相关，提示同时检测口腔鳞癌患者这两个肿瘤标志物对准确地判断肿瘤的恶性程度，尽早了解癌侵袭、转移情况有所帮助。【参考文献】1钟来平,周晓健,魏魁杰,等.血清肿瘤标志物结合支持向量机模型在口腔鳞癌诊断中的应用J.上海口腔医学,2008,17
9、(5):457-459. 2杜春辉,廖洪利,田 刚,等.银屑病皮损 ICAM 1,MMP 9 表达的研究J.右江医学，2007,35(6):631-632.3冉 炜,郭 冰,潭泽明.肿瘤标志物检测在口腔颌面一头颈部肿瘤早期诊断中的应用J.中华口腔医学杂,2008,43(3):142-145.4Kishida T，Asada H，Satoh E，et al.In vivo electroporation mediated transfer of interleukin MMP 12 and interleukin IL 18 genes induces significant antitumor effects against melanoma in miceJ.Gene Ther，2001，8(16)：1234-1240.5刘炜炜,张茹慧,韩艳非.IL 18 在口腔鳞状细胞癌中的表达J.实 用口腔医学杂志,2008,24(1):107-108.
