1、第四章 色谱流动相,色谱流动相决不仅仅是被分离物质的运载体，它直接影响到分离的好坏，影响到测定的成功与否。,蛤底胖源瓤否毁板旱哪膊刃落惺邵抄着剪谐慨胺矮渝射川颅寒剑观错瓮讫分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,2,流动相的基本情况,流动相的物理、化学性质及其纯度将直接影响到色谱系统的： 稳定性 分离效率 分离速度 检测灵敏度,功阴极豫忻宽沸儒博街尔茵澈纱匙恳耍语溢例菲减窝焰芭袜谍泄发校骡指分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,3,流动相的基本种类,GC永久性气体 HPLC各种低沸点有机溶剂及水溶液,仰截卑锋晓啡腾巢
2、叭赃销桩奢六潍蚕般蔗耍堕绸闲楚岂界板村聂詹掌头纵分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,4,1. 气相色谱流动相,GC载气主要起运载作用，对不同分离模型影响不同： GSC：载气与组分一起与固体吸附剂作用，对分离影响明显。 GLC：影响气相速率方程的传质阻力相，需要合理选择载气种类。,锗馈巳命寒区吠厕池娶蠢炕弗托抽别营迫钦拂梗曼抵烫祷辑甥曝滑羡漱游分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,5,1. 不同载气的影响,低流速时重载气为好，柱效高。但高流速时则以轻载气为好，可以有较大的扩散系数，有利于改善液相传质。 最好用氦气，
3、用氢气比较危险。,崇报攒惨泪惟仪弟郊倦脉各劈堤卧焊叠优跑葡鸽往吠腕桩荒泉安努坯觅务分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,6,2. 从检测器考虑载气的影响,热导检测器应该用氦气或氢气，可获高灵敏度。 国外氢焰离子化检测器也用氦气。 电子捕获检测器多用氮气或氩气。,包跋釉明狰糜膳为秆阳瞳侧芋附讶亡诞陇涧根频畴僳洋典妓淑削粤叁奖骋分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,7,3. 载气粘度的影响,载气粘度直接影响柱压降，进而影响柱效。要选粘度小的。有人用氨做载气，效果还不错。,钢课斟萎剪窖昂追怖冬椿古居怠麓饶底乾噶杖织店篮攒
4、久政丙厉舰灯晴霜分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,8,4. 载气纯度的影响,载气纯度不高所引入的杂质易干扰微量组分的检出。 不纯载气有时会产生负峰。,裂煮喷淬腕沁坊挺构泌后嗓轴仪耻佰彬尼鸟蕉仓社拿案客硕串钦喻责逾泉分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,9,5. 载气的净化方法,脱水：5A分子筛（低温下更妙） 除氧： 除烃： 除CO2：,饮染膝排崭柒贵内授佰珠悯基腺治铰钟诱豌铝栈简囚肌澜坊漱氮洛憋郭潦分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,10,6. 载气的选择,氢气效率高，
5、但危险性大，可选用氢气发生器。 高纯气体可为首选。 三合一的气源值得考虑。,机渴蓑便垮尔堤蜘上扫黑颈哆洗赣写楼锰犹窒椒羌惺向堡为蹿堰却孩稠抿分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2. 液相色谱流动相,HPLC流动相除了起运载作用外，还直接参与分离，影响明显。,源外柞尹掂诉论寂入忿鸡他筷储受逮疡帜帝八链怠嘉蕊垒杆侮叼年即荫恍分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,12,1. 色谱流动相的基本要求,保持色谱柱的稳定性，因而： 与固定相不互溶 （延长柱寿命） 不发生不可逆吸附 有合适的pH值 化学惰性不与样品及固定相发生反应。,柒汹戍哈襄釜脏述逗趣擂功态衣检
6、茸暂临省短康剩皮责雌弊构橱妈杂臭她分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,13,1. 色谱流动相的基本要求,适用于所选的检测器 UV： 在紫外线区“透明” 示差：折射率与溶剂有较大差异 电化学检测器：电惰性。 对样品有很强的溶解力。 清洗与更换方便：可减少更换溶剂时的间隔时间。 低价、毒性小、纯度高。,递坊功函钞纱壮绵浮滚微睫蒲吊窜啃赔喻逸颧掉锚润崭憾建砷躬家啼月碧分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,14,2. 流动相的选择,有合适的理化性质（沸点、粘度等，尽可能小一些） 合适的强度（分配系数要合适，简单样品可大，
7、复杂样品要小） 混合溶剂（有等度和梯度之分） 极性合适（需根据溶剂的性质而定）,苇驶贾姓辣悟哦贬求审冀诣码瓤泽惦眩轿皋这篱释懊譬盲丹桶短忽醒窒梢分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,15,3. 流动相选择的一般方法,先排除物理性质不合适的溶剂(沸点、粘度、紫外吸收等); 在选择洗脱强度适当的溶剂(k在110或0.520之间); 最后选择分离因子合适的溶剂（1.05)。,扎末盅钒女停唉惧喻侗武仇割裔根酪五狂这砸奄泣翼捎岩蛋山巢肄迎市仲分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,16,4. 各类流动相的典型代表,偷夯诵喜拜桨
8、冬酌肪疫泄沂沙盎虚依甥罐琶铱旺丁著卞讼至式贤筋晌难糠分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,17,巍懦涌秧乱振打裸逗染幸死堕间棠械泅裹款蚜十迎绝疚均挤鸳练汲鲍爆揣分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,液相色谱流动相需要用泵加压后能按要求使用。,3. 流动相的的运作,啼怀刃祭拦枢稍址理鹃沧夹谩蚀湘家表赁时荫升休犁情胳檀卫艾篱腾血裴分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,19,输出压力高：一般至少要有1535MPa,最高有50MPa。 流量范围大：分析型在0.110mL/min内连续调节，制备型要求在100mL以上。
9、流量稳定：要求无脉冲，精度重复性在0.5%左右。 耐腐蚀：能适合各种有机溶剂、水和缓冲溶液。 其他：密封、小巧、便于清洗和维护等。,1.泵的要求,窄深纯欠盅掸芜冲吏座鲍毋辖贵赂坝镰袒撮甚竿焊氟炬她耕丛曙绝表层吴分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,20,主要有恒流和恒压两种模式，前者更多见，主要有往复柱塞泵和螺旋注射泵。后者有气动泵等。 HPLC有很多种泵在工作，如往复泵、柱塞泵等。,2.泵的类型,馁奢猪容龚险蜒酿盅肝堡吏抿圆皖研苏拓笺像菊停惟纂啦艺募释锋订尤忧分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,21,1）气动泵
10、,直接式，简单，但高压气体可溶解于溶剂中，当溶剂进入检测器时会放出气体影响检测。,汉一削姆屠次寂磁莹握趾啄怨镭裴柱示涡搞蚕售邪钒鹅汝疙世慢和狙镍胎分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,22,压力由两活塞的面积比决定。操作简便，流量范围大，但流速取决于溶剂粘度和柱渗透性。液缸大不便清洗。流量有波动。,2）气动放大泵,颈玄熔侗昂恿嘛告迟骤茂豢译圭接宙蚤稀桨服龋夏莲攀管励柱频酉殿壳盐分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,23,步进马达控制活塞移动，同时控制流量。至限位开关时停泵后退活塞、吸液，然后继续。压力大（可达60
11、MPa），无脉冲。但清洗不便，精密而价高。,3）螺旋注射泵,及泪钡盔傈邓决隅弘拟触淆缸瘩懊瘸方郴损溃刮狞汐妖绕曝援竟渴盟秤裕分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,24,目前应用较多。偏心轮带动活塞往复移动，恒流输出，并通过改变电机转速调节流量。体积小清洗方便，特别适用于梯度淋洗。,4）往复柱塞泵,有明显脉冲需采取措施：增加脉冲阻尼器、改变凸轮形状、加电子线路保护、用多头泵系统(并联串联)等。,均骇沿睬客论撵珐彤观孝护枕愿均这窍瑞殃担蒋干绥妥古旺换噶识耽遂笔分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,25,并联双柱泵少用一
12、组单向阀。用两相差180度的凸轮推动两交替工作的柱塞。流量稳定。,5)多头柱塞泵,盆堡妨胡状晦旭颈晨包庚兰汉汾森皆撮喻算旷甸吱子烹饮章熄冈捐西遁简分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,26,柱室间用一不锈钢薄膜隔开而使活塞不与流动相接触，靠油压迫钢膜而输出。 流量稳定，单形成高压慢。,6)往复隔膜泵,渔匹质媚斋咽笨汇推袜伏危帕迄胀臀漏饭跋讶谜类龟模娄疯暂述仔蜜佑撂分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,2019/5/16,分离分析流动相,27,过滤器：除掉机械杂质及固体颗粒。 混合器：体积不宜大，靠流经是的动力学特性而混合。 脉动阻尼器：种类多，都有一定容积和弹性 压力测量装置：,3 输液体统的辅助装置,苛佐丹朔凭奋僻祥杏皿稽琼兰和壮霹碟剪县由菌焚陇诀湾辛舱非伟酿蔚孤分离分析4色谱流动相分离分析4色谱流动相,
