微生物复习题1.doc

1、微生物复习题1 咽试子采集方法（抬头/压 舌/ 涂抹/接种）1 要求病人头微抬2 压舌板轻轻压下舌根部3 用 1 根用生理盐水湿润后的棉试子深入口腔，适度用力涂抹咽后壁粘膜，注意避免触及舌部。4 及时接种相应的平板或放入相应采样液中。2 血清标本采集方法1 通常采用肘部静脉，幼儿可采用颈外静脉。2 采血前按检验项目要求，准 备好采血器材。3 患者取卧或坐位，手臂伸直平放在床边或台面垫枕上，暴露穿刺部位。4 找好合适采血静脉后，消毒、穿刺采血，至所需血量后，解开压脉带、用无菌干棉球（签）压住伤口， 拔出针头。5 采血完毕，再次核对病人姓名和号 码， 应将用过的器材放在固定的回收箱内，决不能随意丢

2、弃，污染环境。6 采集量要求 5ml，以空腹血为佳，使用真空负压采血管。3、尿液标本的采集1 一般采随机新鲜尿。2 盛尿的容器必须洁净。3 采集中段尿，尿液取量一般 为 5-10ml 左右。4 尿标本尽量在使用抗生素前收集，要防止混入其他异物。5 标本应立即送检和处理。若不能及 时检验，可将标本置冰箱保存，若加入防腐 剂，保存效果更佳。4、大便（肛拭子）标本的采集1 争取在发病早期，服用抗菌 药物之前采集。2 可用棉拭采取自然排出的新鲜大便，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内 3-5cm 处采取。3 水样便采 1-3ml，成形便采取指甲大小的粪量。脓血便采取脓、血和粘液部分。5、食品样品采

3、集注意事项1 无菌操作。采样用具必须 无菌。2 尽量采集有包装的食品。3 若包装太大或没有包装， 则需用采集工具采集样品。4 混合均匀：粉末状的样品， 应边取样边混合，液体样品应振摇混匀。5 保存状态：冷冻食品应保持冷冻状态，非冷冻食品需保持在 0 5中保存。6、食品采集方法1 重量法：采样数量一般不少于 200g。2 拭子法：检出的活菌总数不高。3 灌洗法：比拭子采样法捡出率高。7、直接食用的小包装食品抽样 方法：取原包装，不要开封，以防污染。8、大容器包装的液体食品抽样 方法：1）抽样前摇动或搅拌，使其达到均 质。2）将抽样用具浸入液体内略加漂洗后再取样。3）装人盛样容器的量不应超过其容量

4、的四分之三。4）取完样品后，应用消毒的温度 计测量食品的温度，并作记录。5）如为非冷藏易腐食品，应迅速将所抽 样品冷却至 0-4。9、大容器包装的固体和固体食品抽样方法：1）用灭菌抽样器采取不同部位样品，放入一个灭菌容器内。2）不要使样品过度潮湿，以防 细菌增值。10、大容器包装的冷冻食品抽 样方法：1）从不同部位抽样。2）送检前，要保持冷冻状态。一旦融化，不可再冻，保持冷却即可。11、大气样本的采集方法1 自然沉降法：通常设置 5 个采样点，采 样高度为 1.21.5m。采样点远离墙壁 1 m以上，避开空气流通处。将采样平板置于采样点，打开皿盖，暴露 5 分钟，盖上皿盖，翻转平板，及时送检。

5、2 撞击法：固体撞击式采样器、液体撞 击式采样器。3 其他采样器：离心式采样器， 过滤阻留式采集器、热沉降和静电沉降采 样器等。12、水样标本的采集方法1 无菌操作。容器应清洁无菌。2 自来水样品采集：先用清洁布试干水龙头，再用酒精烧灼水龙头周围，将水 龙头全打开，放水 510 分钟，再将其关小取样。3 井水及江、湖、河、游泳池水样采集：将灭菌瓶安装在采水器上，距水面 1015cm处采样。4 加氯消毒水样采集：每 500ml 应加 1.5硫代硫酸钠 2ml 中和余氯。13、土壤样品的采集方法：1 选择有代表性的土壤。2 按对角交叉（五点法）取样。3 用灭菌工具先除去地表枯枝落叶，再铲除1cm

6、左右表层土，用烧过的勺或铲取土样约 200300g，装于灭菌容器内，4 混合后，做好标识。14、食品样品的保存和运送方法及其注意事 项1 尽快送检。2 如不能及时送检，冷冻样 品在-20保存；冷却和易腐食品在 0-4保存；其他食品可放在常温冷暗处。不超过 36h 。3 冷冻和易腐食品应低温运送。4 盛样品的容器应消毒处理，不能在 样品中加入任何防腐剂。5 样品由专人立即送检。不能由 专人携带时，也可托运。6 作好样品运送记录，运送人 签字。15、水样的运输和保存及其注意事 项1 2 小时内尽快送检。不能送 检， 应放冰箱保存，不超过 4 小时。2 运送时，避免溢出和容器破 损。3 需冷藏样品，

7、需配备制冷 剂。16、病毒分离标本的保存和运送1 采集后立即冷冻保存。2 不能及时接种，则置70 或以下保存。3 样品运送液可用 Hanks 液，并加入抗生素。17、血清标本的保存与运送1 分装冷冻保存，24 小时带 冰送检。2 尽快接种分离，48 小时内接种者，可置4保存，不能接种者70或以下保存。3 可在 4存放 1 周，长期保存置20或以下。18、脑膜炎奈瑟氏菌寄居部位以及 传播方式？1）脑膜炎奈瑟氏菌定居在人的鼻咽腔粘膜2）人类是他的唯一自然宿主3）通过呼吸道传播19、脑膜炎双球菌生物学性状1）染色及形态：脑膜炎双球菌为革兰氏阴性双球菌，呈肾形或豆形，0.8 umx0.6um 大小，常

8、成对排列，邻近两边扁平凹陷。2）营养要求：该菌要求营养较高，在普通 琼脂培养基上不生长，接种到巧克力色 琼脂平板上，初次分离在 5%CO2，37培养 24h。3）菌落形态：菌落的直径约 1mm，表面突起、光滑、湿润、圆整、略带灰白色、半透明、不溶血、无色素。培养时间延长，菌落增大，变成浅黄色，不透明。4）生化特征：该菌能产生自溶酶，培养 时间过长，菌体易裂解自溶。绝大多数菌株分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气。不分解蔗糖、果糖和乳糖。氧化酶试验阳性。5）抵抗力：脑膜炎双球菌对理化因素的抵抗力很弱，对寒冷、干燥、热与阳光及紫外线等均极敏感。20、脑膜炎双球菌的属种群及菌型1)根据血清群特异性荚膜多糖

9、（ CPS）的结构与组成成分，脑膜炎双球菌可分 为 13 个血清群（A、B、C、D、29E、H、I、K、L、W135、X、Y、Z）。90以上流脑的病例是由 A、B、和 C 群引起的。2)根据外膜蛋白(OMP)可将 B 和 C 群脑膜炎双球菌分成不同的血清型以及血清亚型。由于目前用于分型的单克隆抗体的种类有限，故有不少 Nm菌株尚不能分型和亚型。对于 A 群 Nm 以 4 型，P1.7 与 P1.9 亚型多见。3)脂寡糖（LOS）是其内毒素的主要成分，可分成 13 个免疫型，其中 A 群 LOS 以 L10 和 L11 免疫型多见，B 群以 L3,7,9 复合免疫型多见。21、在流脑的流调及病例

10、诊断中常采取哪些 标本？咽拭子、 脑脊液、血液、淤血点、血清。22、流脑样品的处理和运送应 注意些什么？1）早期采集样品:应尽可能采集病人用 药前的早期样品.2）及时处理样品:采集样品后 ,应尽可能地做到床边接种,若无可能则应在最短的时间内送至实验室进行接种培养.3）保温运送:脑膜炎双球菌对 温度较为敏感,温度过低或过高均可导致菌株死亡.在运送样品或培养物时,应保持样品处于 2036之间,不能低温运送.用于检测抗体的血清标本应低温运送.23、常用脑膜炎双球菌分离培养基有哪些？分离培养基常采用卵黄双抗平板、巧克力双抗平板、血平板、巧克力琼脂平板24、阳性分离物的鉴定生化鉴定：氧化酶、触酶试验阳性

11、，分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，不分解蔗糖、乳糖、果糖。在普通培养基上不生长。血清学鉴定：分别用脑膜炎球菌 13 种分群诊断血清做凝集。25、流感病毒生物学性状与致病性1）形态结构：流感病毒具有多形态，有的呈 丝状、有的呈杆状，但一般为球形，病毒的直径为80120nm。a核心（核衣壳）其核酸为单股负链 RNA。甲、乙型流感病毒为 8 个节段，丙型 为 7 个节段（少一个编码 NA 的 RNA 节段），每一个节段就是一个基因，决定流感病毒的遗传特性 b病毒囊膜 流感病毒囊膜由内向外，可分为内膜蛋白、类脂和糖蛋白三 层。糖蛋白 层由两种糖蛋白刺突组成，一种是神经 氨酸酶（Neuraminidas

12、e NA），一种是血凝素 (Hemagglutinin HA)。 血凝素： HA 能与多种动 物（如鸡、豚鼠）和人的红细胞表面的糖蛋白受体相结合，引起 红细胞凝集。血凝集是流感病毒的主要中和抗原，其抗原性最易发生变异，它是流感病毒 亚型划分的主要依据。神经氨酸酶和血凝素这两种抗原都具有易变异的特性，是流感病毒变异的主要原因。2）培养特性a 宿主范围：貂、 鸡胚、原代人胚肾、猴 肾、狗肾，现在常用狗肾细胞分离病毒。b 红细胞凝集范围：鸡、豚鼠、和人“O”型红细胞。但 O”相毒株 对鸡红细胞不凝聚，在分离 O”相毒株时，应用豚鼠或人的红细 胞来检查。3）抗原变异: a 相变异：甲 1（H1N1）亚

13、型流感病毒能凝集人或豚鼠的红细胞，而不凝集鸡红细 胞。具有 这种特性的毒株称“O”相或原生相毒株。可对鸡红细胞产生凝集，称为“D 相或原生相毒株。b 抗原性变异：指人甲型和乙型流感病毒表面HA 和 NA 的抗原性变异。甲型流感病毒变异最强，常引起世界性大流行。流感病毒 HA 和 NA 抗原性变异有两种形式，一种为所有流感病毒所共有的抗原性漂移，指流感病毒内部经 常发生小变异；另一种为甲型流感病毒所特有的抗原性转变，又称抗原大变异，形成新的亚型，常引起大流行。4）分类流感病毒属正粘病毒科，根据病毒粒核蛋白（NP）和膜蛋白（ MP）抗原特点及基因特点的不同流感病毒分甲、乙、丙三型，其中甲型和乙型流

14、感对人类威胁较大。与人感染有关的常 见甲型流感病毒亚型有：甲 1（H1N1）、甲 2（H2N2）、甲 3（H3N2），人的禽流感病毒亚型主要为 H5N1、H9N2、H7N7，其中感染 H5N1 的患者病情重，病死率高。5）流感病毒的致病性与所致疾病。流感病毒经过飞沫传播，侵入呼吸道，通 过其HA 吸附于呼吸道粘膜上皮细胞膜上的 HA 受体上，然后浸入这些 细胞进行增殖。 经 12 天的潜伏期，感染者即可出现流感症状。病毒在呼吸道粘膜上皮细胞内增殖，造成这些细胞变 性，坏死脱落，粘膜充血水肿，腺体分泌增加；出现喷 嚏、鼻塞、咳嗽等症状。病毒在上皮细胞内复制，很少入血，但可释放内毒素样物质入血，引

15、起全身中毒症状。6）流感病毒的免疫性。病后对同型病毒有免疫力，可 维持 12 年。主要为分泌型 lgA 和血清中和抗体 lgM、lgG 共同的作用。26、实验室检验方法流感的实验室检查方法包括病毒分离、 鉴定，血清抗体水平测定等。27、标本采集及处理。1）标本接种：a 采样种类：采集流感样病例的咽、鼻拭子，必要时，可同时采集血清样本。b 采样对象a）咽、鼻拭子： 发病 3 天内，未服用抗病毒药物（金刚烷胺、金刚乙胺、达菲等）的流感样病例。b）急性期血清：发病后 7 天内的流感样病例。c）恢复期血清：发病后 24 周的流感样病例。c 采样方法a）咽拭子采集：对婴幼儿患者采集样本时，先将聚丙烯纤维

16、拭子用 Eagles 液（PH7.4）蘸湿，在试管壁挤干后，在被检者双侧咽扁桃体及咽后壁涂抹数次，然后将聚丙烯纤维拭子置于含有 3mlEagles液的试管内送检。采集 5 岁以上患者 样本时，拭子可不必用 Eagles 液蘸湿。b）鼻拭子：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两 侧鼻孔。将棉签头部浸入 34ml 采样液中，尾部弃去。c）血清采集：采集静脉血 5ml,离心后取上清液装至血清管中。血清样本应采集急性期与恢复期双份血清。d 标本处理 血液置室温数小时待血完全凝固，15002000rpm 离心 10 分钟，收集血清于 1.5ml 无菌管中，做好标记。 血清可

17、置于 4存放一周，存放超过一周需置20或以下保存。含聚丙烯纤维的试子的采集标本，先将含聚丙 烯纤维的试子再管壁反复挤压后取出。鼻腔或咽部 拭子的标本，充分振荡标本管，将粘液打碎接种 时，待其自然沉淀510 分钟，取上清 5ml。接种时，每 2 ml 标本加0.2 ml 双抗，置 4作用 2h 后直接接种或低温保存。e 细胞分离 采用 MDCK 细胞28、麻疹病毒生物学特性该病毒为多形性，一般成球形，直径120250nm，基因组为单股负链 RNA，不分 节段，核衣壳呈螺旋状对称排列，病毒含脂 质的外膜上有血凝素及血溶素二种表面抗原，相间插在脂质外膜上呈棘状突起。29、麻疹标本（血清、咽拭子和尿液

18、）的采集 时间、收集流程、贮存与安全运输要求1）检测 IgM 抗体，应在患者发病初期（10 天内）采集。检测 IgG 抗体应采集急性期和恢复期双份血，分离血清，如果不能当天检测 ，应将血清之-20 度冰箱保存。2）采集咽拭子标本，应在皮疹出 现前，柯氏斑阳性时进行，不应超过出疹后 5 天，将棉 签稍蘸标本保存液，稍用力涂抹患者咽部，放于标本运输液中，并反复挤压几次。标本如不能及时进行病毒分离或分子生物学实验，应置于 -80 度冰箱中保存。3）尿液的收集时间同咽拭子标本。用消毒后的试管收集除晨尿外的尿液 20-50ml 并立即盖上盖子，冷藏运送到实验室进行处理，如不能及 时处理， 应放于 4 度

19、保存，不要冷冻。处理时，在低温（4 度）离心机中 1500 转/分，5 分钟，弃去上清液用 1ml 运输液悬浮沉淀，并尽快送达实验 室，如不能，则置于-80 度保存。所有以上标本都要双层包装， 专人专车运送。咽拭子和尿液标本要放于冷藏包中运送。30、麻疹的血清学诊断方法酶联免疫吸附试验检测麻疹特异性 IgM、IgG抗体。31、风疹病毒生物学特性为不规则球形，直径 5070nm，核壳体 20 面体排列，核酸为单链 RNA，有感染性，核壳外有一层脂质包膜，包膜表面的细小突起 为血凝素，能凝集多种动物红血球。32、风疹标本（血清、咽拭子和尿液）的采集 时间、收集流程、贮存与安全运输要求1）检测 Ig

20、M 抗体，应在患者发病初期（10 天内）采集。检测 IgG 抗体应采集急性期和恢复期双份血，分离血清，如果不能当天检测 ，应将血清之-20 度冰箱保存。2）采集咽拭子标本，应在皮疹出 现前，不 应超过出疹后 5 天，将棉签稍蘸标 本保存液，稍用力涂抹患者咽部，放于标本运输液中，并反复挤压几次。标本如不能及时进行病毒分离或分子生物学实验，应置于-80 度冰箱中保存。3）尿液的收集时间同咽拭子标本。用消毒后的试管收集除晨尿外的尿液 20-50ml 并立即盖上盖子，冷藏运送到实验室进行处理，如不能及 时处理， 应放于 4 度保存，不要冷冻。处理时，在低温（4 度）离心机中 1500 转/分，5 分钟

21、，弃去上清液用 1ml 运输液悬浮沉淀，并尽快送达实验 室，如不能，则置于-80 度保存。所有以上标本都要双层包装， 专人专车运送。咽拭子和尿液标本要放于冷藏包中运送。33、风疹的血清学诊断方法酶联免疫吸附试验检测风疹特异性 IgM 抗体。34、霍乱标本的采集1）腹泻病人粪便：争取在发病早期，服用抗菌药物之前 a 用棉拭采取自然排出的新鲜大便 b用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内 3-5cm处采取。c 一般水 样便采 1-3ml，成形便采取指甲大小的粪量。2）食品：采取 50-100g 分别放在广口瓶或厚的塑料袋内，立即送到实验室，实验室较远时。应将标本放在冰瓶中运送。3）环境：以灭菌的 50

22、0ml 盐水瓶采取水样。一般在可疑污染的河流、池塘岸 边的 1 市尺深度以内的表层水采取水样并尽快送往实验室，不能在 2-3 小 时内送检者，应在采水点即将浓缩胨水加至水样中。4）物体表面标本，可用灭菌棉拭蘸以碱 胨水涂擦采样后，接种至碱胨水管中，增菌后分离。35、霍乱弧菌动力和制动试验1）动力试验：取一滴急性期病人的水样便滴在玻片上，直接镜检（最好用暗视 野或相差显微镜）可见具有流星状动力的细菌。2）制动试验：当加入 1 滴 O1 群霍乱免疫血清（使用效价为 1：64）后，几分钟 内运动停止，凝集成块。36、霍乱弧菌增菌及分离碱性蛋白胨水增菌 37培养 6-8 小时,转庆大平板。37、霍乱弧

23、菌血清分群（型）依据菌体（O）抗原不同分为 O1 群、O139 群。其中 O1 群又分为 3 个血清型，分别为小川型、稻叶型、彦岛型。38、霍乱弧菌形态学革兰氏阴性、稍弯曲或直的短杆菌，形态为弧形或逗点状，无芽胞、无荚膜，单端有一根鞭毛。运动极为活泼，呈穿梭或流星状。39、霍乱弧菌生化性状检查：霍乱 红试验阳性、氧化酶试验阳性、粘丝试验阳性、硝酸盐还原阳性、赖氨酸脱羧酶阳性、无盐生长 、7%高盐不生长、发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖不产气。40、脊灰标本采集与运送：粪便 标本的采集量、采集时间、保存与安全运输1）粪便是分离脊灰病毒的主要标本，由于脊灰病人粪便排毒主要是在麻痹前期和麻痹后 2 周内，排

24、毒呈间歇性，故标本的采集 应在病人麻痹后 14d内采集 2 份粪便，2 次采集的 间隔为 24h48h，每份标本量 5g8g。2）采集的标本应放在无菌或含病毒传送液的干净容器内，4以下冷藏保存和带冰运送，采集后应按规定贴好标签，1 周内（越早越好）送到指定脊灰实验室进行病毒分离。41、脊髓灰质炎感染的实验室 诊断方法1）病毒分离：实验室诊断最有力的证据之一是从患者标本中直接分离出病毒。2）血清学检查：a 中和反应：恢复期血清滴度比急性期有四倍增高判为感染阳性，可诊断为 脊灰。中和反 应试验中应设立标准抗原对照、血清 对照及正常细胞对照。b 补体结合反应：单份急性期血清有补体结合阳性反应者，说明

25、有 c 抗体存在，仅可视为有脊灰病毒感染但不能区分出型别。双份血清同 时进行补体结合反应，如果恢复期血清呈 现补体结合反应阳性，且四倍于急性期血清，可明确诊断为与抗原属同一型别的脊灰首次感染。如果属于再次脊灰感染的病人，只能用检查 c 抗体的 补体结合反应来证实其获得脊灰近期感染。c 快速诊断a)免疫荧 光技术（IF）b)酶联免疫吸附试验（ELISA）42、病原学检测方法病毒培养常用 Hep2 细胞和 RD 细胞。43、简述痢疾杆菌生物学性状1）形态染色：痢疾杆菌是革兰氏阴性短杆菌，长约 23m，宽约 0.50.7m，无芽胞、无荚膜、无鞭毛，无动力。2）培养特性：是需氧或兼性厌养杆菌， 对营养

26、要求不高。菌落形态呈圆形、稍凸起、 边缘整齐、表面光滑、湿润、无色、半透明较 小菌落。在液体培养基中呈均匀混浊生长，不形成菌膜，亦不产生沉淀。3）生化反应：氧化酶、尿素酶和 赖氨酸脱羧酶阴性，触酶阳性；不产生硫化氢 ，不利用枸橼酸盐；发酵葡萄糖。宋内菌迟缓发酵乳糖； 发酵糖类时产酸不产气(福氏 6 型和鲍氏 13、14 型的部分菌株会产生微量气体)。44、简述痢疾杆菌属种群及菌型（分 类依据和主要致病菌群）1）生化分群：常以甘露醇和乳糖发酵特性来区分志贺菌的生化群，除 A 群外， B、C、D 群志贺菌均能发酵甘露醇，除 D 群外， A、B、C 群均不发酵乳糖； A 群：痢疾志贺菌，甘露醇、乳糖

27、、棉子糖及鸟氨酸脱羧酶均阴性。B 群：福氏志贺菌，棉子糖和甘露醇阳性（其中 4型和 6 型常见甘露醇阴性的变种），乳糖及 鸟氨酸脱羧酶阴性。C 群：鲍氏志贺菌，甘露醇阳性，乳糖、棉子糖及鸟氨酸脱羧酶（除 13 型）均阴性。D 群：宋内志贺菌，甘露醇和乳糖（迟缓）阳性， 鸟氨酸脱羧酶阳性。2）血清分群：志贺菌属细菌主要有菌体（O ）抗原，某些新分离菌株有表面（K）抗原。O 抗原为糖脂蛋白复合物，可分为型特异抗原和群特异抗原两种。根据抗原构造不同，将志贺菌属分为四个群、39 个抗原型、14 个血清亚型和 2 个变种。A 群（痢疾志贺菌）分为 16 个血清型；B 群（福氏志贺菌）分为 6 个血清型，

28、14 个血清亚型，2 个变种；C 群（鲍氏志贺菌）分为 18 个血清型；D 群（宋内氏志贺氏菌）仅 1 个血清型。45、简述菌痢爆发时标本采集、运送和保存1）粪便标本应在服用抗生素前采集每一患者的粪便或粪便的脓血粘液标本， 2）水标本的采集可选用直接增菌法过滤集菌法吸附沉淀法。3）疑为食源性的传染时应采集可疑食品 50100克或毫升的样品。4）采集的粪便、水、食品标本若在 2 小时内不能送达实验室，应置冷藏包中送 检（内置冰排，可保存 13 天）。46、简述痢疾杆菌的增菌及分离培养1）粪便及肛拭标本可划线接种于 HE 选择性琼脂平板和 MAC 琼脂平板上，亦可同 时接种于GN 肉汤内在 36培

29、养 68h ，再划线接种于 HE或 MAC 选择性 琼脂平板上， 36培养 1824h。2）其它标本可接种于 GN 肉汤内在 36培养 68h，再划线接种于 HE 或 MAC 选择性琼脂平板上，36 培养 1824h。47、简述痢疾杆菌的生化鉴定1）挑取平板上无色透明、不发 酵乳糖的菌落，接种克氏双糖铁琼脂斜面管。 经 36培养1824h，观察结果。2）志贺菌在 KIA 双糖管斜面呈红色、底 层显示黄色，无气体或有微量气体，不产生 H2S；无动力；3）V-P、苯丙氨酸、赖氨酸、柠檬酸盐、葡萄糖铵生化实验为阴性。疑为志 贺氏菌可做血清学凝集。4）下列培养物可排除志贺菌属：KIA 斜面和底层均呈黄

30、色或均呈红色者；尿素酶阳性者；产生气体者（福氏志贺菌 6 型有时产少量气体）；在 1848 小时发酵乳糖的培养物（宋内菌35 天迟缓分解乳糖）；有动力；产生硫化氢。48、简述志贺氏菌属血清学鉴 定？1）做血清学分型时，先用四种多价志 贺氏菌血清做玻片凝集试验，阳性者再 选用相应的群多价或单价因子血清做凝集。2 若四种多价诊断血清凝集，与相 应的多价、单价诊断血清均不凝集，且菌落 较粗糙，应考虑宋内相（粗糙型）诊断血清做凝集反应。3）当 4 种多价志贺氏菌血清不凝集时，先考 虑鲍氏血清型，分别用鲍氏多价血清及分型因子血清检查。如果不是鲍氏血清型，则用痢疾 312型多价血清及分型因子血清检查。3

31、如果由于 K 抗原的存在而不出 现凝集，应将菌液煮沸后再做凝集，确定菌型。每次均需做盐水凝集对照实验。49、HIV 抗体筛查检测的常用方法酶联免疫试验（ELISA）明胶颗粒凝集试验（PA）斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验。50、HIV 抗体筛查检测的流程选用符合要求的筛查试剂对样品进行初筛检测， 对呈阴性反应的样品，由实施检测的实验室出具 HIV 抗体阴性 报告；对初筛呈阳性反应的样品用原有试剂和另外一种不同原理或不同厂家的筛查试剂重复检测，如两种试剂复 测均呈阴性反应， 则报告 HIV 抗体阴性；如均呈阳性反应，或一阴一阳，需送艾滋病确认实验室进行确认。51、艾滋病实验室安全防护措施1）艾

32、滋病初筛实验室符合生物安全二级实验室的各项要求；2）进入实验室应穿隔离衣、口罩、帽子，穿专用工作鞋或鞋套，戴手套。如果接触物传染危险性大，则应戴双层手套和防护眼镜。3) 避免利器的使用，尽量使用安全针具采血，如蝶形真空针，自毁性针具等，针头直接放入坚固的容器内，消毒后废弃。4）所有实验室废弃物消毒处理后再移出实验室。52、艾滋病实验室职业暴露后 预防及处理1)急救处理：刺激出血，尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂和清水冲洗伤口或沾污的皮肤。 伤口应用消毒液如 75%酒精、0.5%碘伏等浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。2) 填写 “艾滋病职业暴露人员个案登记表”， 对职业暴露情况进行登记、保存和上 报。

33、3) 当地疾控中心应与当地有关专家联系共同进行风险的评估，确定用药的必要性、确定预防药物和用药程序，并将处理情况向主管行政部 门报告。4)监测暴露源：如果暴露源没有阳性或阴性的血清学化验结果应立即检测，如果暴露源有急性 HIV 综合征的症状，应同时检测病毒 载量。5）监测职业暴露者：对职业暴露者进行 HIV 抗体检测，该血清留样备用。如果职业暴露者以前已有HIV 抗体的化 验结果，则应加以 记录。暴露后 1 年内分别在暴露后 4 周、8 周、12 周、6 个月监测 HIV抗体，结果填写在“ 艾滋病职业暴露人员个案登记表”内。6) 根据暴露级别和暴露源病毒载量水平使用预防性用药，应注意监测药物的

34、毒副作用。7)保密，对涉及的职业暴露者，均应注意做好保密工作，每一个得到信息的机构或个人均应做好保密工作。53、艾滋病实验室质量管理包括的内容艾滋病实验室质量管理，包括 质量保证、 质量控制和质量评价 质量保证是指从接收检验标本起，到 实验室发出报告止，为确保实验室最终报 告结果的正确性所进行的全过程，包括采取各种行政和技 术上的措施和方法。质量控制是指为确保实验工作正常进行而在每一次实验过程中必须采取的各种措施。室间质量评价是检验实验室对未知样品获得正确结果的能力。54 在艾滋病实验室质量控制中，内部 对照及外部对照的定义内部对照指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质量控制的基 础

35、。每一次 检测必须使用内部对照，而且只能在同批号的 试剂盒中使用。外部对照是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异而由实验室设置的一套对照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性对照血清。也可以只设置一个弱阳性对照，以 该试剂盒临界值（Cut-off）的 23 倍为宜。55、在艾滋病实验室质量控制中，质控图的绘制及分析1). 建立 质控图 参数：在常规 条件下， 对外部对照质控物连续测定 20 次以上，获得一 组 S/CO 值，求均数( )和标准差( s), 超出 2s 或 3s 的数据不应删除。x2) 绘制质控图：将均值( )和标准差( s)分别在质控x框架图中标示出来。以 S/CO 值

36、作纵座标(Y 轴)，每一次(天) 试验作横座标(x 轴)，绘制质控图。从第 21次起，将每次质控血清的检测结 果依次点入该质控框架图中，检验进入质控状态 。3) 质控图的分析及失控处理：实验室在报告实验结果之前必须评价质控数据，出 现下列情况时， 应暂停检测查找原因：出现一次 3s 范围的变化、 连续两次出现同一方向 2s 范围的变化、 连续四次出现同一方向的 1s 范围的变化、连续 10 次结果都在 1s 范围内，但落在均值线的同一侧 。当出 现失控时必须找出问题原因，找出解除故障的方法，并消除原因，防止将来出现同样的问题。56、室内质控和室间质控的含 义室内质量控制是由实验室工作人员采取一

37、定的方法和步骤，连续评价本实验 室工作的可靠程度，旨在监测和控制本室常规工作的精密度，提高本室常规工作中批内、批间样品检验结 果的一致性，以确定报告是否可靠和可否发出的一项工作，主要控制检验结果的精密度。室间质量评价是由外机构单位采取一定的方法，连续、客观地评价实验室的结果，发现误差并校正结果，使各实验室之间的 结果具有可比性。 这是对实验室操作和实验方法的回顾性评价，主要控制检验结果的准确性。57、结核杆菌痰检的对象 疑似肺 结核病人、结核病可疑症状者。 进行 疗效考核的病人 初治涂阳病人 (含重症涂阴病人)在疗程满2、5、6个月时，复治涂阳病人在疗程满2、 5、8个月时，各查痰一次。 初、

38、复治涂阳病人在疗程满2个月时，痰菌仍为阳性者，应在治疗满3个月时增加查痰一次。 确诊、登记的涂阴肺结核病人，即使病人因故未接受治疗，也应在登记后 满 2和6个月时进行痰菌检查。 58、结核杆菌痰检的要求1、 初诊病人应送3份痰标本(夜间痰、清晨痰和即时痰) 。痰标本应以脓样、干酪样或脓性粘液样的痰液为合格标本，痰量应为 3 5毫升。 2、痰标本的容器，应采用国家参比实验室推荐的国际通用痰瓶或采用直径4厘米、高 2厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上 应注明病人姓名、编号(门诊 序号或病人登记号)及日期。 3、 痰标本的保存和 输送：痰标本容器密封，勿倒置，严防痰液外溢。不能立即作涂片检查的痰标本，须置4冰箱保存，防止痰液干涸或污染。 4、收到痰标本后，实验室检验人员仔细核对标本和检验单各项内容，查看痰 标本是否合格。随后按顺序编号，及时检查和登记 。