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绒毛组织DNA提取.doc

上传人:j35w19 文档编号:7379834 上传时间:2019-05-16 格式:DOC 页数:1 大小:24.50KB
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绒毛组织DNA提取.doc_第1页
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资源描述

1、绒毛组织 DNA 提取起始材料:经生理盐水清洗后绿豆大小绒毛组织(3-5 立方毫米) QIAGEN 51304 提取试剂盒 乙醇1. 将组织放入 1.5ml 离心管中;2. 吸取 20 微升 QIAGEN Protease(或是蛋白酶 K)到该离心管中;3. 加入 180 微升 Buffer ATL,震荡混合 15s;4. 56孵育直至组织完全溶解;5. 点离后加入 200l Buffer AL,震荡混合 15s,70孵育 10min;6. 点离,加入 200l无水乙醇,震荡混合 15s,点离;7. 小心移取混合液到套好 2ml 收集管的纯化柱中,盖好盖子 6000g 离心1min。取出纯化柱

2、放入新的 2ml 收集管中,弃去废液管;8. 小心打开纯化柱,加入 500l Buffer AW1,注意不要弄湿边缘,盖上盖子6000g 离心 1min,取出纯化柱放入新的 2ml 收集管中,弃去废液管;9. 小心打开纯化柱,加入 500l Buffer AW2,注意不要弄湿边缘,盖上盖子,全速离心(14000g)5min;10. 取出纯化柱放入新的 1.5ml 离心管中,弃去废液管,全速离心 3min;11. 取出纯化柱放入新的 1.5ml 离心管中,做好样本标记,弃去废液管。加入100l去离子水,室温放置 5min 以上,8000rpm 离心 1min 收集样本。Nanodrop 2000 上测定 OD 值和 DNA 浓度(理论上,纯 DNA 的 OD260/280 在1.8-1.9,取 400-500ng DNA 往下做芯片标记) 。

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