1、 论 著急性腹泻患者柠檬酸杆菌调查分析程邦宁，潘静(中铁四局集团中心医院，安徽合肥230023)摘要：目的探讨致腹泻柠檬酸杆菌的种类特征、分布及药敏性。方法对本院2001年4月2002年11月506例急性腹泻患者分离的柠檬酸杆菌进行鉴定分析。结果共检出柠檬酸杆菌36株，检出率为72 ，其中5岁小儿检出24株，检出率为了47 ；有4株与沙门菌属有交叉抗原，1株与志贺菌属有交叉抗原，1株与0157大肠埃希菌有交叉抗原。结论柠檬酸杆菌作为条件致病菌是致泻病原菌之一，不容忽视，本地区柠酸杆菌分布有其自已的特点，以弗氏为主，5岁小儿易感，部分菌株与有关菌属存在相关抗原，应引起重视；所有菌株都有不同程度的
2、耐药，诺氟沙星(氟哌酸)及头孢类药物治疗效果较好。关键词：急性腹泻；柠檬酸杆菌；分析中图分类号：R3782 文献标识码：A 文章编号：10054529(2003)09-088302柠檬酸杆菌属(Citrobacter)为条件致病菌，当机体抵抗力下降时则可引起腹泻等多种临床感染。我们对2001年4月2002年11月本院急性腹泻患者粪便标本分离的呈纯培养或优势生长的柠檬酸杆菌进行鉴定分析，为预防和临床治疗急性腹泻提供参考，现报告如下。1 材料与方法11 标本来源 2001年4月2002年11月间住院及门诊急性腹泻患者大便标本506份。12 试剂和培养基麦康凯琼脂、SS琼脂、山梨醇麦康凯、TCBS琼
3、脂、生化试剂、药敏纸片均由杭州天和生物试剂厂提供，沙门菌、志贺菌、O157 大肠埃希菌诊断血清购自卫生部成都生物制品研究所，部分试剂本室自制。13 检测方法依据卫生防疫细菌检验、全国临床检验操作规程，柠檬酸杆菌分类依据有关文献。 。14 药敏试验选取对革兰阴性杆菌及肠杆菌科细菌有广谱抗菌作用的药物共7种，采用WHo 推荐的改良KB纸片法。见表1。2 缚果21 培养特性该菌培养后在麦康凯、Ss、山梨醇麦康凯平板上均生长，TCBS平板上不生长，在SS平板上有类似沙门菌中心带黑点的茵落，也有类似志贺菌无色透明或半透明、中等大小边缘整齐光滑湿润的菌落(H。S 迟缓阳性或阴性菌株)，也有在山梨醇麦康凯平
4、板上迟缓发酵山梨醇的红色菌落。表1 36株柠檬酸杆菌药敏性()22 种类分布 506份标本共检出呈纯培养或优势生长的柠檬酸杆菌36株，检出率为72 ，其中 5岁4,JL共检出24株，检出率为47 。分类见表2。表2 36株柠檬酸杆菌种类分布23 血清凝集试验结果与沙门菌属诊断血清凝集结果：有3株弗氏柠檬酸杆菌分别与O4、05，O11、Hm，O9有交叉反应，有1株杨氏柠檬酸杆菌与04、Hc有交叉反应；1株无丙二酸柠檬酸杆菌与痢疾志贺菌2型血清有交叉凝集反应；1株弗氏柠檬酸杆菌与O157大肠埃希菌0诊断血清有交叉反应，与H7无交叉凝集。其余菌株均无交叉凝集反应。3 讨论作为条件致病菌无论是侵袭性的
5、还是非侵袭性的，都有可能造成肠粘膜发生炎症、溃疡、出血，使粪便中WBC、RBC 的数目增加；柠檬酸杆菌也能引起脓血粘液便，使临床上误认为痢疾，赵惠敏等曾对100例临床诊断为菌痢的患者脓血便中检出的致病菌为柠檬酸杆菌4例(未检出志贺菌等其他致病菌)L4，笔者在对柠檬酸杆菌鉴定过程中遇到5例是脓血便标本，其中1例菌株与志贺菌有交叉抗原，先误认为是志贺菌，后经安徽省卫生防疫站证实为无丙二酸柠檬酸杆菌，此菌株为乳糖、H。S迟缓发酵，与痢疾志贺菌2型有交叉抗原，因此，菌痢的诊断病原学是关键。与志贺菌属有交叉抗原的报道还不多见，文献记载无丙二酸柠檬酸杆菌的O抗原与痢疾志贺菌和鲍氏志贺菌中的血清变型有密切关
6、系；由于沙门菌与柠檬酸杆菌的G+C含量相近，分别为(5053)mol 和(5O 52)mol ，因此两属间亲缘关系较近，此次检出的柠檬酸杆菌与沙门菌属有交叉抗原与文献报道基本一致5 ；与O157大肠埃希菌有交叉抗原近来也屡有报道，如李优良等报道2株弗氏柠檬酸杆菌、杨毓杯等报道1株布氏柠檬酸杆菌与O157大肠埃希菌诊断血清0 及H7均呈强凝集。因此，在柠檬酸杆菌作鉴定时，一定要注意与有相关抗原的菌株混淆。此菌抗原多样性与其致病性是否相关有待进一步研究。本次5岁小儿柠檬酸杆菌的检出率为47 ，构成比为667 ，因为柠檬酸杆菌属机会感染的病原微生物，由于小儿身体合成IgM 能力不足，体内IgM 水平
7、低，对革兰阴性杆菌的易感性较年长儿和成人高，尤其是在机体抵抗力下降或滥用抗生素时，更易引起菌群失调又诱发或加重腹泻。文献报道的致泻菌多为弗氏柠檬酸杆菌1 ，也有布氏柠檬酸杆菌引起食物中毒的报道，本次检出的柠檬酸杆菌有5种，以弗氏为主，对其分类，笔者认为对控制其流行，追踪传染源具有重要的流行病学意义。对36株柠檬酸杆菌7种抗生素药敏结果统计表明，对喹诺酮类及头孢类药物较敏感。所有抗生素均有不同程度的耐药，对氨苄西林的耐药率高达944 ，对诺氟沙星的耐药率也达145 ，对庆大霉素的耐药率虽然只有153 ，但其敏感性只有435 ，这与其长期大量使用，使细菌耐药变迁不无关系。临床在使用抗生素时，应根据
8、药敏感结果注意选择，合理地选用抗生素减少抗生素滥用对人类带来的潜在危害。(中铁四局集团中心卫生防疫站王家淳同志协同我们做了大量工作，特此致谢I)参考文献：1 周文华，刘俊凌，冯平，等25例柠檬酸杆菌肠炎临床分析口中华流行病学杂志，1998，19(4一B)：16416522 AnonOTC-JInt J System Bacteriol，1993，6456583 赵克义，阚方琦，李景学柠檬酸杆菌的分类近况J中国卫生检验杂志，2001，11(2)：2522554 赵惠敏，王辉元100例临床诊断为菌痢患者粪便标本的病原学检测J中华流行病学杂志，1997，18(6一B)：580-5815 王品，吴学明，周风岩，等，枸橼酸菌属与沙门氏菌属的抗原交互反应及枸橼酸菌属的鉴别要点J中国卫生检验杂志，2000，10(1)112O 一 1 21
