1、鞍带石斑鱼仔稚幼鱼的发育和生长研究 1郭仁湘 1，符书源 1，杨薇 1， 陈国华 1，刘扬潮 2，周先雄 3（1 海南大学海洋学院，2 海南生利水产繁殖有限公司，3 万宁业兴水产养殖有限公司）摘要:对鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)的仔稚幼鱼形态发育的各个阶段进行了观察与研究，详细描述从初孵仔鱼到幼鱼发育时期的形态特征和发育时间。根据研究观察结果，鞍带石斑鱼胚后发育主要根据卵黄囊的变化，长鳍棘的长出与收缩，鳞片和体色斑纹的出现分为仔鱼期、稚鱼期、幼鱼期。仔鱼期根据卵黄囊的有无又分为早期仔鱼和晚期仔鱼。在水温 2730 0C，盐度2731，pH8.0 8.4 的海水中
2、培育，初孵仔鱼至孵化后 2 日龄为前期仔鱼 ，2日龄仔鱼开口；孵化后 3 日龄至 20 日龄为后期仔鱼；孵化后 22 日龄至 30 日龄为稚鱼期；孵化后 31 日龄进入幼鱼期。鞍带石斑鱼胚后发育过程中最明显的变化是背鳍棘和腹鳍棘的生长和收缩，也是生产育苗当中比较关键的仔稚幼鱼变态过程。关键词：鞍带石斑鱼 仔鱼 稚鱼 幼鱼 生长发育 鞍带石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)俗称龙胆石斑鱼，隶属鲈形目(Perciformes)、鮨科(Serranidae) 、石斑鱼属( Epinephalus)，为暖水性、中下层珊瑚礁鱼类，分布于印度洋非洲东岸至太平洋中部密克罗尼西亚，南至澳大
3、利亚，我国产于南海诸岛和海南岛等海域，但数量稀少。鞍带石斑鱼是石斑鱼类中体型最大的种类 1。具有生长速度快，抗病性强，肉质鲜美等诸多优点，且肌肉氨基酸组成与人体氨基酸组成较为接近，营养价值高，深受消费者的喜爱 2，成为养殖前景极大的石斑鱼种类，深受养殖业者的喜爱。在鞍带石斑鱼的生长发育过程中，仔稚鱼阶段是非常重要的时期，这期间要经历变态，其生理结构，生活习性都要发生很大的变化，能否顺利的度过生长发育的初期阶段，完成变态和进入幼鱼期，这是决定鞍带石斑鱼成活率的重基金项目：海南省重点科技计划资助项目（06119）、“十一五”国家科技支撑计划重点项目（2007BAD29B03）* 通讯作者：陈国华
4、( 1956 )，教授。研究方向：鱼类人工繁育，电子邮箱：要因素 3。因此，全面系统的了解仔稚鱼及幼鱼的生长发育特点，其与养殖环境的关系，将有助于解决鞍带石斑鱼人工增养殖过程中难以培育健康苗种这一关键问题，从而有助于提高鞍带石斑鱼种苗的质量。本文研究了鞍带石斑鱼仔稚幼鱼发育的过程，以期获得鞍带石斑鱼人工繁育的基础理论支持，用于指导育苗生产实践。1 材料与方法1.1 仔、稚、幼鱼的培育鞍带石斑鱼仔稚幼鱼的培育在万宁业兴水产养殖有限公司和乐镇港北育苗基地进行，培育池塘为 50m50m2m 的虾池经改造而成，共投放仔鱼53.76104 尾，水温 2730 0C，海水盐度 2731， pH8.08.4
5、，池塘四周每隔 3m投放一个气石充气增氧，放苗前经肥水并投放有益微生物菌群营造生态育苗环境，并根据水色变化而不定期添加小球藻，在池塘中培养开口饵料生物并在开口后逐步投放轮虫，桡足类和枝角类，卤虫幼体，鱼浆和颗粒配合饲料。1.2 仔稚鱼的取样和形态特征观察每天坚持巡塘观察鱼苗生长发育情况并于傍晚至天黑时待鱼苗分布均匀后随机连续取样，由于池塘育苗仔稚鱼发育较快前十天每天取样，其后每隔两天取样。每次取样 1520 尾使用 7%的甲醛溶液固定观察测量。形态观察于光学显微镜下进行并在解剖镜下拍照存档，长度测量使用测微尺测量。2 结果2.1 鞍带石斑鱼仔稚幼鱼形态特征2.1.1 卵黄囊期仔鱼 （从初孵到卵
6、黄囊消失） 。初孵仔鱼头部至尾部前段呈微褐色，无游泳能力悬浮于水中，尾部偶尔做高频率的抖动在水中作短暂的串行。身体前端有一大的椭圆型的卵黄囊，长度超过仔鱼全长的 1/2。卵黄囊靠前端有一圆形的油球，消化管细长管状，向下弯曲，此时处于封闭状态。脊索细长弯曲。背部和尾部有透明的鳍褶（图版 1） 。第 1d 仔鱼：仔鱼身体变得更加细长，头部进一步增大，眼窝变大和消化道弯曲处，尾部中段一起出现少量黑色素，口窝也已形成。背部，腹部和尾部的鳍褶基本相连，头部后端的腹部出现胸鳍芽基。卵黄囊后移至腹部下边大幅度缩小约只占全长的 1/7，油球也后移至卵黄囊的中后部且明显变小。此时消化道已开口于外界。仔鱼目视观察
7、仍通体透明略有发白，浮于水的中上层头朝下，不时作垂直朝水面运动，或偶尔朝烧杯底部垂直游动并用吻端撞击杯底，在水中仔鱼开始感应到水流，运动能力开始有所加强（图版 2） 。第 2d 仔鱼：目视下，身体头部和消化道，尾部中段黑色素增多，可清楚看到三黑点直线排列而明显与其他石斑鱼的仔鱼不同。全长略有增加，卵黄囊和油球已消耗大部分。口裂形成，下颌长于上颌，下颌微微上翘，上下颌可以做张合动作。消化道末段膨胀明显呈喷嘴状。胸鳍变大呈扇状。此时仔鱼的运动能力已大大加强，在水中可自如平游并不时对水中的饵料生物发起攻击以上下颌吞食作撕咬状，围绕气头摄食（图版 3） 。2.1.2 后期仔鱼 (从卵黄囊消失到各鳍基本
8、形成、腹鳍棘和第二背鳍棘绝对长度长到仔稚鱼阶段最大值、鳞片出现和体色开始形成之前)。第 3d 仔鱼：卵黄囊消失，油球只剩下一小滴残迹。三个黑点继续变大加深，鳃盖形成 ，鳃盖骨系的骨骼分界明显 ，消化管变短、加粗，膀胱增大。仔鱼开始集群活动，喜欢聚集于背光处的池角落和气头周围。至第 4d 仔鱼的油球已消失，胸鳍条出现，腹部下方开始覆盖大量的黑色素同上方的黑点连成一片（图版 4） 。第 6d 仔鱼：背部和腹部鳍褶变窄，腹鳍棘和背鳍棘原基开始出现，背鳍棘原基开始时发育较慢，尾鳍弹性丝出现。仔鱼集群明显，呈黑色（图版 5） 。第 7d 仔鱼：背鳍棘芽和腹鳍棘芽分别出现在消化道的正上方和正下方，尾鳍鳍条
9、出现。仔鱼此时主要活动于水的中上层（图版 6） 。第 8d 仔鱼：第二背鳍棘和一对腹鳍棘明显变长，此时腹鳍棘长于背鳍棘，位于腹鳍棘末段出现黑色素。此时仔鱼口部增大，胸鳍原基增大但未见到鳍条，腹部除肛门以上的喷嘴形消化管外大部为黑色素所覆盖（图版 7） 。第 9d 仔鱼：第一背鳍棘原基出现，尾鳍鳍条增多较为愈加的明显。鱼体变长。第 10d 仔鱼：第一背鳍棘长出但较短，同时第三背鳍棘原基也已出现（图版 8） 。第 11d 仔鱼：第三及第四背鳍棘已经长出，其他的背鳍棘原基也出现。此时尾鳍进一步发育，尾椎开始向上弯曲。臀鳍鳍条也已出现（图版 9） 。第 14d 仔鱼：背鳍长出了 3 根鳍棘，臀鳍也出现
10、了一根鳍棘，胸鳍和尾鳍进一步发育，鳍条变得很明显了。背鳍下段出现细小的鳍条。此时第二背鳍棘的绝对长度和相对长度（同全长相比）开始超越腹鳍棘。鳃盖骨分化显着，上颌骨内口中可见有短而尖的透明牙齿（图版 10） 。第 16d 仔鱼：鳃盖骨后缘出现多枚小棘。尾椎向上弯曲明显。臀鳍开始长出第二根鳍棘。前鳃盖骨后缘出现了 4 枚小棘，而主鳃盖骨后缘长出 3 枚小棘，其中一枚较突出。此时仔鱼第二背鳍棘和腹鳍棘的相对长度达到了仔稚鱼阶段的最大值，分别为 57.6%和 50.57%。第二背鳍棘的增长速度加快，长度开始远超腹鳍棘。此时还可观察到这三条长鳍棘上布有许多小刺形成锯齿状。第 18d 仔鱼：第一背鳍的鳍棘
11、已出现六条，除第一鳍棘外其他四条都无法与第二背鳍棘相比，其长度依次递减。而第二背鳍和臀鳍已基本成形，鳍膜和尾鳍分离明显。主鳃盖骨上靠近胸鳍下方的小棘长度增加为另外 2 小棘的四到五倍。第 20d 仔鱼：第二背鳍棘和腹鳍棘绝对长度达到仔稚鱼阶段的最大值。鱼体头部眼眶斜后上方色斑增多并有向胸鳍附近扩大之势。第一背鳍和第二背鳍已连在一起，臀鳍第一鳍条变粗形成鳍棘，各鳍已基本形成。2.1.3 稚鱼 (从腹鳍棘和第二背鳍棘开始与其他鳍棘、 鳍条相对长度变小、 鳍棘上的小刺数目急剧减少至完全消失、 鳞片出现到全身披鳞)。第 2230d 稚鱼：从第 22d 起，第二背鳍棘和腹鳍棘的绝对长度开始变小，至第 2
12、9d 时达到最小值。此逐步收缩的过程，通常在育苗生产中称为收刺。同时鳍棘上的小刺数量急剧减少并逐步收回。眼眶周围主鳃盖骨上的 3 小棘也逐渐收缩。鱼体表面开始出现细小的鳞片，此后渐渐扩展至鱼体全身披鳞。鱼体身上的斑纹也开始连成片，从头部向肛门扩展。此时的稚鱼仍营浮游生活，但主要活动水层已转入中下层水，游动迅速，天微亮和傍晚时可看到鱼群沿池塘边环游索饵（图版 11，12） 。2.1.4 幼鱼 (从腹鳍棘和第二背鳍棘绝对长度收缩到稚幼鱼阶段的最小值、 以及这 3 根鳍棘上的小刺已消失、 鳞片长齐即开始进入幼鱼阶段)。第 31d 幼鱼：第二背鳍棘和腹鳍棘的绝对长度收缩到稚幼鱼阶段的最小值后又开始缓慢
13、增长，三根鳍棘上的小刺也完全消失而显的光滑起来，鳞片已完全长齐，侧线明显，鱼体上可以看到吻部和眼眶下方和斜后上方三块不规则的斑纹以及臀鳍上方连至背鳍，还有尾柄处的两处纵带斑纹都显黑色，鳍和其他部位则显淡黄色。此体色特征只属于幼鱼阶段特有的体色，与成鱼以及亲鱼差别较大，但习性和其他的形态特征都与成鱼相似。在幼鱼阶段，第二背鳍棘和腹鳍棘收缩完成开始进入正常生长阶段，而腹鳍棘的长度又一次超越第二背鳍棘。此时期的幼鱼已开始栖息于池底，较喜欢躲藏于隐蔽物中，未经驯化一般不轻易游至水面索饵（图版 13） 。2.2 鞍带石斑鱼仔、稚、幼鱼的生长2.2.1 人工育苗条件下仔、稚、幼鱼的生长鞍带石斑鱼的仔稚幼鱼
14、的生长态势图见图 4-2-1。可以发现，鞍带石斑鱼仔稚幼鱼的生长特点如下 1）仔鱼刚孵化后至 1 日龄期间，仔鱼全长增长较快，出现第一次快速生长，而此后至 7 日龄期间，仔鱼生长缓慢；2）仔鱼至 8 日龄时，开始长出背鳍棘和腹鳍棘，仔鱼生长出现第二次加速；3）仔鱼从 16 日龄起，全长增长进入高速生长期直至进入幼鱼阶段；4）至于体高的生长,前期由于卵黄囊的消耗而出现了短暂的负增长，但后期即进入平缓的生长直到进入第16d 后才迎来了快速生长期维持至第 27d，此后趋于平缓。图 2-2-1 鞍带石斑鱼仔、稚、幼鱼的生长Fig 2-2-1 Growth of larvae,juveniles,you
15、ng fish of Epinephelus lanceolatus 2.2.2 仔稚幼鱼第二背鳍棘和腹鳍棘的生长变化鞍带石斑鱼仔稚幼鱼发育过程中背鳍棘和腹鳍棘的生长和收缩是非常有意思的现象，也是生产育苗当中比较关键的仔稚幼鱼变态过程，而与此相关的变化可见图 4-2-2。在仔鱼孵化后第 7d 出现了背鳍棘和腹鳍棘的原基，于第 8d长出鳍棘。开始时是腹鳍棘发育较快，第二背鳍棘直至孵化后第 14d 才开始超越腹鳍棘的长度，直到孵化后第 29d 由于收缩速度较快此时以接近腹鳍棘的长度，进入幼鱼期后便再次被腹鳍棘超越。第二背鳍棘和腹鳍棘的绝对长度的最大值出现在孵化后第 20d，分别为 7.35mm 和
16、 6.03mm，之后便开始收缩直到幼鱼期。而第二背鳍棘和腹鳍棘的相对长度在孵化后第 16d 时进入最大值见图 4-2-3，分别为 57.6%和 50.57%，之后也进入下降的趋势。图 2-2-2 腹鳍棘和第二背鳍棘长度的变化Fig4-2- 2 Changes of the length of pelvic fin spine and 2nd dorsal fin spine图 2-2-3 腹鳍棘和第二背鳍棘相对长度的变化Fig 4-2-3 Changes of relative length of pelvic fin spine and 2nd dorsal fin spine3 讨论3.1
17、 鞍带石斑鱼胚后发育阶段的划分胚后发育主要依据卵黄囊的变化，长鳍棘的长出与收缩，鳞片和体色斑纹的出现可分为仔鱼期，稚鱼期，幼鱼期。1 仔鱼期：分为 1) 卵黄囊期仔鱼，该阶段为内源性营养阶段，营养主要由卵黄囊提供，卵黄囊的消失标志着这个阶段的结束。2) 后期仔鱼，这一时期在形态、生态、生理上变化相当剧烈。本期仔鱼完成从内源性营养到外源性营养的过渡，是育苗过程中的一个关键时期，死亡率极高，又称其为仔鱼的危险期。在后期仔鱼结束的标志上，不同学者的看法有所不同，陈国华等 20014认为以鳍的基本形成作为点带石斑鱼后期仔鱼期结束的标志；邹记兴等 20035认为点带石斑鱼仔鱼的腹、背鳍棘开始收缩，鳞片长
18、出前为后期仔鱼结束的标志；而根据本研究表明，鞍带石斑鱼仔鱼在孵化后第 20d 时，仔鱼各鳍已基本发育形成，鳍式和形状也基本和成鱼相似，而腹、背鳍棘的绝对长度已发育至早期发育阶段的最大值，其后便开始逐步收缩。因此这里将仔鱼各鳍基本发育形成作为后期仔鱼结束的标志。2 稚鱼期：指的是后期仔鱼的腹、背鳍棘开始收缩，鳞片开始长出至全身披鳞结束。此期乃仔鱼变态的延续，将完成仔鱼到幼鱼过渡的阶段。育苗生产上通常将鱼苗在稚鱼期结束前，稚鱼仍处于浮游生活时便将鱼苗捕获分级筛选进入生产上的标粗（中苗培育）阶段，以有效的避免进入幼鱼期后严重的自相残杀。3 幼鱼期：该期鱼苗全身覆盖鳞片，身体形成斑纹，鱼苗个体在形态上
19、、习性上都与成鱼相似。3.2 鞍带石斑鱼仔稚鱼的生长由仔稚鱼的生长曲线图可以看到仔鱼前期生长缓慢直至孵化后第 8d 和第16d 时才开始加速生长，这里可能主要与其食性开始转化有关，孵化后第 8d 时仔鱼随着不断的发育，此时开始摄食大轮虫和小桡足类，正经历着从轮虫过渡到桡足类的阶段，而在孵化后第 16d 时由于鱼体各鳍的发育逐渐成型，对桡足类的捕食成功率也大大提高，而桡足类的不饱和脂肪酸含量 7， 8较轮虫更高，因此出现了中后期的高速增长期，直至进入幼鱼阶段。3.3 腹鳍长棘、背鳍长棘在鞍带石斑鱼早期发育阶段出现的生物学意义通过对仔稚鱼培养的观察，可以发现随着腹鳍、背鳍长棘在仔鱼身上长出，仔鱼便
20、开始逐渐摄食个体较大的桡足类。由于桡足类运动速度和运动方式较轮虫有着较大的不同，相应地增加了仔稚鱼对桡足类个体的捕食难度。而这一时期的仔稚鱼在摄食桡足类个体时一般都围绕在气头周围，正面迎着顺水流经的桡足类个体，这时背鳍长棘和腹鳍长棘呈三角状的张开显然有助于鱼体在水流中保持身躯的稳定，起到了类似于高速船舶上的减震板和飞机上的垂直尾翼的作用，而鱼体身躯的稳定又帮助了其对运动的桡足类个体的准确定位，然后调整姿态突然地发起攻击，这时背鳍长棘和腹鳍长棘一同快速收至紧贴鱼体的位置起到了桨的作用增加了向前的作用力因而大大提高了对桡足类的捕食成功率。因此作者认为鞍带石斑鱼腹鳍、背鳍长棘在早期发育阶段的出现有着
21、其特殊的生物学意义，是鞍带石斑鱼在仔稚鱼阶段适应早期浮游生活的产物，也是其在各鳍尚未发育完全前由仔鱼阶段向稚、幼鱼阶段过渡的产物。而随着鱼苗进入幼鱼期转而开始底栖生活后，各鳍发育完成，鱼苗的腹鳍长棘、背鳍长棘也相应的收缩至普通鳍棘的水平。参 考 文 献1 张海发，王云新等鞍带石斑鱼人工繁育及胚胎发育研究J广东海洋大学学报，2008,28(4)：36-402 龚孟忠，陈慧，范希军龙胆石斑鱼引种及人工育苗技术的初步研究J.福建水产，2004(1)：47-503 王珺，陈国华，尹绍武.斜带石斑鱼受精卵及仔稚鱼生理生态学的研究进展J.海南大学学报（自然科学版） ，2008， （02）.4 陈国华,张本
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24、形态、生长发育的研究J. 浙江水产学院学报,1993,12(3):165173.15 许波涛,李加儿,周宏团.赤点石斑鱼的胚胎和仔鱼形态发育J.水产学报,1985 ,9(4) :369374.16 殷名称.北海鲱卵黄囊期仔鱼的摄食能力和生长J.海洋与湖沼， 1991,22（6）:554560.17 Heemstra P C,Randall J E. FAO species catalogue, Groupers of the World (Family Serranidae, Subfamily Epinephelinae)M.Food and Agricultur Organization
25、of the United Nations, Rome. 1993,Vol 16.图版 plate 1. 初孵仔鱼；2. 1d 仔鱼；3. 2d 仔鱼；4. 3d 仔鱼；5. 6d 仔鱼；6. 7d 仔鱼；7. 8d 仔鱼；8. 10d 仔鱼； 9. 11d 仔鱼；10. 14d 仔鱼；11. 23d 稚鱼；12. 26d 稚鱼；13. 31d幼鱼.Study on the growth and development of larva,juvenile and young fish of Epinephelus lanceolatusGUO Renxiang1，FU Shuyuan 1，YA
26、NG Wei 1，CHEN Guohua 1*，LIU Yangchao 2，ZHOU Xianxiong 3（College of Ocean ，Hainan University；Hainan Sheng Li aquatic breeding co., Ltd；Wanning industry-aquaculture co., Ltd.）Abstract:The growth and development of larva, juvenile and young fish of Epinephelus lanceolatus are dealt with in this paper.
27、The morphological features and the developmental time of the post embryonic development stages were described in great detail from larva to young fish. Based on the data obtained, The post embryonic development of Epinephelus lanceolatus was divided into larval stage, juvenile stage as well as young
28、 fish stage, based on the features of the yolk-sac, pelvic fin spine, second dorsal fin spine, scale and body color. Accordingly, the larval stage was further classified into early larva and late larva, with or without yolk-sac, respectively. At the water temperature of 2730 and the salinity of 2731
29、,pH 8.08.4,the embryonic developed 2 days to the stage of prelarvae, and 18days to postlarvae. The mouth could be seen two days after hatching. The juvenile stage developed from 22 to 30 days after hatching. After 31 days, the fish developed into the early young fish period. The growth and configuration of the second spine of dorsal fin and the first spine of ventral fin is the most obvious changes during early development of Epinephelus lanceolatus.Key words:Epinephelus lanceolatus ； larva ；juvenile ；young fish ； Growth and development
