1、 BioWiseTech Co., LTD 1AdvCell 哺乳细胞快速扩增无血清培养基AdvCell 哺乳细胞快速扩增无血清培养基（BFRM0002）根据哺乳类生物细胞的生长需要，包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质、优选的胎牛血清以及其他补给成分。产品严格无菌，无病毒和支原体，性能稳定，使用该培养基能使干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化（至少在10代以内）。 产品号Cat No : BFRM0002 产品组成名称 产品号 规格 贮藏条件 运输AdvCell 哺乳细胞基本培养基AdvCell Mammalian Cell Cultur
2、e Base Medium BMSM0001 500 ml 2-8避光 冰袋/常温AdvCell 细胞垫 AdvCell Cellpad BCP0001 100 ml 2-8避光 冰袋/常温AdvCell 哺乳细胞培养添加物 AAdvCell Mammalian Cell Culture Supplement ABMCS0001A 20 ml -20避光 干冰AdvCell 哺乳细胞培养添加物 BAdvCell Mammalian Cell Culture Supplement BBMCS0001B 1ml -20避光 干冰 产品适用范围适用于贴壁哺乳细胞的培养与快速扩增，细胞类型包括成纤维细
3、胞、内皮细胞等可增殖的原代细胞，以及各种细胞系等。 使用注意事项1.完全培养基的制备：将以上 AdvCell 哺乳细胞快速扩增无血清培养基（ BFRM0002）中的 AdvCell 哺乳细胞基本培养基（BMSM0001）、AdvCell 细胞垫 （BCP0001）、 AdvCell 哺乳细胞培养添加剂 A BioWiseTech Co., LTD 2（BMCS0001A） AdvCell 干细胞培养添加物 B（BMCS0001B）于37 解冻并迅速混合。2.完全培养基的存储：配制好的完全培养基放在 4冰箱避光保存，并尽量在一个月内使用完。3.根据需要，培养过程中可添加一定剂量青霉素链霉素(PS
4、)。 培养条件37，5% CO 2，无菌恒温培养。 细胞培养【复苏】1.把完全培养基放入37水浴中预热；2.从液氮中取出哺乳细胞迅速放入37水浴快速解冻（解冻后不要继续孵育细胞）；3.在超净台中加入5 ml 的 完全培养基重悬细胞，1000 rpm 离心5 min；4.弃上清,加入5 ml 的完全培养基重悬细胞，转移到 T-25细胞培养瓶中（带滤芯）；5.将培养瓶置于37，5% CO 2 的无菌培养箱中培养；6.第二天用新鲜的完全培养基给细胞换液。【传代】1.在显微镜下观察细胞，当细胞融合度达到80%时，即可传代培养；2.37水浴预热培养基；3.在超净台中，弃掉 T-25细胞培养瓶中的培养基，
5、加入2 ml PBS 清洗，再加入1 ml 0.25%胰酶-EDTA 消化细胞；4.在显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，即可加入5 ml 完全培养基终止消化；5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散；6.将细胞转移至15 ml 离心管中，1000 rpm 离心5 min；7.弃上清,加入15-20 ml 的 A 完全培养基重悬细胞后转入 T-75细胞培养瓶中或按适当比例接种到 T-25细胞培养瓶中（确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间），细胞密度在110 4 cells/cm2 (2.5105 cells/T-25 瓶），混合细胞悬液，确保细胞均匀分布；8.将培养瓶置于37，5% CO 2 的无菌培养箱中培养；9.每两天用新鲜、预热的完全培养基进行换液。
