1、选修三导学案 专题 2 细胞工程2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 编制人：刘焕芹 张素梅 日期：2012-3-7学习目标：1.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。2.理解单克隆抗体的制备和应用。学习任务：【自主完成】 【小组讨论】 阅读课本 52 页，回答下列问题。一、动物细胞融合 1、动物细胞融合前需要做何处理？怎么处 1、概念： 理？ 2、原理： 3、常用的促融方法（手段）物理方法： 化学方法：生物方法： 2、比较动物细胞融合与植物体细胞杂交（原理、促融方法、融合目的）的异同。 4、动物细胞融合的目的： 5、动物细胞融合完成的标志： 6、意义： 阅读课本
2、 52-54 页，回答下列问题。二、单克隆抗体 1、传统抗体的制备方法及特点 方法：特点：2、单克隆抗体的制备 （1）过程： 抗原注入小鼠体内 1、如何制备产生特异性抗体的 B 淋巴细分离 胞？B 淋巴细胞 骨髓瘤细胞 2、为什么选用 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞 （ ） 融合? 多种杂交细胞（ ）杂交瘤细胞 （ ） （ ）3、B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞经过融合处产生所需抗体的杂交瘤细胞 理后，培养液中可以产生几种融合的细胞？培养液中共有几种细胞？小鼠腹腔 （ ）内增殖4、单克隆抗体的制备过程中有几次筛选？每次筛选的目的是什么？怎样单克隆抗体 筛选？ （2）杂交瘤细胞的特点： 3、单克隆抗体的应用
3、（1）单克隆抗体的优点： （2）应用： ：具有 的优点。 ：选修三导学案 专题 2 细胞工程 ：“生物导弹”的组成：“生物导弹”的优点：课堂检测：完成优化方案81 页“课时训练 8” 3课堂训练1单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于（ ）A 单克隆抗体的制备过程简单B单克隆抗体可以在体外制备C单克隆抗体可以在体内制备D单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，产量也大大高于血清抗体2与传统的有性杂交法相比，植物体细胞杂交的最大优点是（ ）A、 可使两个亲本的优良性状组合到一起B、可以克服远缘杂交不亲和的障碍C、可以培育出高产性状优良的新品种D、可以降低生产成本提高经济效益3在动物细胞培养过程中出现遗传
4、物质改变的细胞是（ ）A细胞系 B细胞株 C原代细胞 D细胞4要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的效应 B 淋巴细胞形成杂种细胞后进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ ）A在体外培养条件下效应 B 淋巴细胞可以无限增殖B在动物体内效应 B 淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体C每一种效应 B 淋巴细胞都参与特异性免疫反应D每一种效应 B 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体5下列生理活动与生物膜无关的是（ ）A.ATP 分子的形成 B.神经递质释放到突触间隙内C.抗体与 SARS 病毒特异性结合 D.原生质体融合成杂合体细胞6在植物细胞工程中，当原生质体融合成一个细胞后，需要诱导产生出细胞壁，参与这一
5、过程的细胞器是（ ）A.叶绿体、高尔基体 B.线粒体、高尔基体 C.叶绿体、线粒体 D.线粒体、内质网7 （多选）将小鼠骨髓瘤细胞与一种 B 淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（ ）A.B 淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖B.B 淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C.骨随瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体D.骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖8单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是 （ ）B 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞B 淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细
6、胞杂交瘤细胞A B C D9 （2005，广东）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是 （ ）A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产10动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 （ ）A.动物细胞培养 B动物细胞融合 C单克隆杭体 D胚胎、核移植11关于杂交瘤细胞的不正确叙述是 （ ）A有双亲细胞的遗传物质 B不能无限增殖C.可分泌特异性抗体 D体外培养条件下可大量增殖12.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ ）A.克服远源杂交不亲和 B.制各单克隆抗体C.培育新品种 D.生产杂种细胞13.如果
7、用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是 （ ）A、乳腺细胞的 B、卵细胞的 C、胃腺细胞的 D、囊胚时期的胚胎细胞的14 （多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管.这种血管的外形和功能都与真的血管一样,这一研究成果是生物组织培养领域的重大进展.下列关于以上技术的叙述中,正确的是: A属于“克隆” B可能要利用去核卵细胞 C关键是激发血管细胞的全能性 D关键是激发血管细胞发育成血管的潜能（二）非选择题：15下图表示水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知该水稻的基
8、因型为 AaBb。请回答：（1）配制培养基时加琼脂的目的是 ；（2）组织培养要求无菌操作的目的是 ；选修三导学案 专题 2 细胞工程（3）在愈伤组织形成过程中必须从培养基中获得水、 以及 等营养物质，此时它的新陈代谢类型是 ；（4）要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有 和 两类植物激素；由花药诱导成为愈伤组织的过程称 ，由愈伤组织重新长出根或芽等器官称 ；（5）培养出的试管苗可能出现的基因型有 ；（6）花药离体培养在育种方面有什么优点 ；（7）该试管苗需经 处理，使它的 ，才能成为可育的植株。16在一定时期内某动物细胞吸收放射性同位素标记的氨基酸，一段时间后，经检查发现下图部位有该放射性同位
9、素。请据图回答：（“ ”内填标号， “ ”上写名称。 ）（1）图中和分别代表的结构是 、 。（2）图中部位的物质是 ，它首先是由附着在 上的 合成，在 上进一步加工而形成的。（3）图中部位物质的合成、加工和运输过程中，需要大量的能量，来自 供给。（4）若该图表示人体的淋巴细胞，则部位的物质为 ，它具有 功能。 17下图为细胞融合技术的一些过程，据图回答下列问题：（1）由 A、B 两种细胞人工融合成 C 细胞的过程中，常用 作为诱导剂。融合过程包括 和 两方面，D 细胞称为 细胞。（2）若 A、B 细胞为植物细胞，那么这些细胞已经用酶降解脱掉 。这种酶可能是 ，由此生成的 A 和 B 细胞称为
10、。若由 D 细胞培育成植株，可用 技术，这一培养过程要经过 和 两个阶段。目前，植物体细胞杂交还有许多理论和技术问题没有解决，如杂种植物还不能按照人们的需要表现出亲代的优良性状，从遗传学角度分析，其内在因素很可能是 。（3）若 A 细胞为骨髓瘤细胞，B 细胞为 B 淋巴细胞，那么 D 细胞称为 ，由 D 细胞连续分裂产生大量细胞的过程，称为 过程。这种细胞既能无限繁殖，又能产生 。（4）若 A 为人细胞，B 为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在 C 细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。到 D 细胞阶段，两种颜色的荧光匀分布，请解释原因： 。选修三导学案 专题 2 细
11、胞工程2.2 动物细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体【自主完成】 一、动物细胞融合1、概念：动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2、原理：细胞膜的流动性3、常用的促融方法（手段）物理方法：电激、离心、振动 化学方法：聚乙二醇 生物方法：灭活的病毒4、动物细胞融合的目的：获得杂交细胞，以生产细胞产品5、动物细胞融合完成的标志：细胞核融合6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段，特别是利用细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。【小组讨论】1、需
12、要将离体的动物组织分散为单个细胞。用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。2、植物体细胞杂交原理:细胞膜的流动性、细胞的全能性。促融方法：物理方法：电激、离心、振动 化 学方法：聚乙二醇 目的：获取杂种植株。动物细胞融合原理：细胞膜的流动性。促融方法：物理方法：电激、离心、振动化学方法：聚乙二醇 生物方法：灭活的病毒 目的：获得杂交细胞，以生产细胞产品。【自主完成】 二、单克隆抗体 1、传统抗体的制备方法及特点 方法：传统的抗体生产方法是向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生抗体，然后从动物血清中分离所需要的抗体。特点：产量低、纯度低、特异性差。2、单克隆抗体的制备（1）过程：诱导融合、筛选、克隆化培养、
13、单一抗体检验、体外培养（2）杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体。3、单克隆抗体的应用（1）优点：特异性强，灵敏度高，并可大量制备。（2）应用：作为诊断试剂：准确 高效 简易 快速 治疗疾病 运载药物“生物导弹”的组成：“生物导弹”单克隆抗体药物放射性同位素优点：疗效高、毒副作用小。【小组讨论】1、 向小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的 B 淋巴细胞。2、 每一个 B 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体；不同种类的 B 淋巴细胞分泌的抗体不同； B 淋巴细胞在体外培养时不能无限增殖；骨髓瘤细胞能够无限增值。动物细胞融合形成的杂交瘤细胞含有 B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞的
14、遗传物质，因此，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特异性抗体。3、 可以产生 3 种融合细胞：B 淋巴细胞与 B 淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，只有 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合细胞才是所需要的杂种细胞。共有 5 种细胞，另两种是没有发生融合的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞。4、 两次筛选。第一次筛选的目的是获得杂交瘤细胞；用选择培养基进行筛选。第二次筛选的目的是筛选出能产生所需特异性抗体的杂交瘤细胞，筛选的方法是单一抗体检验。课堂训练答案1、D 2、B 3、A 4、D 5、C 6、B 7、AC 8、A 9、D10、A11、B12、B13、B14、ABD
15、15、(1)使培养基呈固体状态，有利于外植体生长(2)防止微生物在培养基上生长，与离体培养的植物竞争(3)无机盐 小分子有机物 异养、需氧型(4)细胞分裂素 生长素 脱分化 再分化(5) AB、 Ab、Ab 、ab(6)后代都是纯合体，能够明显缩短育种限(7)秋水仙素 染色体数目加倍16、 （1） 高尔基体 细胞膜 （2）分泌蛋白 内质网 核糖体 高尔基体 （3） 线粒体 （4）抗体 免疫17、(1) PEG （聚乙二醇） （或灭活的病毒） 膜融合 核融合 杂种 (2)细胞壁 纤维素酶和果胶酶 原生质体 植物细胞培养 脱分化 再分化 控制优良性状的基因还不能表达 (3)杂交瘤细胞 克隆 单一抗体( 单克隆抗体) (4)构成细胞膜的磷脂分子和蛋白质分子大多是可以运动的，说明细胞膜具有一定的流动性选修三导学案 专题 2 细胞工程
