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血清白蛋白测定及紫外分光光度计的使用.ppt

上传人:fmgc7290 文档编号:7196846 上传时间:2019-05-09 格式:PPT 页数:9 大小:116.50KB
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资源描述

1、血清白蛋白(ALB)的测定 (Assays for Serum Albumin) (溴甲酚绿染色法),一、原理 二、测定方法 三、参考值 四、临床意义 五、方法学评价 六、注意事项,一、原理,在pH4.2缓冲液中,溴甲酚绿(BCG)与白蛋白结合形成蓝色复合物(血清白蛋白在pH4.2的缓冲液中带正电荷,在非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的染料溴甲酚绿结合形成蓝绿色复合物),在波长620nm处有最大吸收峰,其颜色深浅与白蛋白浓度成正比。与经过同样处理的白蛋白校准液进行比较,即可计算出样品中白蛋白含量。,溴甲酚绿(BCG)与血清蛋白呈非特异性反应,但是在反应的30秒钟内溴甲酚绿(BCG)与白蛋

2、白结合形成蓝色复合物呈特异性反应。因此反应结束后应立刻比色测取吸光度。,二、测定方法 1、加样: 试管三只,于空白管中加入蒸馏水10 l,各管充分混匀。,2、分光光度计测定方法:波长620nm,空白管调零,测定标准管和测定管吸光度值,按公式计算测定结果。 计算公式: (40g/L),三、参考值: 总蛋白:6282 g/L 白蛋白:3555g/L 球蛋白:2030 g/L 白蛋白/球蛋白=1.52.5/1,四、临床意义:,1、白蛋白/球蛋白=1.52.5/1,通过计算其比值可以判定肝脏的功能情况; 2、白蛋白降低,其比值降低或倒置:慢性肝炎(肝细胞功能降低)、肝硬化(肝细胞坏死、肝腹水); 3、球蛋白大量降低:机体免疫功能降低。,五、方法学评价,1、操作简单、快速,受干扰因素小2、线性范围:1060g/L,3、RCV4%(批内重复测定变异系数)4、白蛋白的测定方法:有色氨酸含量法、燃料结合法、电泳法、免疫化学法和电化学测定法。,六、注意事项,1、应保持PH为3.82、BCG与多种蛋白呈颜色反应,及与a-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白结合显色,但血清中BCG在30秒内与白蛋白的反应最快,且呈主导地位3、实验小组分批间隔保温。,

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