1、生物化学课程网站,访问路径:“三峡大学”-“求索学堂”-“课程总揽”-“医学院”-“生物化学与分子生物学”-“医用生物化学” 网站内有理论课和实验课的教学大纲、教案ppt、习题和考试样卷等，根据需要下载学习,生化实验室规章制度和实验要求,1. 准时到实验室，不迟到，不早退。进入实验室须穿实验服。 2. 保持环境的肃静，不高声说话，严禁用器械及动物开玩笑。 3. 严格按操作规程使用仪器，仪器发生故障、损坏、丢失时，应立即报告老师，凡违反操作规程而损坏仪器者，要追究责任。 4. 认真观察实验现象并记录好原始数据；节约试剂，节约水电。 5. 实验完毕，洗净所用器材，合理处理固体舍弃物和废液。经指导教
2、师同意，方能离开实验室。 6. 值日生负责实验室卫生，关好水、电、门窗，经教师检查后方可离开。,试剂使用,1. 仔细辨认标签，确定所需试剂及浓度。 2. 吸量管与所需试剂号码务必对准。 3. 用后盖好瓶盖，归还原处，以免影响他人使用。,本学期实验内容,实验课教学改革,改革方案：前2次实验由老师讲解，从第3次实验开始，同学们参与实验教学，担任“小老师”，具体安排如下： 本实验室共分为6个小组，每组45人，各组推选1名组长； 第3个实验，由1、2、3组各自准备与本次实验内容相关的ppt，并各选派1位同学讲演，每位同学讲演时间1012分钟，讲演结束后为自由提问、讨论和老师点评时间（30分钟）； 第4
3、个实验，由4、5、6组进行ppt准备和发言，方法同上； 第5-10个实验依次类推； 注意：每次的ppt准备需全小组同学共同参与，但由小组内的不同同学发言，做到每个同学都有发言机会； ppt 制作（包括材料的收集准备、内容的条理性和演示效果等）、每个同学的讲演（内容的熟悉程度、讲解的条例性、对同学问题的回答情况）、回答问题、团队合作都将计入实验成绩。,实验成绩计算方法,实验成绩占生化总成绩的35% 实验成绩 考勤：10% 实验报告：20% 操作：30% ppt 制作、讲演、回答问题情况：40% 自评：每次讲演完后，各组评出自己组内的前两名 互评：非讲演组（如4、5、6组）给讲演组（如1、2、3组
4、）分别从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作方面进行排序 教师评价：教师从ppt制作、讲演、回答问题、团队合作等方面对讲演组进行评价，提出表扬和改进意见等,实验评分标准,考勤：迟到扣10分；旷课为0分 操作： 不穿白大褂，-10分不带实验教材，-10分 没有预先预习实验，-10分 实验操作不规范，-5分 过失造成玻璃器皿损坏，-5分 过失造成仪器损坏，-10分 没有清洗玻璃器皿和还原仪器，-10分 没做清洁，-10分,实验报告: 没有实验目的，-5分 没有实验原理，- 5分 没有实验过程，-10分 涂改实验数据，-20分 没有分析与实验讨论，-15分 没有报告临床意义，-5分,刻度吸管&微量可
5、调式移液器的使用、校正与数据处理,彭帆 E-mail: Tel: 13972604407 Office tel: 0717-6396818,生物化学基本实验技能训练（一）,实验目的,清楚生物化学实验室规章制度和实验要求 掌握刻度吸管的分类和使用方法 掌握微量可调式移液器的原理和使用方法，了解可调式移液器的校正方法 建立实验误差、准确度和精确度的概念，掌握误差分析计算方法,问题：将溶液从一容器转移到另一个容器。用什么量具？如何确定容量？是否精准？,一、刻度吸管(pipette)的分类和操作,分类： 10mL, 5mL, 2mL, 1mL, 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL(吹?),刻度吸
6、管的操作方法,1使用前： 检查刻度吸管是否配套。 2吸液： 排插吸按 3调节液面：放靠 4放出溶液：靠放停； *若吸管上标有“吹”，则需将管内残余液体吹出。,工欲善其事，必先利其器,微量可调式移液器(俗称“加样枪”)的构造和操作,5 mL移液器 (1-5 mL)1 mL移液器 (200-1000 uL)200 uL移液器 (20-200 uL)100 uL移液器 (20-100 uL)10 uL移液器 (0.5-10 uL)2 uL移液器 (0.1-2 uL),微量可调式移液器的构造,扭动转轴，可调整移液器容量,手指把手,吸头的排出器,容量指示窗口,吸头排出器套筒,吸头圆锥体,加样枪的操作方法
7、,1.容量调节：选定加样枪，调定所需容量读数。* 请勿将按钮旋出量程以外！,2. 枪头装配: 将加样枪垂直插入枪头中，稍用力左右转动使其紧密结合。* 请勿使劲敲击枪头盒！,4放出溶液：按1st 按2nd 松,3. 吸液：按1st插松靠,5弃去枪头：按排,注意事项,加样枪的正确放置当加样枪的枪头里有液体时，应垂直放置加样枪。维护保养不使用时，把加样枪的量程调至最大刻度；定期清洗移液枪 (肥皂水或60异丙醇 + 蒸馏水+自然晾干)；重复称量蒸馏水进行校准，环境温度为20-25。,问题,获得实验数据后，所得数据是否准确？可靠性如何？如何正确记录与处理实验数据？,三、实验结果的数据处理,准确度: 分析
8、结果与真值的接近程度, 用误差表示.误差: 测定结果(X)与真实值(XT)之间的差值.系统误差: 偶然误差: 绝对误差(Absolute error): E=X-XT相对误差(Relative error):,准确度与误差 (Accuracy & Error),系统误差: 由于分析过程中某些固定的原因造成的误差.,1.性质：（1）单向性、重复性（2）与测定次数无关（3）可以校正，大小、正负可以测定 2.产生原因：（1）方法误差 （2）仪器和试剂误差（3）操作误差 （4）主观误差 3.校正：改变方法，校正仪器，采用高等级试剂等。,偶然误差,1、性质:（1）大小可变（2）方向不定，有时正、有时负。
9、（3）只能减小，不能消除。2、产生原因：温度、气压、湿度、仪器性能、人为的终点判断的变化等。3、校正：不能消除，只有增加平行实验次数.,精密度与偏差 (Precision & Deviation),精密度:在相同条件下,各次分析结果间的接近程度，用偏差表示. 偏差: 测定结果(X)与平均值( )之间的差值. 偏差小,表示数据集中,精密度高;反之,数据分散,精密度低. 偶然误差影响分析结果的精密度.,绝对偏差(Absolute deviation, di) ：di=单个测量值(Xi)-平均值( ) 相对偏差(Relative deviation, dr) ：,标准偏差(Standard devi
10、ation，SD or S)相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSD)，又称变异系数(Coefficient of Variation ,CV),？准确度和精确度,Both accurate and precise,Precise but not accurate,Neither accurate nor precise,问题,当你把微量可调式移液器容量设定在100ul并把液体从试剂瓶转移到了试管。你是否确定所转移的液体体积就是100ul？ 如果所转移的液体体积与标示量不符，如何校正？,移液器的准确度与精确度,微量可调式移液器系统误差的校正,校准方法 ？ 必须考虑的环境与仪器的影响因素？ 温度、湿度、天平的精度、水的纯度等如何消除偶然误差的影响？,实验步骤,一、刻度吸管的操作：选择5mL、2mL的刻度吸管，按照教师要求，把相应体积的ddH2O移取到烧杯中，称重。重复该步骤3次。二、微量可调式移液器的操作： 选择1000 L、200 L的微量可调式移液器，按照教师要求，把相应体积的ddH2O移取到烧杯中，称重。重复该步骤3次。,实验结果,Density of water at different temperature,讨论,结合本人和本组的实验结果，分析移液管和微量可调式移液器的准确度和精确度。 为减小误差，在操作中要注意哪些方面？,
