1、常规八大项指标：粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、水份、灰份、钙、磷、水溶性氯化物；实验仪器一称量仪器1. 物理天平2. 分析天平二加热仪器1. 电炉和电热板（500W.800W.1000W.1200W）2. 高温电炉（带温度控制器）3. 烘箱4. 水浴锅5. 酒精灯和酒精喷灯三玻璃仪器1. 烧杯类1） 烧杯（体积 10ml5000ml）2） 锥形瓶3） 具塞锥形瓶和碘量瓶4） 烧瓶2.量具类1） 滴定管：酸式滴定管和碱式滴定管2） 量筒和量杯（5.10.25.50.250.1000.2000ml）3） 容量瓶（10.20.25.50.100.250.1000.2000ml）4） 移液管（2.5.10.
2、15.25.50ml）2. 试剂瓶类1） 广口瓶和小口瓶2） 滴瓶3. 试管类1） 普通试管（10mm75mm41mm225mm）2） 离心管（5.10.15.25.50ml）3） 比色管4. 其他玻璃仪器和陶瓷器皿1） 表面皿2） 干燥器3） 称量瓶4） 漏斗5） 坩埚四部分小型精密仪器1. 分光光度计2. 酸度计3. 离心机4. 振荡机5. 粉碎机6. 定氮仪说明：（1）实验中所涉及的化学试剂没有特别要求，均为化学纯，水为蒸馏水或相应程度水。（2）实验适用范围无特别说明均为配合饲料和单一饲料。（3）实验过程中提到的干燥后冷却没有特别说明都在冷却器中冷却 30min，恒重过程没有说明均为再烘
3、干 30min，再冷却 30min，再称重，直至达到相应要求。（4）实验中涉及滴定终点都是滴到预期颜色变化且 30s 不褪色为止。（5）一般单一饲料或配合饲料（固体）样品制备常用方法为用四分法将原始样品缩至500g，风干粉碎过 40 目，再用四分法按实验用量取。（6）对实验结果中提到的重复行要引起足够的重视，对于相对偏差超过要求的，决不能简单将实验结果取平均值，必须重新实验。第一部分 饲料常规成分分析方法实验一 饲料中干物质的测定1.适用范围 配合饲料和单一饲料2.原理100-105下烘去饲料中蛋白质，淀粉及细胞膜上的吸附水，得到干物质含量。3.试样的制备 用四分法将原始样品缩至 500 克，
4、风干后粉碎至过 40 目，再用四分法缩至 20 克，装入密封器，放阴凉干燥处保存。4.测定 洗净称样皿，在 100-105烘箱中烘 1 小时，取出，再干燥器中冷却 30分钟后称重，称准至 0.0002 克，再烘 30 分钟，同样冷却，称重，直至二次称重之差小于0.0005g 为止，取最小量为称样皿重。用已恒重称样皿准确称取 5g 样品（准确至 0.0002g） ，不盖称样皿盖，在 100-105烘箱中烘 3 小时，取出，加盖，同样冷却称重，再同样烘 1小时，冷却，称重，直至二次称重之差小于 0.002g 即为恒重。5.结果计算（1） 计算水分（%）=式中：m1105烘干前试样及称样皿重（g）
5、；m2105烘干后试样及称样皿重（g） ；m0已痕重的称样皿重（g） 。（2） 重复性（3） 每个试样取二个平行样测定，取平均值为测定结果，两个平行值不得超过 0.2%，否则重做。实验二 饲料中粗蛋白质的测定（定氮仪法）1. 原理试样中含氮化合物 浓硫酸处理 氨气 浓硫酸吸收 硫酸铵 四硼酸铵 标准溶液滴定 含氮量2. 试剂m1- m2m1- m0 浓碱下蒸馏硼酸吸收（1） 硫酸（GB 625-77）：化学纯（2） 硫酸铜（GB 665-78）：化学纯（3） 硫酸钾（HG 3-920-76）或硫酸钠（HG 3-908-76）：化学纯（4） 氢氧化钠（GB 628-78）：分析纯，40g 溶于
6、100ml 水中配成 40%水溶液（5） 硼酸（GB 628-78）：分析纯，40g 溶于 100ml 水中配成 2%溶液（6） 混合指示剂：甲基红（HG 3-958-76）0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿（HG 3-1200-79）0.5%乙醇容易，二溶液 1：1 混合（7） 0.01mol/l 盐酸标准溶液（8） 硫酸铵（GB 1396-28）：分析纯（9） 蔗糖（HG 3-1001-76）：分析纯3. 实验步骤（1） 样品消化称 0.3-0.5g 样品于消化管中 加 3-5g 无水硫酸钠或硫酸钾 加 10ml 硫酸在 420消化炉上消化（约 1h） 深蓝色澄清液体 冷却 15min 加 20m
7、l 蒸馏水，摇匀（2） 蒸馏1） 接收瓶准备：取 25ml 硼酸（4%）于锥形瓶，加 4 滴混合指示剂4. 空白实验 每次分析时，应该做所用化学试剂及分析系统的空白实验以补偿他们对实验的影响。5. 结果计算（1）计算粗蛋白质（%）= 100式中：v2试样滴定时用标准盐酸量v1空白滴定时用标准盐酸量c盐酸标准溶液的浓度m试样质量0.0140每 ml1NHCL 标准溶液相当于 N 的克数6.25氮换算成蛋白质的平均系数（3） 重复性每个试样取二个平行样进行测定，取其平均值，二次滴定用标准液之差不超过0.1ml。cp%25%时，允许相对偏差为 1%；10%cp%25 时，允许相对偏差为 2%；cp%
8、10%时，允许相对偏差为 3% 实验三 饲料中粗脂肪的的测定1.原理：在索氏提取器中用石油醚（HG3-1002-76 化学纯）提取试样，计算绝干试样的损失量。 2.测定 脱脂滤纸和称样皿干燥（1052）恒重至相差 0.0008g，滤纸用铅笔编号，称取 2 克样品包入滤纸中，放入称样皿， 105烘 3h，冷却称重，再干燥30min，直至恒重。然后放入浸提器中，石油醚刚淹没滤纸包为好，50下水浴加热，提取（v2-v1）c0.01406.25m约 5 小时，取出滤纸包，置于通风橱中 20min，待石油醚挥发完，105烘箱烘 1h，干燥器中冷却 30min，称重，恒重至相差 0.0001g。3.结果计
9、算（1）计算粗脂肪（%） = 100试中：w1已恒重的滤纸加称样皿重w2已恒重的滤纸，称样皿加样品重w3已恒重的滤纸，称样皿加绝干样品重w4已恒重的滤纸，称样皿加浸提后的样品重 （2）重复性每个试样取二个平行样进行测定，取其平均值；粗脂肪含量在 10%以上，允许相对偏差为 3%；粗脂肪含量在 10%以下，允许相对偏差为 5% 。实验四 饲料中水溶性氯化物的测定法一：快速法1.原理 试样搅拌溶解氯化物 ，用铬酸钾作指示剂，用标准硝酸银溶液滴定。2.试剂准备（1） 铬酸钾指示剂：10%铬酸钾水溶液（2） 氯化钠（GB 12530-77）：于 500 灼烧 1h，干燥器中冷却保存，称 5.8454g
10、，溶解于水中，转入 1000 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，为 0.1N 氯化钠标准溶液；（3） 0.1N 硝酸银标准溶液：取硝酸银（分析纯）16.989g，溶于 1000ml 水中。贮存于棕色瓶中，即为 0.1N 硝酸银溶液。标定：准确取氯化物标准溶液 25ml，于 250ml 锥形瓶中，加入 25ml 水及 0.5ml 铬酸钾指示剂，用硝酸银标准溶液滴定，出现红棕色，且 30 秒不褪色为终点。 硝酸银标准溶液的当量浓度 N = =M/V0.4277 式中：M 为氯化钠的重量；V 为 硝酸银标准溶液的体积；0.05845 为与 1ml 硝酸银标准溶液（1N）相当的氯化钠克数。3.测定5g 左
11、右样品 取上层清液 20ml+ 硝酸银滴定 溶液呈砖红色4结果处理NaCl% = 100式中：V硝酸银溶液的体积 mlN硝酸银溶液的当量浓度58.45与 1mol 硝酸银相当的氯化钠的克数W3-w4W2-w1 M25V0.058451000加 100ml 蒸馏水搅拌 15min，静置 15min 蒸馏水 50ml铬酸钾指示剂 1mlVN10058.45M201000M试样重 g法二：国标法1.原理Cl- + AgNO3 Agcl+硫氰酸铵AgCNS+NH4NO32.试剂准备（1） 硝酸（2） 硫酸铁（60g/L ）溶液：称取硫酸铁Fe2(so4)3XH2O60 克，加水微热溶解后，加水至 10
12、00ml。（3） 硫酸铁指示剂 250g/l 的硫酸铁水溶液，过滤除去不溶物，与等体积的浓硝酸混合均匀。（4） 氨溶液 1+19 水溶液（5） 硫氰酸铵(0.02mol/l)溶液：称取硫氰酸铵 1.52g，溶于 1000ml 水中。（6） 氯化钠标准贮备溶液 ：基准级氯化钠于 500 灼烧 1h，干燥器中冷却保存，称5.8454g，溶解于水中，转入 1000 容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，为 0.1N 氯化钠标准溶液（7） 氯化钠标准工作溶液（0.02mol/l）：准确吸取氯化钠标准贮备溶液 20ml 与 1000容量瓶中，定容。（8） 硝酸银标准溶液 （0.02mol/l）：称取 3.4g
13、硝酸银溶于 1000ml 水中，贮于棕色瓶中。1) 体积比 吸取硝酸银溶液 20ml，加硝酸银 4ml，指示剂 2ml，在剧烈摇动下用硫氰酸铵溶液滴定，滴至终点为淡红色。二溶液的体积比为2) 标定 氯化钠标准溶液 10ml100ml 容量瓶 硝酸 4ml 震荡使沉淀凝结，定容过滤于三角瓶中 取定硝酸银标准溶液 25ml容液 50ml+硫酸铁指示剂 2ml 硫氰酸铵溶液滴定 红棕色硝酸银标准溶液浓度=式中：m氯化钠质量 gv1硝酸银标准溶液体积 mlv2硫氰酸铵溶液体积 mlF 硝酸银与硫氰酸铵溶液的体积比0.05845与 1ml 硝酸银标准溶液（1mol/l）相当的氯化钠质量3.仪器准备（1）
14、 实验室用样品粉碎机硝酸银溶液体积硫氰酸铵体积m20/100010/1000.05845（v1-FV2100/50）（2） 分样筛 孔径 0.45m（40 目）（3） 分析天平（4） 刻度移液管 10，2ml（5） 滴定管 酸式，25ml（6） 容量瓶 100，1000ml（7） 烧杯 250ml（8） 滤纸 快速，直径 15cm；满速，直径 12.5cm4.测定步骤称取 3g 左右样品 + 硫酸铁溶液 50ml + 氨水溶液 100ml 取 50ml 滤液浓硝酸 10ml 100ml 容量瓶 取 50ml 澄硝酸银标准溶液 25ml清液 淡橘红色5.数据处理（1）计算 氯元素百分含量= 10
15、0式中 m样品质量v1硝酸银溶液体积 mlv2滴定消耗的硫氰酸铵溶液体积F硝酸银与硫氰酸铵溶液体积比C硝酸银溶液的浓度0.0355与 1ml 硝酸银标准溶液 1mol/l 相当的氯元素质量 g（2）重复性每个样品取 2 个平行样进行测定，以算术平均值为分析结果。氯含量在 3%以下，允许绝对差 0.05，含量在 3%以上，允许相对偏差 3% 6.注意事项（1）在标定硝酸银溶液时，或滴定试样滤液时，速度应快，且不要过分剧烈摇动，以防下述反应：AgCl+CNS- AgCNS+Cl- ，多消耗硫氰酸铵溶液，使结果偏底。（2）本法测定中是根据氯离子来计算氯化钠含量的，但由于配合饲料或单一饲料（如鱼粉或合
16、成赖氨酸等）中，都带入氯离子，所以此估测值仅做参考值。实验五 饲料中粗灰分的测定1. 原理：在 600灼烧后所得残渣，用重量百分比表示2. 测定（1） 将干净的带盖坩埚放入茂福炉中在 600下烧 30min（坩埚盖半开） ，等炉温降至 200，将坩埚移入干燥器中，冷却 1h 后称重，再将坩埚放入茂福炉中灼烧，恒重。（2） 在坩埚中称取风干样 2 克。（3） 将试样在电炉上炭化至无烟，再移入茂福炉中，在 600下灼烧，坩埚盖半开，约烧 4h，直至样本呈白色为止。搅拌，放置 10min干快速滤纸过滤搅拌，放置 10min干过滤入 150ml 锥形瓶中沉化硫酸铁指示剂 10ml硫氰酸铵溶液滴定(V1
17、-V2F100/50)c1500.0355m50（4） 冷却完毕，待炉温降至 200，移入干燥器内冷却 1h，称重，再将坩埚放入茂福炉中烧 15min，再冷却，恒重至相差 0.0001 克。3. 数据处理粗灰分含量（%）= 100实验六 饲料中钙的测定1. 原理：高温将试样中有机物破坏，使钙制备成溶液，用三乙醇铵，乙二胺，盐酸羟铵 和淀粉溶液消除干扰离子的影响，在碱性溶液中以钙黄绿素为指示剂，用 EDTA 标准溶液络合滴定钙。2. 试剂准备（1） 盐酸羟铵（2） 盐酸：1+1（v1+v2）（3） 浓硝酸（4） 高氯酸（5） 氢氧化钾溶液：200g/l（6） 三乙醇胺水溶液：1+1（v1+v2）
18、（7） 乙二胺水溶液：1+1（v1+v2）（8） 淀粉溶液：10g/l，称取 1g 可溶性淀粉放入 200ml 烧杯中，加 5ml 水润湿，加 95ml 沸水搅拌，煮沸，冷却备用（9） 孔雀石绿水溶液：1g/L（10） 钙黄绿素-甲基百里香酚蓝指示剂：0.1g 钙黄绿素与 0.13g 甲基百里香酚蓝，5g 氯化钾研细，贮于磨口瓶中备用（11） 钙标准溶液：0.0010g/ml（12） 乙二胺四乙酸钠标准滴定溶液（EDTA） ，T=0.4mg/ml（滴定度） ，表示 1ml标准溶液相当于 0。4mg 钙。3. 测定（1） 试样分解干法：测定灰分后的试样+盐酸溶液 10ml+浓硝酸数滴 ，小心煮沸
19、，冷却，转入100ml 容量瓶中，冷却，定容，摇匀。湿法（无机物或液体饲料）：称取 0.2g 样品于凯氏烧瓶中，加入浓硝酸 30ml，加热煮沸 5min，取下冷却后加入高氯酸 10ml，小心煮沸驱逐黄烟至白烟（严禁蒸干） ，冷却后加水 20ml，煮沸驱逐二氧化氮，冷却后转入 100ml 容量瓶，定容，摇匀。（2） 测定5-10ml 试样分解液+ +氢氧化钾溶液 无色（坩埚重+灰分重）-坩埚重样品重淀粉溶液 10ml水 50ml乙二胺 1ml三乙醇胺 2ml1 滴孔雀石绿5ml 氢氧化钾溶液黑 色背景下 EDTA 滴定 绿色荧光消失4.数据处理（1） 计算Ca% = 100（2） 重复性做二个平
20、行样，对钙量在 5%以上，允许相对偏差在 3%，钙量 5-1%，允许相对偏差 5%，钙量 1%以下，允许相对偏差 10%。5.标准溶液的配置和标定（1） 0010g/ml 钙标准溶液的配置：准确称取 2.497g 于 105-110干燥至恒重的基准碳酸钙，溶于 40ml 盐酸中，加热赶除二氧化碳，冷却，用水转移至 1000ml 容量瓶中，稀释至刻度。（2） T=0.0004g/mlEDTA 标准滴定溶液的配置：称取 3.8EDTA 二钠放入200ml 烧杯中加 200ml 水，加热溶解冷却后用水转移到 1000ml 容量瓶中，稀释至刻度。（3） EDTA 标准滴定溶液的标定：准确吸取钙标准溶液
21、 10ml，同试样测定进行滴定。 EDTA 滴定溶液对钙的滴定度为钙标准溶液的浓度 钙标准溶液体积/EDTA 标准溶液的用量实验七 饲料中总磷量的测定1.原理 游离磷 + 钒钼酸铵 酸性溶液中 磷钼黄（黄色） ，420nm 波长下比色测定。2.试剂（1） 盐酸（2） 硝酸（3） 高氯酸（4） 钒钼酸铵显色剂：称取偏钒酸铵 1.25g，加硝酸 250ml，另称取钼酸铵25g，加水 400ml 加热溶解之后，在降温条件下将后者倒入前者，定容，避光保存。（5） 磷标准溶液 ：将磷酸二氢钾在 105干燥 1h，在干燥器中冷却 30min，称取 0.2195g 溶于水，定量转入 1000ml 容量瓶中，
22、加硝酸 3ml，定容，即为50ug/ml 的磷标准液。3.测定（1） 试样的分解：同测钙。（2） 标准曲线的制作 准确移取 01.02.05.010.015.0ml 磷标准溶液于 50ml 的容量瓶中，各加钒钼酸铵 10ml，定容，放 10min，以 0ml 溶液为参比，用 10mm 比色池，420nm 波长下，测吸光度。以磷为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线或做出回归方程。（3） 试样的测定 准确移取试样分解液 ml 于 50ml 容量瓶中，加钒钼酸铵10ml，定容，比色测定吸光度，用标准曲线查得试样分解液的含磷量。0.1g 盐酸羟胺钙黄素少许EDTA 标液对钙的滴定度消耗 EDTA 体积
23、试样质量移取分解液体积/分解液总体积4.结果计算 磷% = 标准曲线查得含磷量/试样质量移取试样分解液体积100重复性：取至少二个平行样取平均值。含磷量小于 0.5%，允许相对偏差小于 10%，含磷量在 0.5%之上，允许偏差不超过 3%。实验八 饲料中粗纤维的测定1.原理 用固定量的酸和碱，在特定条件下消煮样品，再用乙醚，乙醇除去醚容物，经高温灼烧扣除矿物质的量，所余为粗纤维。2.试剂（1） 硫酸：分析纯，0.2550.005N（每 100ml 含硫酸 1.25g，用氢氧化钾标准溶液标定。 ）（2） 氢氧化钠：分析纯，0.3130.005N（每 100ml 含氢氧化钠 1.25g，用茎准邻苯
24、二甲酸氢钾标定）（3） 酸洗石棉：将中等长度洗涤石棉薄铺在蒸发皿中，放入 600茂福炉中灼烧16h，用配置的 1.25%硫酸浸没石棉，煮沸 30min，过滤，用蒸馏水洗净酸，同样用 1.25%氢氧化钠煮沸 30min，过滤，用蒸馏水洗净。烘干。放入 600茂福炉中灼烧 16h，烧去有机物。（4） 正辛醇3.测定（1） 取 2g 样品用乙醚提去脂肪后，全部移入 500ml 锥形瓶中。（2） 在锥形瓶中加煮沸的 0.255N 硫酸液 200ml 和 1 滴防泡沫剂。用蜡笔在液面处画一刻度线，在锥形瓶口加表玻璃盖或连接回流冷凝瓶。（3） 将锥形瓶立即放在电热板上加热，使瓶内液体在 2min 内煮沸，
25、继续煮沸30min，每隔 5min 摇动锥形瓶一次，以充分混合瓶内物质，避免样品贴杂液面以上的瓶壁上，在加热过程中溶液若有蒸发，应添加煮沸的蒸馏水至锥形瓶的200ml 刻度处。（4） 30min 后立即移开锥形瓶，随后用铺有滤布的抽滤漏斗抽滤。调节漏斗抽气速度，使 200ml 滤液在 10min 内全部滤净，再以沸水洗涤锥形瓶与残渣，直至滤液用蓝色石蕊试纸检查呈中性反应为止。（5） 用 200ml 煮沸的 0.313N 氢氧化钠溶液，将滤布上的残全部冲入原锥形瓶中，在锥形瓶中加表玻璃皿。（6） 立即将锥形瓶放在电热板上，在 1min 内煮沸，重复（3） （4） ，在洗涤过程中可先用 25ml 煮沸的 0.255N 硫酸液，再用沸水洗涤，直至滤液用红色石蕊试纸检查诚中性反应为止。（7） 在抽滤瓶上安装一个铺有石棉的致密薄层古氏坩埚。（8） 将滤布上的饿残渣全部移入古氏坩埚，进行方法同（5） ，但是只用蒸馏水冲洗，用抽滤瓶抽去古氏坩埚中的水。再用 25ml 乙醇冲洗坩埚中的水。（9） 将坩埚及内容物放入 105烘箱中烘至恒重。（10） 将坩埚及内容物先在电炉上炭化，然后移入 600茂福炉中灼烧，至恒重（约30min） 。4.计算粗纤维% = 坩埚及内容物烘干后的重量-灰化后坩埚及内容物重量/样本重 100
