1、注册分类：化学药品 6 类 资料项目编号：9申请生产研究资料甘露醇确证化学结构或者组份的试验资料及文献资料研究机构(盖章)：兵器工业非金属材料理化检测中心研究机构地址：济南市天桥区田家庄东路 3 号研究机构联系电话：研究负责人（签字）：试验者姓名：尤瑜升、华兰、冀克俭、吴立军、邓卫华等试验时间：2005 年 02 月 1 日-2005 年 03 月 31 日原始资料保存地点：山东*药业有限公司品质管理部联系人：栾少华联系电话： 山 东 *药 业 有 限 公 司第 9-1 页资料 9、确证化学结构或者组份的试验资料及文献资料一 、 甘 露 醇 的 化 学 结 构 式 、 分 子 式 、 分 子
2、量化学结构式：分子式：C 6H14O6分子量：182.17二、甘露醇和对照品的来源、批号供试品： 山东*药业有限公司 批号：200502001被仿品：河北华旭药业有限责任公司 批号：0501023三、 样品的精制方法将甘露醇粗品溶解后加入结晶机中，降温至 16-18，经过离心分离后，将甘露醇一级精制品再次溶解后，转移到三口烧瓶中，加入活性炭，脱色30-40 分钟，脱色后的料液转移到结晶机中，降温至 16-18，经过离心分离后，微波干燥得甘露醇。四、 样品的含量按照中国药典2005 年版 二部第 72 页中方法，滴定含量法测定样品的含量。取本品约 0.2g，精密称定，置 250ml 量瓶中, 加
3、水使溶解并稀释至刻度, 摇匀；精密量取 10ml，置碘量瓶中，精密加入高碘酸钠溶液 50ml，置水浴上加热 15 分钟，放冷，加碘化钾试液 10ml，密塞，放置 5 分钟，用HO H H OHOHH OH HO HHO第 9-2 页硫代硫酸钠滴定液滴定，至近终点时，加淀粉指示液 1ml，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每 1ml 硫代硫酸钠滴定液相当于0.9109mg 的 C6H14O6。含 C6H14O66 ：供试品 100.02%；被仿品 99.87%。五、样品的旋光度称取硼砂 6.4g 于 50ml 容量瓶中，准确加入相当于干物质 5g 的试液，振摇，在 5060的水浴
4、中温热至硼砂完全溶解，冷却至室温后，用水稀释至刻度，摇匀，放置 2h，过滤。旋光仪开启电源约 5min，钠光灯发光正常，将蒸馏水加入 2dm 旋光测定管中，调至零点，再用样品冲洗旋光测定管两次，将待测液充满旋光测定管，将盖旋紧，气泡旋至膨胀圈上方，放入旋光仪内，测定 。旋光度：供试品+23.5；被仿品+23.7 。六、结构确证试验1 有机元素分析仪器：PerkinElmer PE2400 元素分析仪；测量元素为 C、H 。甘露醇样品和对照品的 C、H 元素百分含量与理论值相符合。表 1-1 甘露醇样品和对照品的 C、H 元素百分含量样品 对照品元 素1 2 1 2理论值CH39.637.813
5、9.667.7139.617.7039.587.7639.567.752 紫外吸收光谱（UV ）仪器：Perkin-Elmer Lambda 900 紫外-可见- 近红外光光度计试剂：水、甲醇、0.1mol/L HCl、0.1mol/L NaOH。2.1 紫外吸收光谱图第 9-3 页甘露醇样品及对照品在水、0.1mol/L HCl 溶液，0.1mol/L NaOH 溶液和甲醇中的紫外吸收光谱图分别见图 2-1、2-2、2-3、2-4 、2-5、2-6、2-7 、2-8，两者的 UV 谱基本一致 UV 谱显示，样品及对照品在近紫外区（200400nm）未见 UV 吸收峰，表明该样品分子结构中不含
6、有共轭结构，与甘露醇结构相符。3 红外吸收光谱仪器：NICOLET Magna 750 FT-IR校正和检定：按中国药典 2000 年版二部对仪器进行校正，符合规定。制样方法：KBr 压片。3.1 红外光谱图甘露醇样品及对照品的 IR 谱图见图 3-1、3-2，两者的 IR 谱基本一致。3.2 各吸收峰归属甘露醇样品的 IR 谱各吸收峰归属见表 3-1。表 3-1 甘露醇样品的 IR 谱各吸收峰归属吸收峰（ cm-1） 振动类型 基团3403、32862985、2969、2950、29101486、14591419、703、6031081、1020VO-HVC-H C-H O-HVC-OOHC
7、H2，CHCH2，CHOHC-OH3.3 红外光谱解析3403cm -1、3286cm -1 为醇羟基的 O-H 伸缩振动吸收， 1419cm-1、703cm -1、630cm -1 为醇羟基的 O-H 面内和面外变形振动吸收， 1081cm-1、1020cm -1 为醇羟基的 C-OH 伸缩振动吸收，说明结构中含有醇羟基。2985cm -1、2969cm -1、2950cm -1、2910cm -1 为亚甲基 CH 的伸缩振动吸第 9-4 页收，1486cm -1、1459cm -1 为亚甲基和次甲基 CH 的变形振动吸收，说明结构中含有亚甲基和次甲基。该样品的红外光谱图特征与目标化合物的化
8、学结构相符合。4 核磁共振谱仪器：Varian INOVA-300 核磁共振波谱仪溶剂：DMSO-d6内标： TMS04.11H 核磁共振谱（ 1H-NMR）4.1.11H 核磁共振谱图甘露醇样品和对照品的 1H 谱分别见图 4-1、图 4-2，两者的 1H 谱基本一致。甘露醇样品的重水交换谱见图 4-3、 1H-1H 相关谱（COSY）谱见图 4-4。4.1.2 测定数据测定数据见表 4-1表 4-1 甘露醇样品在 DMSO-d6 中的 1H-NMR 数据序号化学位移 (ppm)多重性 质子数COSY (ppm)5，54，46，61b，1 b4.474.404.203.623.55dtdmt
9、222223.463.39，3.623.553.39，4.404.204 5 6 6 5 4OH OH OH OH OH OHCH2 CH CH CH CH CH21 2 3 3 2 1第 9-5 页3，32，21a，1 a3.463.39mm224.473.62，4.404.2.113C 核磁共振谱图甘露醇样品和对照品的 13C-NMR 谱分别见图 4-5、图 4-6，两者的 13C-NMR 谱基本一致。甘露醇样品的 DEPT 谱见图 4-7、 13C-1H 相关谱（HMQC 见图 4-8、远程 13C-1H 相关谱（ HMBC）见图 4-9。4.2.2 测定数据测定数据见表 4-2表 4-
10、2 甘露醇样品在 DMS0-d6 中的 13C-NMR 数据序号化学位移(ppm)多重性HMQC(ppm)HMBC(ppm)2，23，31，171.1069.4563.66CHCHCH23.463.553.39，3.623.39，3.55，4.20，4.40，4.474.20，4.473.55，4.40，4.474.3 谱图解析4.3.1 1H-NMR 谱图解析根据 COSY 谱及重水交换谱，结合 HMQC 谱、HMBC 谱和 DEPT 谱，可对甘露醇样品的 1H 谱进行归属： 1H 谱显示有 6 组氢，由低场到高场氢的积分比例分别为2：2：2：2：2：4，与甘露醇的结构相符。4.47 处氢为
11、一组二重峰，质子数为 2；COSY 谱显示，该处氢与4 5 6 6 5 4OH OH OH OH OH OHCH2 CH CH CH CH CH21 2 3 3 2 1第 9-6 页3.46 氢相关；经重水交换后该峰消失，应为活泼氢；归属为 5 和 5位活泼羟基氢。4.40 处氢为一组三重峰，质子数为 2；COSY 谱显示，该处氢与3.39、3.62 氢相关；经重水交换后该峰消失，应为活泼氢；归属为 4 和4位活泼羟基氢。4.20 处氢为一组二重峰，质子数为 2；COSY 谱显示，该处氢与3.55 氢相关；经重水交换后该峰消失，应为活泼氢；归属为 6 和 6位活泼羟基氢。 3.39、3.62
12、处氢分别的一组多重峰；COSY 谱显示，这两种组氢相关，且都与 4.40 氢 4 和 4相关；HMQC 和 DEPT 谱显示，这两组氢与同一亚甲基碳相关；分别归属为 1 和 1位亚甲基上的两种个氢 1a、1b 和1b 。3.55 处的一组三重峰，质子数为 2；COSY 谱显示，该处氢与4.20 氢 6 和 6相关；归属为 3 和 3位次甲基氢。3.46 处的一组多重峰，质子数为 2；COSY 谱显示，该处氢与4.47 氢 5 和 5氢相关；归属为 2 和 2位次甲基氢。4.3.2 13C-NMR 谱图解析甘露醇分子结构中有 6 个碳，其中 1 和 1位亚甲基碳、2 和 2、3 和3位次甲基碳为
13、对称碳；而本品的 13C 显示有 3 组碳峰，这与甘露醇分子结构相符。根据 DEPT 谱、HMQC 谱及 HMBC 谱，可对甘露醇样品的 13C 谱解析如下：DEPT 谱显示无伯碳峰存在，这与甘露醇分子结构相符。DEPT 谱显示有 1 级仲碳峰存在，与甘露醇分子结构相符。63.66 的仲碳峰，在 HMQC 谱中与 3.39、3.62 氢 1 和 1相关，归属为 1 和 1位亚甲基碳；HMBC 谱显示，该碳峰与 3.55 氢 3 和 3 、4.40 氢 4 和4、4.47 氢 5 和 5远程相关，证实归属正确。第 9-7 页DEPT 谱显示有 2 组叔碳峰存在，与甘露醇分子结构相符。其中69.4
14、5 的叔碳峰，在 HMQC 谱中与 3.55 氢 3 和 3相关，归属为 3 和3位次甲基碳；HMBC 谱显示，该碳峰与 4.20 氢 6 和 6、4.47 氢 5和 5远程相关，证实归属正确。71.10 的次碳峰，在 HMQC 谱中与 3.46 氢 2 和 2相关，归属为 2和 2位次甲基碳；HMBC 谱显示，该碳峰与 3.39 氢 1a 和 1a、3.62氢 1b 和 1b4.20 氢 6 和 6 4.40 氢 4 和 4、4.47 氢 5 和 5远程相关，证实归属正确。DEPT 谱显示本品的 13C 谱中无季碳峰存在，这与甘露醇分子结构相符。5 质谱（MS）仪器：VG-QUATTRO 质
15、谱仪条件：EI；能量： 70eV5.1 质谱图甘露醇样品和对照品的 EI 质谱图见图 5-1、图 5-2，两者的 MS 谱基本一致。质谱测得本品的分子离子峰 M+1 ，其质荷比 m/z 为 183，与甘露醇+ 的分子量（分子式 C6H14O6，分子量 182）一致，与甘露醇样品的结构相符。5.2 断裂途径OH OHOHOHOHHOM+1 m/e 183+OH OHHOm/e 103 m/e 91OHHOOH+ HOOH+m/e 85OHOHHOOH+m/e 133OHOH +m/e 73OHOH+OHOHHOm/e 165OHOH+m/e 61HOOH OHOHOHm/e 164+第 9-8
16、页6 X 射线衍射仪器：PANalytical XPert Pro 粉末 X 射线衍射仪条件：Cu Ka，40 kV，35mA甘露醇样品和对照品的 X 射线衍射（XRD）谱图见图 6-1、图 6-2，两者的 XRD 谱基本一致。 X 射线衍射谱图显示，甘露醇样品及对照品均为结晶品。7 热分析仪器：TA STD Q600 DSC-TG 热分析系统。条件：升温速率 10/min，测量温度范围 30500，氮气气氛，流量40mL/min。7.1 热分析谱图甘露醇样品和对照品的热重分析（TG）曲线分别见图 7-1、图 7-2，差示扫描量热（DSC）曲线分别见图 7-3、图 7-4，两者的热分析谱基本一
17、致。7.2 测定结果TG 曲线显示，在 30250区域，甘露醇样品和对照品的 TG 曲线均为稳定直线，表明它们的热稳定性优异；当温度高于 260后，甘露醇样品及对照品均发生快速分解。从甘露醇样品的 DSC 曲线可看出，在大约 167.4的吸热峰应为样品的结晶溶融温度，与对照品的结晶熔融温度（167.4）相同。第 9-9 页8 综合解析元素分析结果表明甘露醇样品及对照品的组成与 C6H14O6 相符，测量不确定度在允许范围内。紫外吸收光谱表明，样品及对照品在近紫外区（200400nm）未见UV 吸收峰，表明该样品分子结构中不含有共轭结构，与甘露醇结构相符。红外光谱显示，本品结构中存在醇羟基及亚甲
18、基和次甲基团，这与甘露醇分子结构相符。 1H 谱显示有 6 组氢，由低场到高场氢的积分比例分别为2：2：2：2：2：4，与甘露醇的结构相符。甘露醇分子结构中有 6 个碳，其中 1 和 1位亚甲基碳、2 和 2、3和 3位次甲基碳为对称碳；而本品的 13C 谱显示有 3 组碳峰，这与甘露醇分子结构相符。DEPT 谱显示本品的 13C 谱中不含有伯碳峰和季碳峰、含有1 组仲碳峰和 2 组叔组碳峰，这与甘露醇分子结构相符。质谱测得本品的分子离子峰 M+1 ，其质荷比 m/z 为 183，与甘露醇+ 的分子量（分子式 C6H14O6，分子量 182）一致，与甘露醇样品的结构相符。将甘露醇样品同时进行紫
19、外光谱、红外光谱、核磁共振波谱、质谱分析、X 射线衍射分析及热分析，结果显示样品的结构与甘露醇结构相符。第 9-10 页委 托 协 议甲方：山东*药业有限公司乙方：兵器工业非金属材料理化检测中心甲方委托乙方就甘露醇进行结构确证试验并达成以下协议。甲方提供足够数量的样品，乙方提供以下项目检测试验：元素分析；紫外光谱分析；红外光谱分析；核磁共振分析；质谱分析；X 射线衍射分析；差热及热重分析。乙方向甲方提供以上内容完整的图谱及实验数据。乙方对甲方的试验内容及数据应严格保密，未经甲方书面同意不得向第三方透露。本协议有效期为二 00 五年二月一日至二 00 五年三月三十一日。甲方：山东*药业有限公司 乙方：兵器工业非金属材料理化检测中心第 9-11 页签字盖章： 签字盖章：年 月 日 年 月 日
