1、第七章 气相色谱法 P1541.为什么要采取程序升温？一般说它对色谱仪有什么特殊要求？答：当被测样品复杂，其中的组分 k范围过宽，而分离在恒温下进行，这往往会带来两个麻烦。首先是高沸点样品保留时间过长，而使色谱峰既宽又矮，使分离变坏，且难以准确定量。更严重的是某些高沸点组分迟迟不流出，若对未知样品，则会误认为组分已经全部洗脱出柱，但到了以后的分析中，它又被洗脱出来，造成组分的漏检和误检。其次对沸点过低的组分，峰会互相紧挨，而不能很好分离。解决此种麻烦的办法就是采用程序升温气相色谱法，即根据样品组成的性质使柱温按照人为优化的升温速率改变，从而是各组分能在各自获得良好分离的温度下洗脱。程序升温的优
2、点有分离改进、峰窄、检测限下降以及省时等。对色谱仪的特殊要求：（1）大都采用双柱双气路双监测器系统，可使在升温程序中因流失二造成的基线漂移得到补偿；（2）程序升温的柱室，要求其热容量低且绝热性好。柱室的门要便于手动或自动地打开或关合；（3）必须用经稳流阀的稳流高纯载气。15. 以 Chromosorb P 为载体，邻苯二甲酸二壬酯为固定液，固定液重 2.40g，其相对密度为 0.97gml-1，用皂膜流量计测得载气流量为 38.4mlmin-1，柱入口压力为 162kpa，大气压力 101kPa，柱温为 50.0，室温为 22.0，记录纸走速为 2.50cmmin-1.从色谱图上测得苯与空气峰
3、的间隔为 52.0cm，试计算：（1）调整保留时间；（2）净保留体积；（3）比保留体积；（4）分配系数。解：（1）根据调整保留体积的定义求得 VR=52.02.50=20.8 =20.838.4=799（2） K=273.15+50.0=323K=273.15+22.0=295 由表 7.6 查得压力校正因子=162101=1.60 =0.75622.0时水的饱和蒸汽压 Pa=2.6447103=()( )=20.838.40.756(323295)(1012.6447101103)mL=644(3)比保留体积 =273=6442.40273323=227(4)分配系数 =6440.972.4
4、0=26016.在一色谱柱上，A,B 两组分的比保留体积分别为 14.2 和 12.9mlg-1，且能达到基线分离，柱温为 100，柱死体积 9.80ml，固定液重 1.40g，试求该柱的理论塔板数。解：两组分达基线分离，得 =1.5相对保留值 =21=(2)(1)=14.212.9=1.10后出峰组分的分配比 2=(2)273=14.21.403732739.80=2.77A 和 B 达到基线分离时的理论塔板数为=162( 1)2(1+22 )2=161.52( 1.101.101)2(1+2.772.77)2=8.1103第八章 高效液相色谱法及超临界流体色谱法 P1883.试比较程序升温
5、与梯度洗脱的异同之处。答：共同点是两者目的都是改进色谱分离效果（提高柱效，改善峰形）以及缩短分析周期，都是按一定程序进行。不同之处是程序升温运用在气象色谱中，梯度洗脱运用在液相色谱中；程序升温改变的是温度，分配比由温度变化引起，梯度洗脱连续改变的是流动相的极性、PH 值或者离子强度。分配比。6.若分别对正相色谱和反相色谱而言，现有下列溶剂：正己烷、甲醇、水、乙酸乙酯、二氯甲烷、丙酮、乙腈和四氯化碳。若采用的工作波长为 254nm，则哪些溶剂可以选作流动相？以哪一种为优?正己烷甲醇 水 乙酸乙酯 二氯甲烷 丙酮 乙腈四氯化碳紫外截止波长/nm190 205 170 256 233 330 190
6、 265O（硅胶） 0.38 0.47 0.14O（氧化铝） 0.00 0.95 大 0.58 0.42 0.56 0.65 0.18工作波长应小于溶剂的紫外截止波长。乙酸乙酯、丙酮和四氯化碳都不适用；正相色谱应选用极性小的溶剂，正己烷比较适合；反相色谱应选择机型大的作为流动相，水、甲醇、乙腈符合要求、考虑到三者中水的极性最强，紫外截止波长最低，廉价易得。水最优。7.目前在高效液相色谱法所能解决的问题中，约有 70%使用反相色谱解决的，为什么？影响反相色谱的保留值因素有哪些？答：反向色谱法得到最广泛运用，是由于它以水为底溶剂，在水中可以加入各种添加剂，以改变流动相离子强度，PH 和极性等，以提
7、高选择性，而且水的紫外截止波长低，有利痕量组分的检测。反向色谱稳定性好，不易被强极性组分污染，水廉价易得。还有一个很重要的原因是可以利用二次化学平衡，是原来不易用反相色谱分析的样品也可以用反向色谱法分析。影响反向色谱保留值的因素：（1） 碳链长度 保留值随着碳链长度增加而增加；（2） 碳的负载量及表面覆盖率 保留值与其正相关；（3） 载体孔径尺寸和纯度 硅胶载体的孔径大，组分出入自由，收到排阻的概率小。硅胶中的杂质都有可能与组分发生选择性作用而影响保留值；（4） 残余硅醇基数目 由于位阻等各种鱼啊坏银，并不是硅胶表面所有的硅醇基都能发生键合反应，参与的硅醇基将会与组分发生相互作用影响保留值好而发生峰拖尾等现象，
