1、霍乱弧菌检验程序一、检查对象一天内腹泻三次或三次以上的病人。二、标本采集及处理1、 采集时间：在未服用抗生素前采样。2、 采集方式：用棉拭子或采便管从肛门插入直肠 35厘米取样，必须看到有粪便黏附才可：对于自然排出的水样便、呕吐物及保存液保存的标本可直接接种分离或吸取 0.5ML、成形大便取黄豆左右大小。3、 标本送检：标本采集后应立即送检。若不能立即送检，可保存于碱性蛋白胨水中尽快送检验。24 小时以上才能送检的标本，应使用文一腊二氏保存液保存。4、 标本处理：将标本直接分离接种于 4 号琼脂及放入810ML 碱性蛋白胨水中增菌。“两管三板”：送检标本马上接种一个 4 号琼脂平板、同时碱性蛋
2、白胨水培养管增菌；8 小时后接种增菌管内标本于第二块 4号琼脂平板，同时转种第二管碱性蛋白胨水；68 小时后继续接种第二管碱性蛋白胨水的标本于第三块 4 号琼脂平板上。三、检验程序：1、 弧菌形态：弧菌生长快、菌落大、培养 45 小时，原划线处有菌苔生长，810 小时可长出小菌落，16 小时菌落直径可达2 毫米。菌落略带灰色、半透明、扁平、稍隆起、光滑湿润，培养时间延长或室温放置后，菌落略带黄色，中心厚而周围透明，培养基含亚碲酸钾使得菌落成灰色，中心形成黑色金属碲沉淀。在平皿上挑取典型菌落做玻片凝集试验。2、 玻片凝集试验：首先要注意抗原抗体比例和保证抗原（菌株）的纯洁性，使用 O1 群和 O
3、139 群两种诊断血清。如未获单个菌落，可挑取可疑菌苔边缘透明部分做玻片凝集。注意，凝集的菌落应以生理盐水作对照，检查有无自然凝集；然后用此玻片显微镜下看动力（动力活泼如流星样） ；再将此玻片革兰氏染色看弧菌形态。3、 弧菌分型：稻叶型和小川型诊断血清做玻片凝集试验进一步分型。四、报疫程序：一旦发现阳性可疑标本立即用铁罐保存，通知送检科室，确认病人资料；上报医院总值班 2460 或 2560，派车送海珠区防疫站确证。五、标本处理：发现号菌阳性可疑标本，即送标本往防疫站确认。余下的碱性胨水管、直划板等放置于专用铁盒内，留待防疫反馈讯息后，浸 5%戊二醛消毒水 30 分钟后交工人煮沸1 小时再清洗或弃置。同时要登记于烈性传染病登记本和强毒菌株及污染物品处理登记本。
