1、ICS 点击此处添加 ICS 号点击此处添加中国标准文献分类号DB 江 西 省 地 方 标 准DB XX/ XXXXXXXXX蜂荷花粉Bee pollen of lotus点击此处添加与国际标准一致性程度的标识文稿版次选择XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施发 布I前 言本标准按照GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写给出的规则起草。本标准代替DB36/T 4802005 蜂荷花粉中的对应指标。本标准与DB36/T 4802005相比，主要技术变化如下：修改了规范性引用文件；修改和补充了“蜂荷花粉”等术语和定义；根据最新国家标准、
2、行业标准要求，修改和增加了部分“感官要求”、“理化要求”、“卫生安全要求”，增加了“蜂荷花粉定性鉴别”、“污染物限量要求”。修改了部分试验方法。修改了部分包装、标志、运输、贮存内容。增加了附录A 蜂荷花粉率的测定和附录 B电子显微镜下蜂荷花粉的形态特征。本标准由江西省农业厅提出并归口。本标准起草单位： 本标准主要起草人：本标准所代替标准的历次版本发布情况为：DB36/T 48020051蜂荷花粉1 范围本标准规定了蜂荷花粉的定义、要求、试验方法、包装、标志、贮存、运输要求。本标准适用于蜜蜂采集荷花（或白莲）花粉形成的团粒（颗粒）状蜂荷花粉或碎状蜂荷花粉，不适用于破壁蜂荷花粉及以蜂荷花粉为原料加
3、工成的产品。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的，文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最后版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T 191 包装储运图示标志GB 7718 食品安全国家标准 预包装食品标签通则GB 4789.1 食品安全国家标准 食品微生物学检验 总则GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物检验 霉菌和酵母计数GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物检验 菌落总数测定GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物检验 大肠菌群计数GB 4789.
4、36 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌O157:H7/NM检验GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验GB 5009.12 食品安全国家标准 食品中铅的测定GB 5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定GB 5009.4 食品安全国家标准 食品中灰分的测定GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定2GB 5009.6 食品安全国家标准 食品中脂肪的测定GB 5009.227 食品安全国家标准 食品中过氧化值的测定GB 19300-2014 食品安全国家标
5、准 坚果与籽类食品GB 2762 食品安全国家标准 食品中污染物限量GB 5009.7 食品安全国家标准 食品中还原糖的测定GB/T 5009.8 食品中蔗糖的测定GB/T 30359-2013 蜂花粉GB 31636-2016 食品安全国家标准 花粉3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1 花粉 bee pollen显花植物雄性生殖细胞。3.2 蜂荷花粉 bee pollen of lotus蜂荷花粉是工蜂采集荷花或白莲花粉（3.1），用蜜蜂分泌物或花蜜混合后形成的物质。3.3 破壁蜂花粉 bee pollen of breaking wall经加工，将纤维素和孢粉素构成的花粉外壳打
6、破的蜂花粉。3.4 碎蜂花粉 bee pollen debris蜂花粉团粒破碎后形成的蜂花粉粉末。3.5 蜂荷花粉率 bee pollen of lotus rate蜂荷花粉占总蜂花粉数量的百分比。3.6 杂花粉 multifloral bee pollen工蜂采集二种以上植物的花粉形成的蜂花粉，或二种以上单一品种蜂花粉的混合物。4 要求34.1 感官要求感官要求应符合表1的规定。表1 感官要求项目 要求色泽 具有蜂荷花粉固有的色泽，金黄色状态不规则的扁圆形团粒（颗粒）状或粉末状；无可见外来杂质，无虫蛀、无霉变气味 具有特有的荷花清香气，无异味滋味 具有蜂荷花粉特有的滋味，口感回味略甜，无异味
7、4.2 理化要求理化要求应符合表2的规定。表2 理化要求项目 指标水分 g/100g 6碎蜂花粉率 % 5蜂荷花粉率 % 90蛋白质 g/100g 15脂肪 g/100g 1.510.0总糖(以还原糖计) g/100g 15504黄酮类化合物（以无水芦丁计） （mg/100g） 400灰分 g/100g 5酸度（以 pH 值表示） 4.4过氧化值（以脂肪计）g/100g 0.084.3 卫生安全要求卫生安全要求应符合表3的规定。表3 卫生安全要求要求项目n c m M菌落总数/（CFU/g） 5 2 1000 10000大肠菌群/（MPN/g） 5 2 4.3 46霉菌计数/（CFU/g） 2
8、00致病菌 不得检出铅（以Pb计）/（mg/kg ） 0.5注：其中n值表示同一批次产品采取的样品件数，c值表示最大允许超出m值的样品数，m值表示微生物指标可接受水平的限量值，M值表示微生物指标的最高安全限量值。4.3 蜂荷花粉定性鉴别蜂荷花粉、碎蜂荷花粉定性鉴别应符合附录 A 的要求。4.4 污染物限量要求蜂荷花粉、碎蜂荷花粉中的污染物限量应符合 GB 2762 中的规定。5 试验方法5.1 感官指标检验5.1.1 色泽、状态5将样品置于洁净的白瓷盘中，在自然光下用肉眼观察。5.1.2 气味鼻嗅。5.1.3 滋味口尝。5.2 理化指标检验5.2.1 水分测定按 GB 5009.3 规定的第二
9、法执行。5.2.2 碎蜂花粉率测定用天平称取试样约 50g，精确到 0.1g，用 20 目筛筛出碎粒及碎粉末并称重。按（1）式计算。碎蜂花粉率（% ）= （1） 筛出的碎蜂花粉粉末质量 试样质量 100%5.2.3 蛋白质测定按 GB 5009.5 规定的方法执行。5.2.4 黄酮类化合物的测定按 GB/T 30359-2013 附录 B 中规定的方法执行。5.2.5 灰分测定按 GB 5009.4 规定的方法执行。5.2.6 脂肪测定按 GB 5009.6 规定的第二法执行。5.2.7 总糖测定样品按 GB/T 5009.8 中的盐酸水解处理后，再按 GB 5009.7 规定的第一法执行。5
10、.2.8 蜂荷花粉率测定按附录 A 中的 A.3 处理样品，在 100 倍或 400 倍光学显微镜下镜检，调节显微镜的光线和焦距，使花粉细胞清晰，以每视野中花粉细胞总数在 30-100 范围为宜，选取 5 个视野区域并对视野内的所有的花粉细胞进行计数，每次试验都应进行平行试验，结果按（2）式计算。6蜂荷花粉率（%）= （2）选 定 视 野内 蜂荷花粉 细 胞数 选 定 视 野内所有花粉 细 胞 总 数 100%5.2.9 酸度的测定按 GB 31636-2016 中 3.3 规定的方法执行。5.2.10 过氧化值的测定样品的前处理按照 GB 19300-2014 (坚果与籽类食品卫生标准)中的
11、 B.2，然后按 GB 5009.227 中的第一法 滴定法测定。5.3 卫生安全检验5.3.1 菌落总数按GB 4789.2规定的方法检验。5.3.2 大肠菌群按GB 4789.3规定的第一法检验。5.3.3 霉菌计数按GB 4789.15规定的方法检验。5.3.4 致病菌大肠埃希氏菌O157:H7按GB 4789.36规定中的第一法检验，沙门氏菌按GB 4789.4规定的方法检验，金黄色葡萄球菌按照GB 4789.10规定的方法检验。5.3.5 铅按GB 5009.12规定的第一法检验。6 包装、标志、运输、贮存6.1 包装用于食用的蜂花粉包装材料应符合食品安全要求，包装容器牢固、严密、整
12、洁、无破损、无泄漏。6.2 标志6.2.1 图示标志应符合 GB/T 191 标准规定。76.2.2 产品标签应符合 GB 7718 标准规定。6.3 运输6.3.1 运输工具应清洁卫生。6.3.2 不得与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易污染的货物混装运输。6.3.3 运输过程中，要避免高温，防风沙、防曝晒、防雨淋、防湿。6.4 贮存6.4.1 用真空充氮包装，在常温下保存。其他包装的应在-5以下保存。6.4.2 短期临时存放，应经过干燥和密闭处理后存于阴凉干燥处。6.4.3 贮存场所应清洁、干燥、无异味，防高温、防风雨、远离污染源。6.4.4 不得与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易挥发的物品
13、同场所贮存。_8附 录 A蜂荷花粉率的测定A.1 仪器A.1.1 光学显微镜：1010 倍、1040倍。A.1.2 高速离心机：转速10000r/min。A.2 试剂A.2.1 硫酸和冰乙酸混合液(体积比为19)。A.2.2 甘油(分析纯)。A.3 样品处理取蜂荷花粉1 g 置于15 mL 刻度离心管中，加入硫酸和冰乙酸(19)的混合液2 mL，浸没花粉粒。用玻璃棒捣碎花粉，沸水浴5 min。冷却后加蒸馏水定容至 10 mL。离心，弃去上清液，重复离心洗涤步骤3次。沉淀物加甘油数滴搅匀。用玻璃棒蘸取1滴涂布在载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下检视。A.4 计数取已处理好的玻片，在显微镜100倍或
14、400倍物镜下观察。如发现涂片中花粉颗粒过于密集导致重叠影响计数时，则应重新涂片，每视野中花粉颗粒数量在30个100个范围为宜。选取5个视野区域并对视野内的所有花粉颗粒计数，并与图谱对照鉴别不同的花粉品种。5个视野中蜂荷花粉颗粒数与5个视野中所有花粉颗粒的总数之比即为蜂荷花粉的花粉率。每次试验都应进行平行试验。A.5 蜂荷花粉的定性鉴别蜂荷花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为三裂圆形，直径约65 m 68 m。具三沟，沟宽。壁厚4.4 m5.2 m。表面有颗粒状纹。见图 A1。9a) 蜂荷花粉赤道面观形态（100） b) 蜂荷花粉极面观形态（100）图A1 蜂荷花粉细胞显微镜下的形态A
15、.6 结果计算检测结果按式(A.1) 计算:X = (A.1) 100%式中：X 蜂荷花粉花粉率，%；a 蜂荷花粉颗粒数，单位为粒；b 试样蜂花粉颗粒总数，单位为粒。10附 录 B电子显微镜下蜂荷花粉的形态特征B.1 蜂荷花粉细胞电镜下的形态a)荷花花粉赤道面观形态（2000） b)荷花花粉远极面观形态（2500）图B1 蜂荷花粉细胞电镜下的形态B.2 蜂荷花粉品种的鉴别 电子显微镜镜析法B.2.1 仪器 扫描电镜：TM-1000型（日本日立公司），放大倍数： 2010000倍；离子溅射仪：IB-5 型（日本日立公司）。B.2.2 步骤 B.2.2.1 样品称取和净化用四分法均匀选取蜂荷花粉样
16、品，在万分之一电子天平上称取 0.1 g 放入 2 mL 指型管中，加入纯净水（25）1.5 mL，置于超声波清洗器中超声 10 min，静止 3 min 后弃去上层清洗液，重复二次。同法再用丙酮（分析纯）和无水乙醇（分析纯）进行漂洗,然后将样品平摊在中性滤纸上自然风干。B.2.2.2 样品贴台和镀膜在粘有双面碳导电胶带的扫描电镜样品台上，用取样杆将样品均匀撒落在样品台上并轻轻展开，放入离子溅射仪（IB-5 型，日本日立公司）中，在真空度优于 0.1 Torr，电源开关在 HV，电压旋钮为115，电流表读数在 46 mA 时，进行溅射 5 min，取出后待电镜观察。B.2.2.3 扫描电镜观察将待观察的样品台放入扫描电镜（TM-1000 型，日本日立公司）内、在放大倍数：2010000 倍、加速电压：15 kV、室内温度：15 25、相对湿度： 70%、电 源：110 VA、频率 5060 Hz的条件下，调到最佳的清晰度、亮度、对比度和放大倍数，进行图像扫描拍摄。
